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文檔簡介
1、本文通過響應面法對實驗室保藏產(chǎn)脂肪酶細菌BurkholderiacepaciaGX-35的發(fā)酵產(chǎn)酶培養(yǎng)基進行優(yōu)化以提高脂肪酶活力,結(jié)果得到預測酶活的回歸方程:Y=16.0232-0.0457X1+0.0232X2+0.01423X3-0.0754X12-0.1337X22-0.0625X32+0.0275X1X2-0.0625X1X2-0.1025X2X3。最佳產(chǎn)酶的發(fā)酵培養(yǎng)基組成為(%,w/v):糊精1.0、牛肉膏1.2、花生油1.5
2、、吐溫-600.017、K2HPO40.1、pH6.9,水解酶活為15.98U/mL。
對GX-35所產(chǎn)脂肪酶的固定化條件進行了初步探索,獲得了較好的結(jié)果。比較了水相吸附法、載體涂布法和有機溶劑沉淀法的固定化效果,結(jié)果發(fā)現(xiàn),載體涂布法效果較理想。在對固定化載體進行選擇時,比較了硅膠、硅藻土、氧化鋁和陽離子交換樹酯的固定化效果,發(fā)現(xiàn)硅膠作為固定化載體較理想。最后,確定了以硅膠為載體通過載體涂布法固定化脂肪酶的最優(yōu)條件為:0.
3、025mol/L、pH7.5磷酸緩沖液、固定化時間1.5h、固定化溫度30℃、酶液與硅膠質(zhì)量比為5:1。
離子液體極性可調(diào),因此,可以設計出極性不同的離子液體,以提高合成生物柴油的底物-花生油和乙醇在反應體系中的溶解度,從而提高轉(zhuǎn)酯反應的效率。為此,初步比較了固定化脂肪酶在四種離子液體中催化轉(zhuǎn)酯反應的效果,并探討了固定化脂肪酶在離子液體中催化轉(zhuǎn)酯反應的條件。結(jié)果表明,在[EMIM]Br加入量為花生油質(zhì)量的60%、加水量為5
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