2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、7發(fā)酵過(guò)程控制,,1 發(fā)酵工業(yè)的無(wú)菌處理滅菌消毒除菌防腐,發(fā)酵染菌及其防治,什么是染菌?發(fā)酵過(guò)程中除了生產(chǎn)菌以外,還有其它菌生長(zhǎng)繁殖,一、染菌的影響,發(fā)酵過(guò)程污染雜菌,會(huì)嚴(yán)重的影響生產(chǎn),是發(fā)酵工業(yè)的致命傷。造成大量原材料的浪費(fèi),在經(jīng)濟(jì)上造成巨大損失擾亂生產(chǎn)秩序,破壞生產(chǎn)計(jì)劃。遇到連續(xù)染菌,特別在找不到染菌原因往往會(huì)影響人們的情緒和生產(chǎn)積極性。影響產(chǎn)品外觀及內(nèi)在質(zhì)量,2 發(fā)酵工業(yè)污染的防治策略,發(fā)酵染菌及其防治,

2、(一)染菌對(duì)發(fā)酵的影響,生產(chǎn)不同的品種,可污染不同種類(lèi)和性質(zhì)的微生物。不同污染時(shí)間,不同污染途徑,污染不同菌量,不同培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件又可產(chǎn)生不同后果,發(fā)酵染菌及其防治,1、發(fā)酵染菌對(duì)不同品種的影響,放線(xiàn)菌由于生長(zhǎng)的最適pH為7左右,因此染細(xì)菌為多,而霉菌生長(zhǎng)pH為5左右,因此染酵母菌為多。青霉素發(fā)酵染菌,絕大多數(shù)雜菌都能直接產(chǎn)生青霉素酶,而另一些雜菌則可被青霉素誘導(dǎo)而產(chǎn)生青霉素酶。不論在發(fā)酵前期、中期或后期,染有能產(chǎn)生青霉素酶的雜菌

3、,都能使青霉素迅速破壞。,不同菌,不同產(chǎn)品,鏈霉素、四環(huán)素、紅霉素、卡那霉素等雖不象青霉素發(fā)酵染菌那樣一無(wú)所得,但也會(huì)造成不同程度的危害。如雜菌大量消耗營(yíng)養(yǎng)干擾生產(chǎn)菌的正常代謝;改變pH,降低產(chǎn)量?;尹S霉素、制霉菌素、克念菌素等抗生素抑制霉菌,對(duì)細(xì)菌幾乎沒(méi)有抑制和殺滅作用。,發(fā)酵染菌及其防治,疫苗生產(chǎn)危害很大?,F(xiàn)在疫苗多采用深層培養(yǎng),這是一類(lèi)不加提純而直接使用的產(chǎn)品,在其深層培養(yǎng)過(guò)程中,一旦污染雜菌,不論死菌、活菌或內(nèi)外毒素,都應(yīng)全部

4、廢棄。因此,發(fā)酵罐容積越大,污染雜菌后的損失也越大。,不同產(chǎn)品,發(fā)酵染菌及其防治,2、污染不同種類(lèi)和性質(zhì)的微生物的影響,(1)污染噬菌體 噬菌體的感染力很強(qiáng),傳播蔓延迅速,也較防治,故危害極大。污染噬菌體后,可使發(fā)酵產(chǎn)量大幅度下降,嚴(yán)重的造成斷種,被迫停產(chǎn)。,,發(fā)酵染菌及其防治,(2)污染其它雜菌 有些雜菌會(huì)使生產(chǎn)菌自溶產(chǎn)生大量泡沫,即使添加消泡劑也無(wú)法控制逃液,影響發(fā)酵過(guò)程的通氣攪拌。有的雜菌會(huì)使發(fā)酵液發(fā)臭、發(fā)酸,

