生藥質(zhì)量標準制定與控制

1、第十四章 生藥質(zhì)量標準的制定與控制,第一節(jié) 影響生藥品質(zhì)的自然因素,影響生藥品質(zhì)的自然因素有：生藥的品種植物的生長發(fā)育植物的遺傳與變異植物的環(huán)境因素等,一、生藥品種對品質(zhì)的影響,品種的確認鑒定應為質(zhì)量控制系統(tǒng)的首要環(huán)節(jié)。我國現(xiàn)有已知中藥資源種類12807種：藥用植物11146種；藥用動物1581種；藥用礦物80種。,,《中華人民共和國藥典》(2000年版一部)收載的中藥材534種，其中有143種中藥為多基源；其中二基

2、源的有92種，三基源的38種，四基源的有8種，五基源的有4種，六基源的有1種；同科不同屬有21種，不同科者有4種。,,藥用動、植物涉及生物分類的科、屬分別為395科862屬與383科2309屬。實際上中藥的品種要比《中國藥典》所揭示的復雜的多。除存在多基源的情況外，同名異物現(xiàn)象十分普遍，嚴重影響了生藥的品質(zhì)。,二、植物成長發(fā)育對生藥品質(zhì)的影響,藥用植物在不同的生長階段，其活性成分也會發(fā)生一些變化，因而對生藥的質(zhì)量也會產(chǎn)生一些影響。

3、 例如：茵陳過去是春季采收幼苗，有“正月茵陳二月蒿，三月茵陳當柴燒”的說法，說明采收期的重要性。,,經(jīng)研究表明，茵陳的主要利膽活性成分蒿屬香豆精、對羥基苯乙酮和茵陳香豆酸A和B以秋季的花前期和至花果期含量最高。 《中國藥典》因此規(guī)定有兩個采收期，春季和秋季?！熬d茵陳”及“茵陳蒿”,三、植物的遺傳與變異因素對生藥品質(zhì)的影響,植物會產(chǎn)生種內(nèi)次生代謝產(chǎn)物的多型性，又稱化學變種或化學型。 研究藥用植物種內(nèi)化學成分的變異具有重要的實踐意義。

4、變異原因，普遍認為是環(huán)境因素的作用，如環(huán)境溫度的驟變，天然雷電射線及土壤中微量元素引起的突變。,四、環(huán)境因素對生藥品質(zhì)的影響,光照對藥用植物活性成分積累的影響環(huán)境溫度對藥用植物活性成分積累的影響 降水量對藥用植物活性成分積累的影響 土壤條件對藥用植物活性成分積累的影響等。,第二節(jié) 生藥質(zhì)量的控制與生藥質(zhì)量標準的制訂,藥品的質(zhì)量標準是一個國家或地區(qū)對藥品的質(zhì)量和檢驗方法所作的技術(shù)規(guī)定；是藥品生產(chǎn)、供應、使用以及管理部門共同遵循

5、的法律依據(jù)；,,對保障人民用藥安全有效起著重要作用，它是藥品現(xiàn)代化生產(chǎn)和質(zhì)量管理的重要組成部分。,一、生藥質(zhì)量控制的依據(jù),（一）國家藥典 藥典：國家對藥品質(zhì)量標準及檢驗方法所作的技術(shù)規(guī)定，是藥品生產(chǎn)、供應、使用、檢驗、管理部門共同遵循的法定依據(jù)?！吨腥A人民共和國藥典》(中國藥典)是我們國家控制藥品質(zhì)量的標準，收載使用較廣、療效較好的藥品。,,《中國藥典》自1953年版起 ～ 2000年版止，目前共出版7次。 第一部《中國藥典》19

6、53年版由衛(wèi)生部編印發(fā)行。收載藥品531種，其中化學藥215種，植物藥與油脂類65種，動物藥13種，抗生素2種，生物制品25種，各類制劑211種。,,《中國藥典》1963年版　1965年由衛(wèi)生部公布施行。1963年版藥典共收載藥品1310種，分一、二兩部，各有凡例和有關的附錄。一部收載中醫(yī)常用的中藥材446種和中藥成方制劑197種；二部收載化學藥品667種。,,《中國藥典》1977年版　1977年版藥典共收載藥品1925種。一

7、部收載中草藥材(包括民族藥)、中草藥提取物、植物油脂以及一些單味藥材制劑等882種，成方制劑(包括少數(shù)民族藥)270種，共1152種；二部收載化學藥品等773種。,,《中國藥典》1985年版　1986年4月l日起執(zhí)行。該版藥典共收載藥品1489種。一部收載中藥材、植物油脂及單味制劑506種，中藥成方207種，共713種；二部收載化學藥品、生物制品等776種。,,《中國藥典》1990年版　1991年7月1日起執(zhí)行。共收載品種17

