rAAV2轉(zhuǎn)CTLA4ig基因胰島門靜脈移植治療糖尿病猴研究.pdf

1、糖尿病是嚴(yán)重威脅人類健康的常見(jiàn)病和多發(fā)病，異種胰島移植是治療糖尿病極具發(fā)展?jié)摿Φ姆椒?，但免疫排斥反?yīng)是影響胰島移植效果的重要原因之一。異種胰島移植免疫排斥反應(yīng)主要由T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)，T細(xì)胞的活化及其效應(yīng)有賴于MHC2抗原復(fù)合體識(shí)別及協(xié)同刺激信號(hào)傳遞，封閉共刺激通路可誘導(dǎo)受者對(duì)供者抗原特異性T細(xì)胞無(wú)能而產(chǎn)生耐受。細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4免疫球蛋白(CTLA4Ig)是CTLA4分子的胞外段與IgFc段的融合蛋白，可阻斷CD28介導(dǎo)的T細(xì)胞協(xié)

2、同刺激通路，抑制T細(xì)胞的活化，從而降低與移植排斥反應(yīng)有直接關(guān)系的白介素-2(IL-2)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、干擾素-γ(IFN-γ)等細(xì)胞因子的產(chǎn)生，對(duì)移植排斥反應(yīng)有明顯的抑制作用。但全身使用CTLA4Ig或體內(nèi)基因轉(zhuǎn)染可干擾整體免疫功能并導(dǎo)致非特異性免疫抑制，甚至發(fā)生嚴(yán)重并發(fā)癥，而且需要重復(fù)給予，價(jià)格昂貴。重組腺相關(guān)病毒rAAV具有安全性高、免疫原性低、物理性質(zhì)穩(wěn)定、感染細(xì)胞譜廣等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)宿主固有的免疫系統(tǒng)影響小，不會(huì)引起

3、嚴(yán)重的急性炎癥反應(yīng)，被認(rèn)為是最有前途的基因治療載體之一。
　　本研究中應(yīng)用rAAV2攜帶CTLA4Ig基因體外轉(zhuǎn)染新生豬胰島，CTLA4Ig基因成功轉(zhuǎn)入了新生豬胰島，并合成了具有正常功能的CTLA4Ig蛋白，而且轉(zhuǎn)染后的新生豬胰島形態(tài)、活性及生理功能完好。
　　使用本研究的胰島儲(chǔ)運(yùn)方法可以有效地防止胰島運(yùn)輸過(guò)程中出現(xiàn)的短時(shí)間內(nèi)溫度巨變，以該種方法保存胰島5小時(shí)以內(nèi)，其形態(tài)、功能未見(jiàn)明顯改變，有效地減少了儲(chǔ)運(yùn)過(guò)程中正常胰島的丟