絞股藍(lán)總皂苷及其微生物轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的制備與生物活性研究.pdf

1、絞股藍(lán)[Gynostemma pentaphyllum(Thunb) Makino]為葫蘆科多年生落葉草質(zhì)宿根藤本植物，是目前已知的除五加科植物人參屬以外，唯一含有人參皂苷類成分的植物。大量研究表明，絞股藍(lán)皂苷在抗氧化、抗炎、抗癌、改善免疫力等方面都表現(xiàn)出較高活性，因此絞股藍(lán)一直都是研究開發(fā)中備受關(guān)注的藥用植物。
　　本論文是從絞股藍(lán)中提取絞股藍(lán)總皂苷，通過微生物轉(zhuǎn)化，切除絞股藍(lán)皂苷側(cè)鏈的糖苷，從而獲得經(jīng)過微生物代謝后的次級絞股藍(lán)

2、皂苷。并比較研究轉(zhuǎn)化前后絞股藍(lán)總皂苷的生物學(xué)效應(yīng)。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下:
　　比較水浴加熱提取與超聲提取兩種方法對絞股藍(lán)總皂苷提取效率的影響，結(jié)果表明超聲法提取率高于水浴加熱提取率。結(jié)合上述實驗結(jié)果，正交實驗優(yōu)化超聲法的最佳提取條件為90％乙醇，料液比為1∶20，提取時間為50min。
　　通過靜態(tài)吸附和動態(tài)洗脫研究比較了大孔吸附樹脂D101、HP-20、DM130及AB-8對絞股藍(lán)總皂苷的富集純化效果。結(jié)果表明DM130

3、大孔吸附樹脂對絞股藍(lán)總皂苷的富集純化效果最佳。以乙醇作為洗脫劑，對于動態(tài)洗脫方法最佳的乙醇體積分?jǐn)?shù)為70％。
　　以硅膠和聚酰胺為層析柱的填料，薄層層析跟蹤檢測，對轉(zhuǎn)化前絞股藍(lán)總皂苷進(jìn)行柱層析分離，獲得50.4mg皂苷化合物GYP-C1，分子量為1093.6和18.4mg的皂苷化合物GYP-C2，分子量961.5。并通過NMR鑒定出這兩種化合物的結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)GYP-C1可能是尚未發(fā)現(xiàn)的皂苷化合物。GYP-C2為2-羥基-3-O-β-

4、D-吡喃葡萄糖(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖-20(S)-原人參二醇-20-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。
　　以灰綠曲霉和青霉菌分別轉(zhuǎn)化福建南靖絞股藍(lán)總皂苷，HPLC檢測比較轉(zhuǎn)化前后的絞股藍(lán)總皂苷成分的變化，結(jié)果表明經(jīng)兩種菌株分別轉(zhuǎn)化后，在總皂苷中分別產(chǎn)生了不同于轉(zhuǎn)化前的皂苷成分。
　　通過本實驗室建立的酪氨酸酶活性測定方法測定轉(zhuǎn)化前后的總皂苷對酪氨酸酶的抑制活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化前的絞股藍(lán)總皂苷對酪氨酸酶具有抑制作用，使酶活力下