8、51種。一部收載784種，其中中藥材、植物油脂等509種，中藥成方及單味制劑275種；二部收載化學藥品、生物制品等967種。,,《中國藥典》1995年版　1996年4月1日起執(zhí)行。共收載品種2375種。一部收載920種，其中中藥材、植物油脂等522種，中藥成方及單味制劑398種。二部收載1455種，包括化學藥、抗生素、生化藥、生物制品及輔料等。,,《中國藥典》2000年版由原國家藥品監(jiān)督管理局批準頒布，2000年7月1日起正式

9、執(zhí)行。共收載藥品2691種，其中一部收載992種，二部收載1699種。一、二兩部共新增品種399種，修訂品種562種。,,本版藥典的附錄作了較大幅度的改進和提高，現(xiàn)代分析技術(shù)在本版藥典中得到進一步擴充。 2000年版藥典一部每種藥材項下內(nèi)容為：中文名、漢語拼音、拉丁名、來源、性狀、鑒別、檢查、含量測定、炮制、性味與歸經(jīng)、功能與主治、用法與用量、貯藏等。,,（二）局(部)頒標準 國家食品藥品監(jiān)督管理局(SFDA)頒發(fā)的藥品標準，簡

10、稱局頒標準。除《中國藥典》收載的品種外，其余的品種，凡來源清楚，療效確切，本著“一名一物”原則，分期分批，由藥典委員會編寫、收入局頒標準。,,1998年以前，藥典委員會隸屬衛(wèi)生部，當時該標準由衛(wèi)生部批準頒發(fā)執(zhí)行，稱為部頒標準。目前共頒布10冊，《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準》中藥材(第一冊)收載了101種，于1991年12月10日頒布執(zhí)行。,,（三）地方標準各省、直轄市、自治區(qū)衛(wèi)生廳(局)審批的藥品標準簡稱地方標準。此標準系收載

11、中國藥典及局(部)頒標準中未收載的本地區(qū)經(jīng)營、使用的藥品，或雖有收載但規(guī)格有所不同的本地區(qū)生產(chǎn)的藥品，它具有本地區(qū)性的約束力。,,現(xiàn)行的《中華人民共和國藥品管理法》取消了中成藥的地方標準，規(guī)定：“藥品必須符合國家藥品標準”。由于中藥材、中藥飲片品種較多，各地方用藥習慣、炮制方法不統(tǒng)一，全部納入規(guī)范化、標準化管理有較大困難，故中藥材的地方標準目前仍然存在。,二、生藥質(zhì)量控制的主要內(nèi)容及方法,生藥質(zhì)量控制的主要內(nèi)容包括：檢查生藥中可能混

12、入的雜質(zhì)；與藥品質(zhì)量有關的項目。根據(jù)基源，生藥可分為植物類生藥動物類生藥礦物類生藥,,植物類生藥檢查：根據(jù)生藥的具體情況確定對質(zhì)量有影響的檢查項目：如雜質(zhì)、水分、總灰分、酸不溶性灰分、膨脹度、水中不溶物、重金屬、砷鹽、吸收度、色度、農(nóng)藥殘留量等。,,動物類生藥檢查：動物類生藥含較多水分，易霉壞變質(zhì)，故多規(guī)定水分檢查；動物類藥物在生產(chǎn)或貯存過程中，會產(chǎn)生一些帶有腐敗氣的堿性物質(zhì)，影響質(zhì)量與療效，可以規(guī)定揮發(fā)性堿性(揮發(fā)性

13、鹽基氮)物質(zhì)的限量檢查，及常規(guī)項目的檢查。,,礦物類生藥檢查：礦物類生藥廣泛分布于自然界，有的雖然進行精細加工，仍易夾有雜質(zhì)及有害物質(zhì)，必須加以檢查并規(guī)定限度；如檢查重金屬、砷鹽、鎂鹽、鐵鹽、鋅鹽、干燥失重等項目。,,限量檢查是指常規(guī)檢查項目，多數(shù)生藥均可使用，即共性內(nèi)容。如：水分的限量、有害物質(zhì)的限量、雜質(zhì)的限量等。定量檢查是指與生藥臨床療效直接相關的項目，即個性內(nèi)容。如：有效成分的含量，生物活性的強度等。,(一)生藥質(zhì)量的限量