5、致使pH下降,使不耐酸的產(chǎn)品破壞。特別是染芽孢桿菌,由于芽孢耐熱,不易殺死,往往一次染菌后會(huì)反復(fù)染菌。,發(fā)酵染菌及其防治,3、不同時(shí)間染菌對(duì)發(fā)酵的影響,污染時(shí)間是指用無(wú)菌檢測(cè)方法確準(zhǔn)的污染時(shí)間,不是雜菌竄入培養(yǎng)液的時(shí)間。雜菌進(jìn)入培養(yǎng)液后,需有足夠的生長(zhǎng)、繁殖的時(shí)間才能顯現(xiàn)出來(lái),顯現(xiàn)的時(shí)間又與污染菌量有關(guān)。污染的菌量多,顯現(xiàn)染菌所需的時(shí)間就短,污染菌量少,顯現(xiàn)染菌的時(shí)間就長(zhǎng)。,,發(fā)酵染菌及其防治,(1)種子培養(yǎng)期染菌,由于接種量較小,生

6、產(chǎn)菌生長(zhǎng)一開(kāi)始不占優(yōu)勢(shì),而且培養(yǎng)液營(yíng)養(yǎng)豐富,培養(yǎng)液中幾乎沒(méi)有抗生素(產(chǎn)物)或只有很少抗生素(產(chǎn)物)。因而它防御雜菌能力低,容易污染雜菌。如在此階段染菌,應(yīng)將培養(yǎng)液全部廢棄。,,發(fā)酵染菌及其防治,(2)發(fā)酵前期染菌,發(fā)酵前期最易染菌,且危害最大。原因 發(fā)酵前期菌量不很多,與雜菌沒(méi)有競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì);且還未合成產(chǎn)物或產(chǎn)生很少,抵御雜菌能力弱。在這個(gè)時(shí)期要特別警惕以制止染菌的發(fā)生。染菌措施 可以用降低培養(yǎng)溫度,調(diào)整補(bǔ)料量,用酸堿調(diào)p

7、H值,縮短培養(yǎng)周期等措施予以補(bǔ)救。如果前期染菌,且培養(yǎng)基養(yǎng)料消耗不多,可以重新滅菌,補(bǔ)加一些營(yíng)養(yǎng),重新接種再用。,發(fā)酵染菌及其防治,(3)發(fā)酵中期染菌,發(fā)酵中期染菌會(huì)嚴(yán)重干擾產(chǎn)生菌的代謝。雜菌大量產(chǎn)酸,培養(yǎng)液pH下降;糖、氮消耗快,發(fā)酵液發(fā)粘,菌絲自溶,產(chǎn)物分泌減少或停止,有時(shí)甚至?xí)挂旬a(chǎn)生的產(chǎn)物分解。有時(shí)也會(huì)使發(fā)酵液發(fā)臭,產(chǎn)生大量泡沫。措施 降溫培養(yǎng),減少補(bǔ)料,密切注意代謝變化情況。如果發(fā)酵單位到達(dá)一定水平可以提前放罐,或者

8、抗生素生產(chǎn)中可以將高單位的發(fā)酵液輸送一部分到染菌罐,抑制雜菌。,發(fā)酵染菌及其防治,(4)發(fā)酵后期染菌,發(fā)酵后期發(fā)酵液內(nèi)已積累大量的產(chǎn)物,特別是抗生素,對(duì)雜菌有一定的抑制或殺滅能力。因此如果染菌不多,對(duì)生產(chǎn)影響不大。如果染菌嚴(yán)重,又破壞性較大,可以提前放罐。,發(fā)酵染菌及其防治,(二)發(fā)酵染菌對(duì)提煉和產(chǎn)品質(zhì)量的影響,1、發(fā)酵染菌對(duì)過(guò)濾的影響,染菌的發(fā)酵液一般發(fā)粘,菌體大多數(shù)自溶,所以在發(fā)酵液過(guò)濾時(shí)不能或很難形成濾餅,導(dǎo)致過(guò)濾困難。即使采取加

