泰樂菌素高產(chǎn)菌株的選育及其培養(yǎng)條件的優(yōu)化.pdf

1、泰樂菌素是由弗氏鏈霉菌 （Streptomyces fradiae） 產(chǎn)生的一類十六元大環(huán)內(nèi)酯禽畜專用抗生素，被國內(nèi)外廣泛用作獸藥和飼料添加劑，是國家規(guī)劃重點(diǎn)發(fā)展的獸藥產(chǎn)品。 本文通過對泰樂菌素產(chǎn)生菌弗氏鏈霉菌 BMB-012 進(jìn)行復(fù)壯，獲得了一株發(fā)酵效價相對較高的菌株 A-49。以菌株 A-49 為出發(fā)菌株，依次用紫外線氯化鋰復(fù)合誘變、硫酸二乙酯誘變、鏈霉素抗性誘變等多種誘變手段對菌株 A-49 進(jìn)行育種工作。篩選得到一株遺傳

2、性狀穩(wěn)定的高產(chǎn)菌株 S-22，其搖瓶發(fā)酵效價較出發(fā)菌株提高了68％。 對高產(chǎn)菌株 S-22 進(jìn)行了發(fā)酵條件進(jìn)行了初步優(yōu)化。通過研究不同種子培養(yǎng)條件對菌體生長和發(fā)酵的影響，確定了種子的最佳培養(yǎng)條件。對發(fā)酵培養(yǎng)基配方進(jìn)行了單因子實(shí)驗(yàn)，研究了發(fā)酵培養(yǎng)基中的碳源、氮源、無機(jī)鹽等對泰樂菌素發(fā)酵的影響。對發(fā)酵培養(yǎng)基主要組成成分進(jìn)行了正交實(shí)驗(yàn)，得到了培養(yǎng)基配方 SH1，從而將泰樂菌素的發(fā)酵效價提高到了10886ug／ml。 為了進(jìn)一步

3、提高泰樂菌素的發(fā)酵效價，采用 BP 神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)結(jié)合遺傳算法的方法對發(fā)酵培養(yǎng)基中的菜油、魚粉D、甜菜堿鹽酸鹽、組份X這四種組份進(jìn)行優(yōu)化。首先運(yùn)用 BP 神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)建立有效的發(fā)酵效價預(yù)測模型，然后在此基礎(chǔ)上采用遺傳算法對上述四種培養(yǎng)基組份進(jìn)行全局尋優(yōu)，得到其最佳配比：菜油36g／L、魚粉D 18.5g/L、甜菜堿鹽酸鹽1.8g／L、組份X 8.8g／L，泰樂菌素發(fā)酵效價達(dá)到12878ug/ml，與模型預(yù)測值的誤差為2.08％。采用上述方法優(yōu)化后

4、的培養(yǎng)基使泰樂菌素的發(fā)酵效價比采用正交優(yōu)化的培養(yǎng)基 SH１ 提高了18.3％。結(jié)果表明，運(yùn)用 BP 神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)結(jié)合遺傳算法優(yōu)化泰樂菌素發(fā)酵培養(yǎng)基的方法是行之有效的。 采用單因素實(shí)驗(yàn)的方法對接種量、初始培養(yǎng)基 pH、裝液量、發(fā)酵溫度等發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化，確定了較適的發(fā)酵條件為：滅菌前培養(yǎng)基 pH 調(diào)至7.2，種子液的接種量為12％，發(fā)酵搖瓶的裝液量為40ml／500ml三角瓶，28℃培養(yǎng)7d。在此優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件下進(jìn)行搖瓶發(fā)