14、控制,1．水分含量測定一般對容易吸濕發(fā)霉變質(zhì)、酸敗的生藥應規(guī)定水分檢查。常用的測定方法：烘干法甲苯法減壓干燥法,,2．灰分含量測定生藥的灰分測定分為總灰分測定及酸不溶性灰分測定?？偦曳郑褐干幈旧斫?jīng)過灰化后遺留的不揮發(fā)性的無機成分以及生藥表面附著的不揮發(fā)性無機成分總和。,,酸不溶灰分：指總灰分中加10％鹽酸處理，得到不溶于10％鹽酸的灰分。,,規(guī)定生藥的總灰分限度，對于保證生藥的品質(zhì)和純凈程度，有一定的意義。常用的測定方

15、法總灰分測定法酸不溶灰分測定法,,3、浸出物的測定：某些生藥有效成分尚不明確，無法進行含量測定，可測定其浸出物量。選擇溶劑，可結(jié)合用藥習慣、生藥質(zhì)地等，選擇適宜的溶劑，或采用鑒別中提取成分的溶劑。,,常用的測定方法水溶性浸出物的測定冷浸法熱浸法醇溶性浸出物的測定 醚溶性浸出物的測定,,4．揮發(fā)油測定適用于含揮發(fā)油的生藥。測定用的供試品，一般須粉碎使通過二號至三號篩，并混合均勻，在特制的揮發(fā)油測定器中進行測定。,,常

16、用的測定方法甲法：適用于測定相對密度在1.0以下的揮發(fā)油。乙法：適用于測定相對密度在1．0以上的揮發(fā)油。,,5．有害物質(zhì)的控制 指農(nóng)藥殘留過量和重金屬含量超標。生藥中有害物質(zhì)的來源主要有：生境的污染(土壤、地質(zhì)背景等)；栽培和倉儲過程中施用農(nóng)藥或驅(qū)蟲劑；加工炮制過程中輔料的污染；包裝材料的有害物質(zhì)污染。,,(１）農(nóng)藥殘留量測定農(nóng)藥的使用對于中藥材的穩(wěn)產(chǎn)、高產(chǎn)有著重大的意義，但也帶來了生藥的農(nóng)藥殘留問題；長期以來，我國

17、使用的農(nóng)藥主要為有機氯、有機磷類，雖然在1983年已禁止使用，但因其有累積性，在許多藥材中仍可檢出。,,中國藥典2000年版選用氣相色譜法測定有機氯類農(nóng)藥殘留量。生藥含有機氯農(nóng)藥殘留量：六六六(總BHC)不得過百萬分之零點二；滴滴涕(總DDT)不得過百萬分之零點二；五氧硝基苯(PCNB)不得過百萬分之零點一。,,（２）重金屬重金屬系指在實驗條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質(zhì)，包括鉛、汞、鎘等。檢查時以鉛為代表，采

18、用目視法觀察比較。,,（３）砷鹽檢查 砷鹽的檢查用古蔡氏法二乙基硫代氨基甲酸銀法砷鹽限度一般不得過百萬分之十。,,（４）其他有害物質(zhì)的檢查 有的生藥由于寄生于有毒植物而產(chǎn)生有害物質(zhì)，亦須加以檢查。例如桑寄生需作強心苷檢查，是因為寄生于夾竹桃樹上的桑寄生會吸入夾竹桃樹中的強心苷，而具毒性。,,許多生藥在貯藏過程中易霉變而產(chǎn)生黃曲霉素，其中有：牛膝、天冬、玉竹、黃精、當歸、甘草、百部、白術(shù)、天花粉、葛根、山藥、知母、麥冬等

19、。,,現(xiàn)代科學研究結(jié)果證實有14種霉菌素有致癌作用，而黃曲霉素致癌作用強度位居前列。有必要對生藥中的黃曲霉素進行限量控制，以確保用藥的安全。,,6．其他檢查項目 雜質(zhì)生藥中混雜的雜質(zhì)：系指物種與規(guī)定相符，但其性狀或部位與規(guī)定不符的藥材；來源與規(guī)定不同的物質(zhì)；無機雜質(zhì)如砂石，泥塊、塵土等。,,檢查方法可取規(guī)定量試品，攤開，用肉眼或擴大鏡觀察，將雜質(zhì)揀出，或通過適當?shù)暮Y選，將雜質(zhì)分出。然后將各類雜質(zhì)分別稱重，計算其在供試品中的

