以IL-7R為靶點治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎作用機制探討.pdf

1、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種器官特異性的自身免疫病，病變主要累及全身大小關(guān)節(jié)，表現(xiàn)為關(guān)節(jié)腔滑膜炎癥、滲液、細(xì)胞增殖、肉芽腫形成，軟骨及骨破壞，最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)強直，生活自理能力喪失。免疫反應(yīng)是RA發(fā)病和病情遷延的中心環(huán)節(jié)，感染、內(nèi)分泌、遺傳和環(huán)境等因素增加了疾病的易感性。
　　本文初步探討了阻斷IL-7/IL-7R信號通路治療RA的免疫學(xué)調(diào)節(jié)機制。通過測序研究中國漢族RA人群IL-7Rα基因r

2、s6897932位點單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP），闡明IL-7R基因多態(tài)性與RA的相關(guān)性；通過ELISA檢測RA患者外周血中IL-7、IFN-γ、IL-17、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-21、IL-23和MMP-13等細(xì)胞因子含量，分析IL-7與其他細(xì)胞因子的相關(guān)性；應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)研究IL-7Rα在健康對照者和RA患者T細(xì)胞亞群中的分布情況，以及IL-7對naive

3、CD4+T細(xì)胞的增殖、分化所產(chǎn)生的影響。體內(nèi)實驗采用Ⅱ型膠原蛋白免疫DBA/1J小鼠建立CIA模型，小鼠發(fā)病后分別給予IL-7Rα抗體及其同型對照抗體治療，通過比較治療組和對照組小鼠脾臟細(xì)胞培養(yǎng)上清中IFN-γ、IL-17、TNF-α等細(xì)胞因子含量及不同T細(xì)胞亞群的表達格局，明確IL-7R抗體治療CIA的作用機制。
　　研究結(jié)果顯示：在中國漢族RA人群中，IL-7Rα基因rs6897932位點SNP與疾病發(fā)病易感性關(guān)聯(lián)無統(tǒng)計學(xué)意義

4、，但與健康對照相比，RA患者該位點等位基因C比例有所增高，T比例有所降低，提示C可能為RA發(fā)病的危險基因；基因型為CC的RA患者血漿中的炎性細(xì)胞因子含量顯著高于基因型為TT和TC的RA患者。RA患者血漿中IL-7及其它炎性細(xì)胞因子水平都明顯增高，分析發(fā)現(xiàn)IL-7與IFN-γ、TNF-α、IL-1β分泌水平具有明顯正相關(guān)，IL-7可以促進IFN-γ、TNF-α的分泌，并促進了naive CD4+T細(xì)胞向Th1細(xì)胞分化。我們的研究結(jié)果還表明

5、IL-7Rα在健康對照者和RA患者PBMC中的CD4+T細(xì)胞上高表達，且RA患者IL-7Rα表達水平明顯高于健康對照。體內(nèi)實驗結(jié)果顯示小鼠IL-7Rα抗體治療可明顯緩解CIA臨床癥狀，減少關(guān)節(jié)炎性細(xì)胞浸潤和軟骨破壞，抑制CⅡ反應(yīng)性T細(xì)胞的增殖，通過減少脾臟致病性Th1和Th17細(xì)胞亞群數(shù)量，減少炎性細(xì)胞因子的分泌和相應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子的表達而達到免疫調(diào)節(jié)作用。
　　研究結(jié)果提示IL-7Rα基因rs6897932位點SNP與RA的發(fā)病易感性