乳及乳品中唾液酸含量的檢測(cè).pdf

1、本試驗(yàn)共分二個(gè)系列，系列I建立了一種快速、簡便、準(zhǔn)確、高效的測(cè)定牛奶中唾液酸(SialicAcid)含量的方法；系列n研究了不同時(shí)期牛奶中(初乳、常乳、末乳)的唾液酸動(dòng)態(tài)變化模式及奶粉中唾液酸的含量測(cè)定。 系列I牛奶中唾液酸含量測(cè)定的方法建立建立了一種準(zhǔn)確、簡便、快速的測(cè)定牛奶中唾液酸含量的高效液相色譜法。以Symmetry Cu柱(4.6mm×250mm，5μ m)為固定相，柱溫；35℃，以1.096四氫呋喃水溶液(含0.2％

2、磷酸)一乙腈(92:8)為流動(dòng)相，在波長230hm處檢測(cè)唾液酸的含量。分別從以下幾個(gè)影響因素來優(yōu)化反應(yīng)條件：從掃描波長、作用時(shí)間、溫度等探討最佳反應(yīng)條件。在10mL的牛奶中加入15mL的三氯乙酸可以使牛奶中的蛋白質(zhì)沉淀完全，經(jīng)離心后在上清液與沉淀中分別加入40mL和35mL，的0.Imol/L的硫酸在80℃條件下反應(yīng)120min可以使牛奶中與蛋白質(zhì)結(jié)合的、與低聚糖結(jié)合的唾液酸完全釋放，然后調(diào)節(jié)pH值到5，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，定容至10mL，過濾，

3、取濾液1mL，再加入10mg/mL鄰苯二氨鹽酸鹽溶液(用0.2mol幾硫酸氫鈉溶液溶解)1mL，在80℃條件下，作用時(shí)間50min衍生基本反應(yīng)完全。結(jié)果是線性范圍為20～500μ g/mL，線性回歸方程式為Y=63754X-277658，相關(guān)系數(shù)x=0.9993，批內(nèi)變異系數(shù)為1.49％，批間變異系數(shù)1.98％。在樣品中加入低、中、高三種不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，所有樣品的低加標(biāo)量標(biāo)準(zhǔn)品的平均回收率在93.98％以上；中加標(biāo)量標(biāo)準(zhǔn)品的平均回

4、收率均在96.33％以上；高加標(biāo)量標(biāo)準(zhǔn)品的平均回收率均在100.97％以上。結(jié)果表明本法簡便、快速、無需梯度洗脫、分離效果好，適用于牛奶及乳品中唾液酸含量的檢測(cè)和研究。系列Ⅱ不同時(shí)期牛奶中唾液酸的動(dòng)態(tài)變化模式及奶粉中唾液酸含量的測(cè)定采取不同時(shí)期的牛奶(初乳、常乳、末乳)，分別檢測(cè)其含量，初乳中唾液酸的總量參考值為760.83±13.42 μg/mL；常乳中唾液酸總量111.43±2.06 μg/mL；末乳中的唾液酸總量79.36±2.4