20、百分數(shù)。藥用部分比例：為保證藥品質(zhì)量，有的生藥需規(guī)定藥用部分的比例。,,酸敗度酸?。菏侵赣椭蚝椭姆N子類生藥，在貯藏過程中，與空氣、光線接觸，發(fā)生復雜的化學變化，產(chǎn)生特異的刺激嗅味(哈喇味)。本檢查系通過酸值、羰基值或過氧化值的測定，以控制含油脂種子類的酸敗程度。,（二）生藥質(zhì)量的定量控制,意義：選擇具生理活性的主要化學成分，作為有效成分或指標性成分；建立含量測定項目，評價藥物的內(nèi)在質(zhì)量，并衡量其商品質(zhì)量是否達到要求及產(chǎn)品

21、是否穩(wěn)定。,,1．以化學成分為對象 生藥中化學成分眾多，依據(jù)生物活性，可分為：活性成分非活性成分有效成分(active　constituent),,以化學成分作為質(zhì)量控制指標時，應該首選有效成分，進行針對性定量；有效成分尚不清楚，可對總成分如總黃酮、總生物堿、總皂苷進行測定；有效成分不清楚，質(zhì)量控制指標應選用“指標成分”。,,2、化學成分的定量分析 (1)含量測定方法選擇經(jīng)典分析方法(容量法、重量法)分光光度法(包括

22、比色法)氣相色譜法高效液相色譜法薄層-分光光度法、薄層掃描法其它理化檢測方法及生物測定法。,,(2)含量測定方法考察一般考察項目如下1)提取條件的選定；2)分離、純化；3)測定條件的選擇；4)線性關系的考察；,,5)測定方法的穩(wěn)定性試驗；6)精密度試驗；7)重復性試驗；8)回收率試驗；9)樣品測定，至少測3批樣品。,,(3)含量限(幅)度的制定 可根據(jù)傳統(tǒng)鑒別經(jīng)驗。將生藥樣品依質(zhì)量優(yōu)劣順序排列，如所測成分含量

23、高低與之相應，則把含量較低但仍可藥用者取為下限。也可根據(jù)樣品檢測實際情況規(guī)定，做為暫行限度，至少測得10批樣品數(shù)據(jù)。,,生藥含量限度可規(guī)定幅度，如部頒標準中進口西洋參，人參總皂苷為5.0～10.0％。毒劇藥必須規(guī)定幅度，如《中國藥典》2000版1部規(guī)定馬錢子中含士的寧為1．20％～2．20％；含量測定也可用限度表示，如《中國藥典》2000版一部規(guī)定黃連中含生物堿以鹽酸小檗堿計不得少于7．0％。,,3．生物檢定 又稱生物測定法，

24、是利用生物(整體或離體)的反應來測定各種藥物的效價、作用強度和毒性的一種方法。 通常用標準品和檢品對照的方法來確定檢品的效價單位。,(三)生藥化學成分的指紋圖譜,應用現(xiàn)代色譜、波譜分析手段建立生藥化學成分指紋圖譜(fingerprint)是實現(xiàn)質(zhì)量控制的有效方法。 生藥化學成分指紋圖譜 指生藥經(jīng)適當處理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標示該生藥特性的共有化學成分峰的圖譜。,,指紋圖譜須具有：系統(tǒng)性：是指指紋圖譜反映的化學成分應

25、包括有效組分群中的主要成分，或指標成分的全部。 特征性：是指指紋圖譜中反映的化學成分信息是具有高度選擇性的，將能特征地區(qū)分中藥的真?zhèn)闻c優(yōu)劣。,,重現(xiàn)性：指在規(guī)定的方法與條件下，不同的操作者和不同的實驗室所建立的指紋圖譜的誤差，在允許的范圍之內(nèi)。,,指紋圖譜有關項目的技術(shù)要求如下： 1．名稱、漢語拼音：按中藥命名原則制定。 2．來源：包括原植物的科名、中文名、拉丁學名、藥用部位、產(chǎn)地、采收季節(jié)、產(chǎn)地加工、炮制方法等。,,3．供試品的

26、制備：應根據(jù)生藥中所含化學成分的理化性質(zhì)和檢測方法的需要，選擇適宜的方法進行制備。 4．參照物的制備：應說明參照物的選擇和試驗樣品制備的依據(jù)。,,5．檢測方法：根據(jù)供試品的特點和所含化學成分的理化性質(zhì)選擇相應的檢測方法。 穩(wěn)定性試驗：考察供試品穩(wěn)定性。精密度試驗：考察儀器的精密度。 重現(xiàn)性試驗：考察方法的重現(xiàn)性。,,6．指紋圖譜及技術(shù)參數(shù)：(1)指紋圖譜：根據(jù)供試品的檢測結(jié)果，建立指紋圖譜。 (2)共有指紋峰的標定：采用色譜

