茶藨子葉狀層菌的深層發(fā)酵及其菌絲質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、目的:對(duì)茶藨子葉狀層菌的液體深層發(fā)酵工藝及其發(fā)酵菌絲的質(zhì)量控制進(jìn)行了系統(tǒng)研究,為茶藨子葉狀層菌液體發(fā)酵的工業(yè)化生產(chǎn)和后續(xù)開發(fā)利用及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供實(shí)驗(yàn)資料和科學(xué)依據(jù)。
　　方法:1.采用組織分離方法獲得茶藨子葉狀層菌的純菌株,通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)確定該菌的最佳培養(yǎng)基組成和深層發(fā)酵培養(yǎng)的最適條件,通過(guò)發(fā)酵罐生產(chǎn)實(shí)驗(yàn)確定了工業(yè)生產(chǎn)的發(fā)酵周期和生產(chǎn)出了供以后實(shí)驗(yàn)研究用菌絲。
　　2.在藥材質(zhì)量控制方面,對(duì)菌絲和粉末進(jìn)行了顯微鑒別,對(duì)菌

2、絲進(jìn)行了理化和薄層色譜鑒別;依據(jù)《中國(guó)藥典》(2010版)關(guān)于中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的有關(guān)規(guī)定,對(duì)茶藨子葉狀層菌菌絲的水分、總灰分和酸不溶性灰分進(jìn)行檢查,測(cè)定了水溶性和醇溶性浸出物的含量;用氨基酸分析儀測(cè)定氨基酸的含量,RP-HPLC測(cè)定菌絲中游離麥角甾醇的含量,硫酸-苯酚法測(cè)定菌絲多糖的含量。
　　結(jié)果:1.分離獲得了茶藨子葉狀層菌的純菌株,確定了搖瓶發(fā)酵最佳培養(yǎng)基組成為:麩皮4％,蛋白胨0.2%,葡萄糖2.5%,磷酸二氫鉀0.05%,

3、硫酸鎂0.025%;搖瓶發(fā)酵最適發(fā)酵條件為:溫度29℃,裝液量80ml-250ml三角瓶,搖瓶轉(zhuǎn)速150rpm,初始pH自然,培養(yǎng)7d;5噸發(fā)酵罐發(fā)酵條件:裝量3000L,接種量10%,溫度29±1℃,攪拌轉(zhuǎn)速160rpm,通氣量80m3/h,初始pH6.0～6.5,培養(yǎng)4d。
　　2.根據(jù)質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)結(jié)果,初步制定了茶藨子葉狀層菌菌絲的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案,其中水分含量不得過(guò)12.0%,總灰分含量不得過(guò)6.0%,酸不溶性灰分含量不得過(guò)0