9、熱、冷卻、添加助濾劑等措施,使部分蛋白質(zhì)凝聚,但效果并不理想。,污染雜菌的種類(lèi)對(duì)過(guò)濾的影響程度有差異,如污染霉菌時(shí),影響較小,而污染細(xì)菌時(shí)很難過(guò)濾。由于過(guò)濾困難,過(guò)濾時(shí)間拉長(zhǎng),影響發(fā)酵液儲(chǔ)罐和過(guò)濾設(shè)備的周轉(zhuǎn)使用,破壞了生產(chǎn)平衡。染菌發(fā)酵液還會(huì)因過(guò)濾困難而大幅度降低過(guò)濾收率,直接影響提煉總收率。,發(fā)酵染菌及其防治,2、發(fā)酵染菌對(duì)提煉的影響,染菌發(fā)酵液中含有比正常發(fā)酵液更多的水溶性蛋白和其它雜質(zhì)。采用有機(jī)溶劑萃取的提煉工藝,則極易發(fā)生乳化

10、,很難使水相和溶劑相分離,影響進(jìn)一步提純。采用直接用離子交換樹(shù)脂的提取工藝,如鏈霉素、慶大霉素,染菌后大量雜菌黏附在離子交換樹(shù)脂表面,或被離子交換樹(shù)脂吸附,大大降低離子交換樹(shù)脂的交換容量,而且有的雜菌很難用水沖洗干凈,洗脫時(shí)與產(chǎn)物一起進(jìn)入洗脫液,影響進(jìn)一步提純。,發(fā)酵染菌及其防治,二、染菌的原因,(一)發(fā)酵染菌率計(jì)算基準(zhǔn)總?cè)揪手敢荒臧l(fā)酵染菌的批(次)數(shù)與總投料批(次)數(shù)之比的百分率。染菌批次數(shù)應(yīng)包括染菌后培養(yǎng)基經(jīng)重新滅菌,又再次染

11、菌的批次數(shù)在內(nèi)。這是習(xí)慣的計(jì)算方法,也是我國(guó)的統(tǒng)一計(jì)算方法???cè)揪?=,,發(fā)酵染菌及其防治,(二)染菌原因 造成染菌的因素很多,但總結(jié)幾十年的經(jīng)驗(yàn),對(duì)絕大部分罐批染菌的原因是比較清楚的,但在實(shí)際生產(chǎn)中發(fā)酵染菌率仍比較高,可以說(shuō)產(chǎn)生這種現(xiàn)象大多數(shù)是由于工作中“明知故犯”“不負(fù)責(zé)任”和“僥幸心理”所造成的。例如,滅菌的蒸汽壓不足不能滅菌;設(shè)備有滲漏不能進(jìn)罐等等都是眾所周知的,但因?yàn)橛袃e幸心理還是照樣滅菌,進(jìn)罐,結(jié)果以污染雜菌而

12、告終?,F(xiàn)將我們收集到的國(guó)內(nèi)外幾家抗生素工廠發(fā)酵染菌原因列于下:,發(fā)酵染菌及其防治,日本工業(yè)技術(shù)院發(fā)酵研究所多年來(lái)抗生素發(fā)酵染菌原因分析 項(xiàng)目 百分率%種子帶菌或懷疑種子帶菌 9.64接種時(shí)罐壓跌零 0.19培養(yǎng)基滅菌不透

13、 0.79總空氣系統(tǒng)有菌 19.96泡沫冒頂 0.48夾套穿孔 12.36盤(pán)管穿孔 5.89

14、接種管穿孔 0.39閥門(mén)滲漏 1.45攪拌軸密封滲漏 2.09罐蓋漏 1.54其它設(shè)備滲漏

15、 10.13操作原因 10.15 原因不明 24.94,發(fā)酵染菌及其防治,上海第三制藥廠染菌原因分析 項(xiàng)目 百分率%種子帶菌

16、 14.15盤(pán)管穿孔 14.20閥門(mén)滲漏 23.30空氣系統(tǒng)有菌 10.0管理不善 25.80其它 7.49原因不明

17、 5.78,發(fā)酵染菌及其防治,管理不善而染菌的有31個(gè)罐批,占25.08%經(jīng)分析有下表所列原因: 項(xiàng)目 百分率%進(jìn)罐前未做設(shè)備嚴(yán)密度檢查 25.8接種違反操作規(guī)程 25.8檢修質(zhì)量缺乏驗(yàn)收制度 19.35操作

18、不熟練 19.35配料違反工藝規(guī)程 6.45調(diào)度不當(dāng) 3.25,發(fā)酵染菌及其防治,第四制藥廠鏈霉素發(fā)酵染菌原因分析 項(xiàng)目 百分率%外界帶入雜