27、方法制定指紋圖譜，必須根據(jù)參照物的保留時間，計算指紋峰的相對保留時間。,,(3)共有指紋峰面積的比值：以對照品作為參照物的指紋圖譜。 以參照物峰面積作為1，計算各共有指紋峰面積與參照物峰面積的比值；以內(nèi)標物作為參照物的指紋圖譜，則以共有指紋峰中其中一個峰的峰面積作為1，計算其它各共有指紋峰面積的比值。,,(4)非共有峰面積：計算10批次以上供試品圖譜中非共有峰總面積及占總峰面積的百分比，列出各批供試品的檢測數(shù)據(jù)。,,生藥指紋圖譜檢

28、測標準書寫格式 生藥的名稱、來源；供試品的制備；對照品溶液或內(nèi)標物溶液的制備；測定方法(包括儀器、試劑、測定條件和測定方法）；指紋圖譜及各項技術(shù)參數(shù)；起草說明。,三、生藥質(zhì)量標準的制定,生藥質(zhì)量標準的制定建立在細致的考察及試驗基礎上；各項試驗數(shù)據(jù)必須準確可靠；保證生藥質(zhì)量的可控性和重現(xiàn)性。,,生藥質(zhì)量標準質(zhì)量標準草案：包括名稱、漢語拼音、藥材拉丁名、來源、性狀、鑒別、檢查、浸出物、含量測定、炮制、性味與歸經(jīng)、功能

29、與主治、用法與用量、注意及貯藏等。,,起草說明：說明制訂質(zhì)量標準中各個項目的理由，規(guī)定各項目指標的依據(jù)、技術(shù)條件和注意事項等，既要有理論解釋，又要有實踐工作的總結(jié)及試驗數(shù)據(jù)。,,質(zhì)量標準有關項目的技術(shù)要求如下：1．名稱、漢語拼音、藥材拉丁名，按中藥命名原則要求制定。2．來源 來源包括原植(動、礦)物的科名、中文名、拉丁學名、藥用部位、采收季節(jié)和產(chǎn)地加工等，礦物藥包括礦物的類、族、礦石名或巖石名、主要成分及產(chǎn)地加工。,,3.性狀

30、系指藥材的外形、顏色、表面特征、質(zhì)地、斷面及氣味等的描述，描述要抓住主要特征，文字簡單，術(shù)語規(guī)范，描述確切。4.鑒別 方法要求專屬、靈敏。包括經(jīng)驗鑒別、顯微鑒別、理化鑒別、色譜或光譜鑒別及其它方法的鑒別。,,5.檢查 包括雜質(zhì)、水分、灰分、酸不溶性灰分、重金屬、砷鹽、農(nóng)藥殘留量、有關的毒性成分它必要的檢查項目。起草說明提供：各檢查項目的理由及其試驗數(shù)據(jù)。,,6．浸出物測定 可參照《中國藥典》附錄浸出物測定要求，選定適宜的溶劑

31、，測定其浸出物量以控制質(zhì)量。 浸出物量的限(幅)度指標應根據(jù)實測數(shù)據(jù)制訂，以藥材的干品計算。,,7．含量測定 應建立有效成分含量測定項目，操作步驟敘述應準確，術(shù)語應規(guī)范。含量限(幅)度指標應根據(jù)實測數(shù)據(jù)制訂。起草說明中提供：根據(jù)樣品的特點和有關化學成分的性質(zhì)，選擇相應的測定方法。,,應闡明含量測定方法的原理；確定該測定方法的方法學考察資料和相關圖譜(包括測定方法的線性關系、精密度、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性試驗及回收率試驗等)；闡明確定該

32、含量限(幅)度的意義及依據(jù)(10批樣品20個數(shù)據(jù))。,,8．炮制 根據(jù)用藥需要進行炮制的品種，應制訂合理的加工炮制工藝，明確輔料用量和炮制品的質(zhì)量要求。9．性味與歸經(jīng)、功能與主治等項，根據(jù)該藥材研究結(jié)果制訂。10.有關質(zhì)量標準的書寫格式，參照現(xiàn)行版《中國藥典》。,第三節(jié) 中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(GAP),為保證中藥材及天然藥物原料的優(yōu)質(zhì)安全、無公害并具有可控性，必須對中藥材的產(chǎn)前、產(chǎn)中、產(chǎn)后實現(xiàn)全程標準化、規(guī)范化管理；實施藥材生