亮菌發(fā)酵工藝、亮菌多糖及藥效學(xué)研究.pdf

1、本論文以一株假蜜環(huán)菌作為生產(chǎn)菌株進(jìn)行研究，研究內(nèi)容包括：(1)亮菌固態(tài)發(fā)酵、液體深層發(fā)酵工藝的初步研究；(2)亮菌多糖的提取純化工藝研究及簡單結(jié)構(gòu)分析；(3)亮菌多糖藥效學(xué)研究。 主要研究結(jié)果如下：1.亮菌固態(tài)發(fā)酵工藝研究結(jié)果：以生長狀態(tài)和多糖含量為指標(biāo)確定了固態(tài)發(fā)酵的最佳培養(yǎng)時(shí)間為45d左右；同時(shí)通過對發(fā)酵生長期間各種酶的酶活測定，對其生長代謝規(guī)律及生長狀態(tài)進(jìn)行了初步了解。 2.亮菌液體發(fā)酵工藝研究結(jié)果：采用“復(fù)雜系統(tǒng)調(diào)控技術(shù)

2、”確定亮菌發(fā)酵的最適因素及其相應(yīng)量值。其最優(yōu)發(fā)酵工藝條件為：葡萄糖：2.2％、土豆汁18％、麩皮汁8％、酵母粉3％、氯化銨0.27％、磷酸二氫鉀0.06％、溫度28oC，轉(zhuǎn)速120r/min，搖瓶裝量55ml/250ml，發(fā)酵液起始PH5.5，接種量7％，發(fā)酵時(shí)間5.5d，菌絲體干重達(dá)到3.83g/100ml，比現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道值提高了約67.63％。 3.采用單因素實(shí)驗(yàn)和多因素正交試驗(yàn)，初步篩選出固態(tài)發(fā)酵提取多糖的最佳條件為：浸提溫度

3、90℃、浸提時(shí)間2.5h、固液比1：5。通過實(shí)驗(yàn)證明了采用反復(fù)凍融和高速離心的方法來處理液體發(fā)酵產(chǎn)物提取亮菌胞內(nèi)多糖，可以減少工作量及多糖活性的破壞，并且使多糖的提取率提高了約30％。同時(shí)本實(shí)驗(yàn)采用纖維素柱對亮菌胞內(nèi)多糖進(jìn)行了純化，并通過紅外掃描、瓊脂糖凝膠電泳、硫酸基含量測定對其進(jìn)行了結(jié)構(gòu)分析，證明了亮菌多糖活性的可靠性。 4.通過對血清溶血素值、RES吞噬功能、IL-2、NK細(xì)胞活性檢測，研究亮菌多糖對小鼠免疫功能的影響，表明亮