鼎湖鱗傘液態(tài)發(fā)酵和菌絲體多糖的提取、純化及生物活性的研究.pdf

1、鼎湖鱗傘(Pholiota dinghuensis Bi)是一種大型真菌。該種為中國(guó)特有種。鱗傘屬的真菌具有很多藥用價(jià)值和保健功能。
　　 目前對(duì)鼎湖鱗傘的研究報(bào)道較少，本論文從鼎湖鱗傘培養(yǎng)基的配方、發(fā)酵條件、菌絲體多糖的提取、分離和純化以及多糖的生物活性這些方面進(jìn)行了研究，主要內(nèi)容如下:
　　 1鼎湖鱗傘多糖培養(yǎng)基的篩選和發(fā)酵條件的優(yōu)化
　　 首先配制馬鈴薯葡萄糖瓊脂斜面培養(yǎng)基(PDA培養(yǎng)基)，接著制備液體種子

2、培養(yǎng)基，然后再對(duì)發(fā)酵培養(yǎng)基中的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽進(jìn)行單因素試驗(yàn)，應(yīng)用三因素三水平正交的試驗(yàn)方法，得出最佳的發(fā)酵培養(yǎng)基配方:碳源為葡萄糖40 g/L;氮源為蛋白胨和酵母膏的復(fù)合物，兩者的配比為1∶1，各為4g/L;無(wú)機(jī)鹽為硫酸鎂和磷酸二氫鉀，兩者分別為1.5 g/L和1g/L。pH值自然。發(fā)酵溫度為28℃，培養(yǎng)時(shí)間為7d，轉(zhuǎn)速為150 r/min。
　　 通過(guò)篩選出的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基配方，接著對(duì)鼎湖鱗傘的液態(tài)發(fā)酵條件，即不同的發(fā)酵溫

3、度、發(fā)酵時(shí)間、接種量和攪拌轉(zhuǎn)速來(lái)進(jìn)行研究，結(jié)果表明:在溫度為28℃下培養(yǎng)8d，接種量為15％，攪拌轉(zhuǎn)速為150 r/min，通氣量為0.75 vvm，在此條件下發(fā)酵所得的菌絲體生物量的最大值為10.98 g/L。
　　 2鼎湖鱗傘菌絲體多糖的提取、分離和純化
　　 運(yùn)用熱水浸提和超聲波輔助提取的方法，對(duì)影響鼎湖鱗傘菌絲體多糖含量的提取條件（如:浸提溫度、浸提時(shí)間、液料比及超聲波提取時(shí)間）進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)分析，采用四因素三水

4、平L9(34)正交實(shí)驗(yàn)方法，得出鼎湖鱗傘菌絲體粗多糖最優(yōu)化的提取條件為:浸提溫度90℃、浸提時(shí)間5h、液料比為20 ml/g超聲波提取時(shí)間為50 min。提取鼎湖鱗傘菌絲體多糖的最大量為27.87 mg/g。
　　 運(yùn)用DEAE-纖維素-52陰離子交換柱和葡聚糖G-100凝膠色譜柱對(duì)PDP粗多糖進(jìn)行初步分離和進(jìn)一步純化，得到三個(gè)組分分別是PDP-1、PDP-2和PDP-3。三個(gè)組分PDP-1、PDP-2和PDP-3得率分別是60

5、.23％、23.68％和4.63％。
　　 3鼎湖鱗傘多糖的抗氧化和免疫調(diào)節(jié)活性的研究
　　 運(yùn)用化學(xué)方法分別測(cè)量分析了鼎湖鱗傘多糖純品的三個(gè)組分PDP-1、PDP-2和PDP-3的體外抗氧化活性。結(jié)果表明:多糖純品PDP-1、PDP-2和PDP-3在體外能夠清除過(guò)氧化氫(H2O2)、清除DPPH·自由基、鰲合亞鐵離子(Fe2+)和清除羥基自由基，具有一定的體外抗氧化活性。
　　 運(yùn)用動(dòng)物小鼠模型實(shí)驗(yàn)研究分析了鼎