19、菌(取樣、補(bǔ)料) 8.20設(shè)備穿孔 7.60空氣系統(tǒng)有菌 26.00停電罐壓跌零 1.60接種

20、11.00蒸汽壓力不足或蒸汽量不足 0.60管理問(wèn)題 7.80 操作違反規(guī)程 1.60種子帶菌 0.60原因不明

21、 35.00,發(fā)酵染菌及其防治,造成染菌的主要原因總結(jié),1、設(shè)備滲漏,設(shè)備滲漏包括夾套穿孔、盤(pán)管穿孔、接種管穿孔、閥門(mén)滲漏、攪拌軸滲漏、罐蓋漏和其它設(shè)備漏等。從日本工業(yè)技術(shù)院發(fā)酵研究所對(duì)染菌原因分析發(fā)現(xiàn),這類(lèi)染菌占33.85%,上海三廠的分析這類(lèi)染菌為37.5%。所以說(shuō)加強(qiáng)設(shè)備本身及附屬零部件的嚴(yán)密度檢查,對(duì)制服染菌是極其主要的,也是重要的。,發(fā)酵染菌及其防治,2、空氣帶菌,從日本工業(yè)技術(shù)院和上海第四制藥

22、廠分析空氣帶菌而造成的染菌分別為19.96%和 26%。國(guó)內(nèi)外空氣除菌技術(shù)雖已有較大改善,但仍然沒(méi)有使染菌率降低到理想的程度。因?yàn)榭諝獬到y(tǒng)較為復(fù)雜,環(huán)節(jié)多,偶遇不慎便會(huì)導(dǎo)致空氣除菌失敗。,,,發(fā)酵染菌及其防治,3、種子帶菌,種子帶菌又分為種子本身帶菌和種子培養(yǎng)過(guò)程中染菌。加強(qiáng)種子管理,嚴(yán)格無(wú)菌操作,種子本身帶菌是可以克服的。種子培養(yǎng)過(guò)程染菌與發(fā)酵一樣有許多因素造成。,發(fā)酵染菌及其防治,4、滅菌不徹底,滅菌技術(shù)的好壞與滅菌質(zhì)量很有關(guān)系

23、蒸汽通入培養(yǎng)基,升溫快慢、保溫時(shí)間——產(chǎn)生過(guò)多泡沫蒸汽總壓是否達(dá)到要求標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境中的雜菌數(shù)量因季節(jié)而有很大差別。如上海第四制藥廠在卡那霉素生產(chǎn)中,于炎熱的夏季將連續(xù)滅菌預(yù)熱至800C的培養(yǎng)基采樣培養(yǎng),可發(fā)現(xiàn)無(wú)法計(jì)數(shù)的大量的芽孢桿菌;而在冬季取樣的培養(yǎng)中,則僅發(fā)現(xiàn)2~3個(gè)芽孢桿菌。故染菌率因季節(jié)不同而發(fā)生明顯變化。,發(fā)酵染菌及其防治,原材料儲(chǔ)存和保管,如液胨、玉米漿、母液糖等有機(jī)原料——雜菌的數(shù)量發(fā)酵罐、培養(yǎng)基配制罐等設(shè)備的清洗質(zhì)量

24、——有無(wú)滅菌的死角對(duì)減少或避免染菌仍然是十分必要的。,發(fā)酵染菌及其防治,5、技術(shù)管理不善,技術(shù)管理就是要對(duì)發(fā)酵每個(gè)環(huán)節(jié)嚴(yán)格控制,發(fā)酵中稍有不慎就可能染菌,所以不能有僥幸心理而放松管理,發(fā)酵染菌及其防治,三、無(wú)菌狀況的檢測(cè),1、環(huán)境無(wú)菌的檢查塵埃粒子檢測(cè)無(wú)菌平板檢測(cè),發(fā)酵染菌及其防治,2、種子及發(fā)酵液無(wú)菌狀況檢測(cè),酚紅肉湯培養(yǎng)基檢測(cè)平板劃線(xiàn)顯微鏡觀察,發(fā)酵染菌及其防治,四、染菌情況分析,染菌的原因有多種,對(duì)于實(shí)際情況如何分析呢

