雞樅菌絲體及其皂甙的深層發(fā)酵條件的優(yōu)化.pdf

1、雞樅菌[Termitomyces albuminosus(Berkeley&Broome)Heim]是與白蟻共生的真菌，主要分布于非洲熱帶、亞洲熱帶、南太平洋島嶼和亞洲的亞熱帶地區(qū)。雞樅菌肉質(zhì)細(xì)嫩，氣味濃香，味道鮮美，營(yíng)養(yǎng)豐富?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明，雞樅菌有增強(qiáng)人體免疫功能、預(yù)防腸癌、治療食欲不振，痔瘡等功效，因此很有必要對(duì)其雞樅發(fā)酵產(chǎn)品做詳細(xì)的研究。經(jīng)過植物化學(xué)分析表明，在此真菌中主要有多糖，皂甙，腦苷，香豆素，和麥角甾醇等物質(zhì)。

2、　　 皂甙是雞樅中的主要活性成分，是極具潛力的天然產(chǎn)物資源之一，受到人們廣泛的關(guān)注。皂甙是一類具有特殊生理功能的活性物質(zhì)，具有降血脂、抗菌、抗病毒、抗氧化、抗自由基、抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，免疫調(diào)節(jié)等作用。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)酵過程中雞樅皂甙的變化規(guī)律，并建立了簡(jiǎn)便快速的測(cè)定方法，為雞樅的進(jìn)一步開發(fā)和綜合利用提供理論依據(jù)和科學(xué)參考。工作的主要內(nèi)容包括：
　　 (1)對(duì)實(shí)驗(yàn)室保存的雞樅菌株(JNPF-TA01)，通過18S rDNA序列分析，

3、并結(jié)合ITS rDNA序列分析確定了其在分類學(xué)上的地位。該菌株與Termitomyces sp.的18S rDNA序列相似性最高，達(dá)到99％。ITS rDNA序列分析結(jié)果表明雞樅菌(JNPF-TA01)與Termitomyces sp.ZA164的ITS rDNA序列相似性達(dá)到96％，說明雞樅菌株(JNPF-TA01)是Termitomyces屬的一個(gè)種。
　　 (2)采用分光光度法測(cè)定雞樅發(fā)酵菌絲體中皂甙含量。以人參皂甙Rg1

4、為對(duì)照品，在吸收波長(zhǎng)為550 nm下，標(biāo)準(zhǔn)濃度在10-240μg范圍內(nèi)，濃度與吸光度呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為：Y=0.0030X-0.0405，R2=0.9984。精密度變異系數(shù)(RSD)為1.89％，雞樅菌絲體皂甙類含量為2.69 mg/g菌絲體。本方法操作簡(jiǎn)單快速，靈敏度高且比較準(zhǔn)確，可用于測(cè)定雞樅發(fā)酵菌絲體皂甙的含量。
　　 (3)在搖瓶的水平上，分別考察了發(fā)酵培養(yǎng)基不同組分對(duì)雞樅生長(zhǎng)的影響和胞內(nèi)皂甙產(chǎn)量的影響。通過對(duì)

5、發(fā)酵培養(yǎng)基碳氮源進(jìn)行選擇及對(duì)各主要因素進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)，得到優(yōu)化后的培養(yǎng)基組成為(g/L)：蔗糖30，酵母粉3，磷酸二氫鉀2，硫酸鎂1.5；通過對(duì)培養(yǎng)條件的考察，發(fā)現(xiàn)優(yōu)化后接種量為10％，轉(zhuǎn)速為150 r/min，裝液量為120 mL，溫度為28℃，pH為4時(shí)，生物量由最初的12.1 g/L提高到15.4 g/L，胞內(nèi)皂甙產(chǎn)量由最初的28.4 mg/L提高到59.5 mg/L。與優(yōu)化前的培養(yǎng)基相比，生物量和產(chǎn)物產(chǎn)量均有較大提高，生物量是優(yōu)