穿膜肽修飾的PLGA納米粒用于提高阿霉素抗腫瘤活性及逆轉(zhuǎn)多藥耐藥的研究.pdf

1、目的:制備穿膜肽介導的輸送抗癌藥物阿霉素的納米給藥系統(tǒng)，探索其在逆轉(zhuǎn)腫瘤的多藥耐藥、及抑制耐藥腫瘤生長方面的作用。制備低分子量魚精蛋白(LMWP)修飾的PLGA納米粒，負載一線抗癌藥物阿霉素;并在體內(nèi)外評價這種納米載體在治療腫瘤多藥耐藥方面的作用。
　　方法:研究了LMWP應用于藥物載體的優(yōu)勢，合成了烷基化的LMWP多肽，通過疏水作用力采用納米沉淀法制備LMWP修飾的PLGA納米粒(LMWP/PLGA NP)，負載阿霉素(LMWP

2、/PLGA/Dox NP)。采用激光散射粒度儀對納米粒的粒徑及電位進行分析;用透射電子顯微鏡(TEM)觀察納米粒形態(tài)及分布;用透析法測定納米粒的體外釋藥行為;使用熒光顯微鏡及流式細胞分析儀考察各實驗組阿霉素的入胞能力;使用激光共聚焦顯微鏡分析各實驗組阿霉素的入核能力;采用MTT法考察各實驗組對敏感腫瘤細胞及耐藥腫瘤細胞的增殖抑制效果;采用nu/nu裸鼠耐藥乳腺癌模型考察LMWP/PLGA/Dox對多藥耐藥腫瘤的抑制效果及全身毒性。

3、>　　結果:通過單因素法優(yōu)化制備了粒徑為200nm左右的LMWP/PLGA/Dox NP。納米粒Zeta電位為27mV左右，TEM顯示納米粒呈球狀，均勻分布。納米粒體外吸附蛋白(BSA)量較少，在血清中較穩(wěn)定，48h未發(fā)現(xiàn)顆粒粒徑變化。溶血實驗證明了納米粒較好的生物相容性，可供注射使用。細胞實驗顯示，LMWP修飾能夠顯著增強納米粒進入細胞的能力，尤其體現(xiàn)在耐藥細胞上;LMWP/PLGA/Dox NP也表現(xiàn)出了較好的核靶向功能。MTT實驗

4、證明了LMWP/PLGA/Dox NP顯著的對于腫瘤細胞（尤其是耐藥腫瘤細胞）的增殖抑制效果。動物實驗結果顯示，LMWP修飾能夠增強PLGA納米粒穿透腫瘤的能力，顯示出對多藥耐藥腫瘤較好的抑制效果;小鼠體重變化及病理切片結果證明，LMWP/PLGA/Dox NP無毒。
　　結論:本研究構建的LMWP修飾的負載阿霉素的PLGA納米給藥系統(tǒng)在體內(nèi)外實驗中均表現(xiàn)出較好的逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥的效果，顯示出較好的抑制腫瘤生長的能力。為腫瘤多藥耐