25、?,1、單罐染菌不是系統(tǒng)問(wèn)題,而是該罐本身的問(wèn)題。如種子帶菌、培養(yǎng)基滅菌不徹底、罐有滲漏、分過(guò)濾器失效,2、多罐染菌系統(tǒng)問(wèn)題,如空氣過(guò)濾系統(tǒng)有問(wèn)題,特別是總過(guò)濾器長(zhǎng)期沒(méi)有檢查,可能受潮失效;移種或補(bǔ)料的分配站有滲漏或滅菌不徹底,發(fā)酵染菌及其防治,3、前期染菌種子帶菌、培養(yǎng)基滅菌不徹底,4、中后期染菌補(bǔ)料的料液滅菌不徹底或補(bǔ)料管道、閥門(mén)滲漏,一般不會(huì)是種子問(wèn)題,5、污染雜菌種類(lèi),發(fā)酵染菌及其防治,五、染菌的防止,1、防止種子帶菌,

26、制備種子時(shí)對(duì)沙土管及搖瓶嚴(yán)格加以控制。沙土制備時(shí)要多次間歇滅菌注意接種時(shí)的無(wú)菌操作子瓶、母瓶的移種和培養(yǎng)無(wú)菌室和搖床間都要保持清潔。無(wú)菌室內(nèi)要供給恒溫恒濕的無(wú)菌空氣,還要裝紫外燈用以滅菌,或用化學(xué)藥品滅菌。,發(fā)酵染菌及其防治,無(wú)菌室要求,在無(wú)菌室中裝有紫外燈,打開(kāi)紫外燈,照半小時(shí),關(guān)燈后15分鐘再接種。用消毒藥水如新潔而滅配成1/1000濃度擦桌子、拖地,開(kāi)啟超凈臺(tái)的通風(fēng),接種時(shí)必須在超凈臺(tái)上操作,超凈臺(tái)裝有一臺(tái)鼓風(fēng)機(jī),進(jìn)風(fēng)

27、口有一粗過(guò)濾器,出風(fēng)口有高效過(guò)濾器,保證無(wú)菌風(fēng)從超凈臺(tái)吹出,外界有菌空氣不可能進(jìn)入接種區(qū)域,保證無(wú)菌條件。接種人員必須穿好無(wú)菌服,戴好口罩,手用酒精棉球擦干凈。,發(fā)酵染菌及其防治,2、防止設(shè)備滲漏及“死角”,發(fā)酵設(shè)備及附件由于化學(xué)腐蝕、電化學(xué)腐蝕,物料與設(shè)備摩擦造成機(jī)械磨損以及加工制作不良等原因會(huì)導(dǎo)致設(shè)備及附件滲漏。設(shè)備上一旦滲漏,就會(huì)造成染菌,例如冷卻盤(pán)管、夾套穿孔滲漏,有菌的冷卻水便會(huì)通過(guò)漏孔而進(jìn)入發(fā)酵罐中招致染菌。閥門(mén)滲漏也會(huì)

28、使帶菌的空氣或水進(jìn)入發(fā)酵罐而造成染菌。設(shè)備上的漏隙如果肉眼能看見(jiàn),容易發(fā)現(xiàn),也容易治理;但有的微小泄漏,肉眼看不見(jiàn),必須通過(guò)一定的試漏方法才能發(fā)現(xiàn) 。,發(fā)酵染菌及其防治,試漏方法可采用水壓試漏法。即被測(cè)設(shè)備的出口處裝上壓力表,將水壓入設(shè)備,待設(shè)備中壓力上升到要求壓力,關(guān)閉進(jìn)出水,看壓力有否下降。壓力下降則有滲漏。但有些滲漏很小,看不出何處漏水,可以用稀堿溶液壓入設(shè)備,然后用蘸有酚酞的紗布揩,只要酚酞能變紅處即為滲漏處。 閥門(mén)滲

