蜂糧人工發(fā)酵新工藝的探索及其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定.pdf

1、蜂糧是供幼蜂和工蜂取食的由花粉、花蜜為原料，并由多種微生物共同發(fā)酵而成的混合物，對(duì)人體有很好的保健作用，其中含有的保健因子是當(dāng)前很多慢性疾病的克星。同時(shí)隨著生活水平和文化水平的改善，保健品愈來(lái)愈越成為人們生活不可或缺的部分，但是由于天然蜂糧量少且獲取困難，難以滿足人們的需要，故兼具天然蜂糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和新型的活性物質(zhì)的人工發(fā)酵蜂糧就具有廣闊的市場(chǎng)前景。
　　本論文首先探索了蜂糧新型的生產(chǎn)工藝，并通過(guò)比較納豆激酶的測(cè)定方法確立了適用于本

2、研究的高效、直觀的酶活測(cè)定方法；其次，對(duì)蜂糧制品進(jìn)行安全毒理評(píng)估；最后通過(guò)對(duì)蜂糧制品營(yíng)養(yǎng)學(xué)評(píng)價(jià)、功效成分評(píng)價(jià)、感官評(píng)價(jià)和衛(wèi)生指標(biāo)評(píng)價(jià)結(jié)果，草擬了納豆激酶型人工蜂糧的企業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為該產(chǎn)品的質(zhì)量提供了可參考資料。本論文開(kāi)展的研究工作如下：
　?、俪醪教骄棵富钚詸z測(cè)方法，根據(jù)該酶的溶纖特性和水解酶的性質(zhì)進(jìn)行選擇的兩種方法，即“纖維蛋白平板法”和“TAME法”，并分別得出了它們的標(biāo)準(zhǔn)曲線和酶活性的計(jì)算式子。結(jié)果表明，以蜂花粉為發(fā)酵基質(zhì)的

3、蜂糧相較于普通的納豆激酶制品有其特殊性，用以吸光度為指標(biāo)的測(cè)定方法誤差很大，而平板法更直觀更適用。故本實(shí)驗(yàn)擬選擇纖維蛋白平板法。
　?、谝约{豆激酶（NK）活性為評(píng)判目標(biāo)，通過(guò)單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面試驗(yàn)對(duì)蜂糧人工發(fā)酵工藝進(jìn)行探索性改良，結(jié)果為：接種量6.6％、含水量35%、培養(yǎng)溫度33℃、培養(yǎng)周期9天(216小時(shí))。按照這個(gè)條件生產(chǎn)的蜂糧，其NK活力達(dá)到了4006.45IU/g。蜂糧顏色純正，酸甜可口，且總糖和可溶性蛋白含量較天然蜂糧更

4、高，Asp、Glu和Leu等氨基酸含量也較高。重金屬含量和農(nóng)藥殘留分析測(cè)定結(jié)果發(fā)現(xiàn)均低于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，表明以云陽(yáng)縣的蜂花粉作為人工發(fā)酵蜂糧的原材料是可行的。
　?、鄯浼Z的毒理學(xué)安全評(píng)估，評(píng)估項(xiàng)目包括急性毒性和28d灌喂試驗(yàn)。
　　急性毒性試驗(yàn)中小鼠無(wú)異常無(wú)死亡；各試驗(yàn)組小鼠的半致死劑量都比10.00g/kg?BW大，是安全無(wú)毒級(jí)別的；最大耐受試驗(yàn)，按劑量的119倍劑量給小鼠灌胃，沒(méi)有明顯的死亡。
　　28天喂養(yǎng)大鼠試驗(yàn)中，

5、按人體推薦劑量的10、50、100倍設(shè)置了相應(yīng)的低、中、高組，并設(shè)置了對(duì)照組。全部實(shí)驗(yàn)大鼠在過(guò)程中均沒(méi)有異樣反應(yīng)，沒(méi)有死亡；對(duì)大鼠重量，攝入食物量和食物利用率，血液生化指標(biāo)沒(méi)有顯著改變；解剖大鼠大體察看其胃腸、睪丸及卵巢，也沒(méi)有察覺(jué)到顯著影響。
　　這兩個(gè)階段的毒理試驗(yàn)表明，蜂糧是一種安全性很高的食品，可作為納入保健食品的初步證據(jù)。
　　④根據(jù)對(duì)成熟蜂糧幾個(gè)指標(biāo)的測(cè)定，對(duì)納豆激酶型人工蜂糧產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了初步研究，并草擬