姜黃素衍生物B06對(duì)2型糖尿病大鼠睪酮合成的影響.pdf

1、目的:觀察姜黃素衍生物B06對(duì)高脂飲食及2型糖尿病大鼠睪酮合成的影響，探討高脂飲食及糖尿病造成睪酮合成受限的機(jī)理及B06對(duì)睪丸Leydig細(xì)胞類固醇激素代謝關(guān)鍵酶的影響。
　　方法:雄性SD大鼠50只，隨機(jī)分為:正常對(duì)照組（C組）7只，高脂實(shí)驗(yàn)組16只和糖尿病實(shí)驗(yàn)組27只。后兩組喂以高脂飼料4周后，糖尿病實(shí)驗(yàn)組禁食12小時(shí)后按30mg/Kg的劑量腹腔注射鏈脲佐菌素，復(fù)制2型糖尿病大鼠模型，其中有13只大鼠因造模失敗從實(shí)驗(yàn)中去除，高

2、脂實(shí)驗(yàn)組因2只大鼠飼養(yǎng)過程中死亡去除。成模后，將糖尿病實(shí)驗(yàn)組分為糖尿病組（D組）和糖尿病治療組（DT組），每組7只，高脂實(shí)驗(yàn)組分為高脂組（H組）和高脂治療組(HT組)，每組7只。HT組和DT組按0.2mg/kg.d的劑量灌胃姜黃素衍生物B06，C組、H組和D組灌胃等量的1％羧甲基纖維素鈉，每天一次，持續(xù)8周。治療結(jié)束后，禁食12小時(shí)處死大鼠，觀測各組大鼠體重、睪丸重量;檢測血糖、血胰島素、血清睪酮及雌二醇水平;光鏡、電鏡下觀察睪丸形態(tài)學(xué)

3、變化;免疫組化檢測Leydig細(xì)胞StAR蛋白;RT-PCR檢測睪丸Leydig細(xì)胞StAR、P450scc、P450c17、P450arom、3β-HSD及17β-HSD的mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　1.大鼠體重及睪丸重量的檢測:
　　與C組相比，H組大鼠體重增加(P＜0.01)，D組大鼠體重減輕(P＜0.01)，D組睪丸重量減輕(P＜0.05)。經(jīng)姜黃素衍生物B06治療后，HT組和DT組的大鼠體重及睪丸重量

4、與對(duì)照組無明顯差別。
　　2.大鼠睪丸形態(tài)學(xué)結(jié)果:
　　鏡下觀:與C組相比，光鏡下H組睪丸曲細(xì)精管變形，生精細(xì)胞脫落，排列紊亂，Leydig細(xì)胞未見明顯變化;電鏡下Leydig細(xì)胞胞漿內(nèi)線粒體腫脹，嵴模糊，核膜增厚，染色質(zhì)稀疏。光鏡下D組睪丸曲細(xì)精管嚴(yán)重萎縮、變形，生精細(xì)胞明顯減少、空泡變性，甚至生精細(xì)胞脫落阻塞管腔，Leydig細(xì)胞縮小，胞核皺縮、淡染;電鏡下Leydig細(xì)胞體積縮小，胞漿內(nèi)線粒體明顯腫脹，嵴模糊，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)減

5、少伴明顯擴(kuò)張，核固縮，核膜周隙變大，染色質(zhì)嚴(yán)重變稀疏、邊集。經(jīng)B06治療后，光鏡下HT組睪丸生精細(xì)胞排列清晰、有序，Leydig細(xì)胞均勻分布;電鏡下Leydig細(xì)胞胞漿內(nèi)線粒體較豐富，少見嵴模糊，染色質(zhì)分布均勻。光鏡下DT組睪丸生精細(xì)胞增多，排列規(guī)則，層次增多，但仍有部分生精細(xì)胞排列紊亂，空泡變性，Leydig細(xì)胞均勻分布;電鏡下Leydig細(xì)胞胞漿內(nèi)線粒體豐富，可見部分腫脹及嵴模糊，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)見輕度擴(kuò)張，染色質(zhì)分布相對(duì)均勻。
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6、.大鼠血糖、血胰島素檢測結(jié)果:
　　與C組相比，H組和D組血糖、胰島素抵抗指數(shù)升高(P＜0.01)，H組血胰島素水平也升高(P＜0.05)。經(jīng)B06治療后，HT組血糖、胰島素及胰島素抵抗指數(shù)較H組下降(P＜0.01)，DT組血糖、胰島素及胰島素抵抗指數(shù)較D組下降(P＜0.01)。
　　4.大鼠血清睪酮、雌二醇水平檢測結(jié)果:
　　與C組相比，H組和D組的血清睪酮含量下降(P＜0.01)，D組的血清雌二醇含量升高(P＜0.

7、01)。經(jīng)B06治療后，HT組血清睪酮、雌二醇含量與H組比較無明顯差異，DT組血清睪酮較D組升高(P＜0.01)，血清雌二醇下降(P＜0.01)。
　　5.免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果:
　　StAR蛋白在Leydig細(xì)胞均為胞漿表達(dá)陽性。與C組相比，D組的StAR表達(dá)明顯減弱，經(jīng)B06治療后，DT組StAR表達(dá)增加，H組和HT組未見明顯差異。
　　6.大鼠睪丸Leydig細(xì)胞StAR、P450scc、P450c17、P450

8、arom、3β-HSD及17β-HSD的基因表達(dá)水平:
　　與C組相比，H組大鼠睪丸Leydig細(xì)胞StAR基因表達(dá)顯著降低(P＜0.01)，P450scc及17β-HSD基因表達(dá)明顯降低(P＜0.05);D組Leydig細(xì)胞StAR、P450scc、3β-HSD及17β-HSD基因表達(dá)顯著降低(P＜0.01)。經(jīng)B06治療后，HT組Leydig細(xì)胞StAR基因表達(dá)較H組顯著升高(P＜0.01); DT組Leydig細(xì)胞StAR、

9、P450scc基因表達(dá)較D組顯著升高(P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　1.高脂飲食和2型糖尿病可引起大鼠血清睪酮降低，睪丸形態(tài)學(xué)的一系列病理改變。
　　2.高脂飲食和2型糖尿病可導(dǎo)致大鼠睪丸Leydig細(xì)胞StAR、P450scc、3β-HSD及17β-HSD基因表達(dá)降低，這可能與高脂及糖尿病機(jī)體代謝紊亂相關(guān)，并導(dǎo)致睪酮合成受限。
　　3.姜黃素衍生物B06可明顯緩解高脂及2型糖尿病大鼠睪丸病理病變，提高血清睪