29、漏可以用集氣桶來(lái)試漏。方法是先在集氣桶中裝滿(mǎn)水,然后關(guān)閉所有閥門(mén),向發(fā)酵罐中通入空氣,使罐壓上升到要求壓力,一般一公斤以上。由于集氣桶連通各管道,觀察哪根管子冒泡,即這根管子的閥門(mén)漏氣。,發(fā)酵染菌及其防治,,“死角”是指由于操作、設(shè)備結(jié)構(gòu)或人為因素造成的屏障等原因,使蒸汽不能倒到預(yù)定的滅菌部位或該部位的冷空氣不易在加熱過(guò)程中排凈,從而不能達(dá)到徹底滅菌要求的部位。 發(fā)酵罐的死角 管道安裝不

30、當(dāng)或配置不合理形成的死角,發(fā)酵染菌及其防治,3、防止培養(yǎng)基滅菌不徹底,培養(yǎng)基滅菌前含有大量雜菌,滅菌時(shí)如果蒸汽壓力不足,就達(dá)不到要求的溫度;滅菌時(shí)產(chǎn)生大量泡沫或發(fā)酵罐中有污垢堆積,就會(huì)窩藏大量雜菌,造成滅菌不徹底。培養(yǎng)基和水的傳熱系數(shù)比空氣的傳熱系數(shù)大,如果滅菌時(shí)升溫太快,培養(yǎng)基急劇膨脹,發(fā)酵罐內(nèi)的空氣排出較慢,就會(huì)產(chǎn)生大量泡沫,泡沫上升到發(fā)酵罐頂,泡沫中的耐熱菌就不能與蒸汽直接接觸,未被殺死。,防止方法: 緩慢開(kāi)啟蒸汽閥門(mén),或加

31、入少量消泡劑。滅菌時(shí)還會(huì)因設(shè)備安裝或污垢堆積造成一些“死角”。,發(fā)酵染菌及其防治,4、防止空氣引起的染菌,空氣過(guò)濾除菌設(shè)備流程,空壓機(jī),儲(chǔ)罐,二級(jí)冷卻,加熱器,空氣過(guò)濾,粗過(guò)濾,發(fā)酵染菌及其防治,空氣冷卻器的列管穿孔泄露,冷卻水會(huì)滲入到空氣中,造成染菌。棉花-活性炭過(guò)濾器長(zhǎng)期使用后,棉花和活性炭的體積被壓縮而松動(dòng),如果上下端棉花鋪得厚薄不均,厚的一邊阻力大空氣不暢通,薄的一邊空氣容易通過(guò),久而久之,薄的一邊長(zhǎng)期受空氣頂吹而使棉花活性

32、炭改變位置,造成過(guò)濾器失效。過(guò)濾器用蒸汽滅菌時(shí),若被蒸汽冷凝水潤(rùn)濕就會(huì)降低或喪失過(guò)濾效能,滅菌完畢應(yīng)立即緩慢通入壓縮空氣,將水分吹干。,發(fā)酵染菌及其防治,超細(xì)纖維紙作過(guò)濾介質(zhì),滅菌時(shí)必須將管道中冷凝水放干凈,以免介質(zhì)受潮失效。在生產(chǎn)實(shí)踐中,空氣管道大多與其它物料管道相接,要裝上止逆閥防止其它物料竄入空氣管道污染過(guò)濾器,導(dǎo)致過(guò)濾介質(zhì)失效。,發(fā)酵染菌及其防治,,5、防止操作不當(dāng)染菌,6、防止噬菌體污染,發(fā)酵過(guò)程中如果受噬菌體的侵染,一般

33、發(fā)生溶菌,隨之出現(xiàn)發(fā)酵遲緩或停止,而且受噬菌體感染后,往往會(huì)反復(fù)連續(xù)感染,使生產(chǎn)無(wú)法進(jìn)行,甚至使種子全部喪失。,發(fā)酵染菌及其防治,染噬菌體表現(xiàn)為:1、鏡檢可發(fā)現(xiàn)菌體數(shù)量明顯減少,菌體不規(guī)則,嚴(yán)重時(shí)完全看不到菌體,且是在短時(shí)間內(nèi)菌體自溶。2、發(fā)酵pH值逐漸上升,4~8小時(shí)之內(nèi)可達(dá)8.0以上,不再下降。3、發(fā)酵液殘?zhí)歉?,有刺激臭味,粘度大,泡沫多?、生產(chǎn)量甚少或增長(zhǎng)緩慢或停止有無(wú)染噬菌體,根本的要做噬菌斑檢驗(yàn),發(fā)酵染菌及其防治,

34、(一)產(chǎn)生噬菌體的原因,通常在工廠投產(chǎn)初期并不感到噬菌體的危害,經(jīng)過(guò)1~2年以后,主要是由于生產(chǎn)和試驗(yàn)過(guò)程中不斷不加注意地把許多活菌體排放到環(huán)境中去,自然界中的噬菌體就在活菌體中大量生長(zhǎng),造成了自然界中噬菌體增殖的好機(jī)會(huì)。這些噬菌體隨著風(fēng)沙塵土和空氣流動(dòng)傳播,以及人們的走動(dòng)、車(chē)輛的往來(lái)也攜帶著噬菌體到處傳播,使噬菌體有可能潛入生產(chǎn)的各個(gè)環(huán)節(jié),尤其是通過(guò)空氣系統(tǒng)進(jìn)入種子室、種子罐、發(fā)酵罐,發(fā)酵染菌及其防治,(二)染噬菌體的檢測(cè)在培養(yǎng)皿上

35、倒入培養(yǎng)生產(chǎn)菌的培養(yǎng)基(加瓊脂)作下層。同樣的培養(yǎng)基中加入20%~30%培養(yǎng)好的種子液,再加入懷疑染噬菌體的發(fā)酵液,搖均勻后,鋪上層。培養(yǎng)過(guò)夜觀察培養(yǎng)皿上是否出現(xiàn)噬菌斑。也可以在上層培養(yǎng)基中不加懷疑染噬菌體的發(fā)酵液,而將發(fā)酵液直接點(diǎn)種在上層培養(yǎng)基表面,培養(yǎng)過(guò)夜,觀察有無(wú)透明圈出現(xiàn)。,發(fā)酵染菌及其防治,(三)噬菌體的防治,1、必須建立工廠環(huán)境清潔衛(wèi)生制度,定期檢查、定期清掃,車(chē)間四周有嚴(yán)重污染噬菌體的地方應(yīng)及時(shí)撒石灰或漂白粉。

36、2、車(chē)間地面和通往車(chē)間的道路盡量采取水泥地面 3、種子和發(fā)酵工段的操作人員要嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作規(guī)程,認(rèn)真地進(jìn)行種子保管,不使用本身帶有噬菌體的菌種。感染噬菌體的培養(yǎng)物不得帶入菌種室、搖瓶間,發(fā)酵染菌及其防治,4、認(rèn)真進(jìn)行發(fā)酵罐、補(bǔ)料系統(tǒng)的滅菌。嚴(yán)格控制逃液和取樣分析和洗罐所廢棄的菌體。對(duì)倒罐所排放的廢液應(yīng)滅菌后才可排放。 5、選育抗噬菌體的菌種,或輪換使用菌種。 6、發(fā)現(xiàn)噬菌體停攪拌、小通風(fēng),將發(fā)酵液加熱到70~8

37、00C殺死噬菌體,才可排放。發(fā)酵罐周?chē)墓艿酪脖仨殢氐诇缇?發(fā)酵染菌及其防治,六、發(fā)酵染菌后的措施,染菌后的培養(yǎng)基必須滅菌后才可放下水道。滅菌方法:可通蒸汽滅菌,也可加入過(guò)氧乙酸等化學(xué)滅菌劑攪拌半小時(shí),才放下水道。否則由于各罐的管道相通,會(huì)造成其它罐的染菌,而且直接放下水道也會(huì)造成空氣的污染而導(dǎo)致其它罐批染菌。凡染菌的罐要找染菌的原因,對(duì)癥下藥,該罐也要徹底清洗,進(jìn)行空罐消毒,才可進(jìn)罐。染菌厲害時(shí),車(chē)間環(huán)境要用石灰消毒,空氣用甲醛

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