穴位注射人參總皂甙對運動性疲勞大鼠肝保護(hù)的機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　建立運動性疲勞動物模型，觀察肝形態(tài)結(jié)構(gòu)、血清ALT、AST含量評價肝損傷保護(hù)效果，從肝自由基、乳酸和糖原代謝，從肝細(xì)胞凋亡機(jī)制著手，探討穴位（足三里和內(nèi)關(guān)）注射人參總皂甙對運動性疲勞大鼠肝保護(hù)的機(jī)制。
　　方法:
　　將24只大鼠隨機(jī)分為空白組（0.2 mL生理鹽水穴位注射）、模型組(0.2 mL生理鹽水穴位注射)和人參總皂甙穴位注射組（0.2 mL人參總皂甙穴位注射）等3組?？瞻捉M大鼠常規(guī)飲食和作息，模型

2、組和穴位注射組均以“高60cm、直徑55cm，水深50cm，水溫33±2℃”的塑料圓桶為游泳槽，進(jìn)行2天適應(yīng)癥性訓(xùn)練，從實驗第3天開始正式實驗。每天穴位注射給藥一次，穴位為足三里和內(nèi)關(guān)（單側(cè)），隔天交替，注1h后，除空白組大鼠外，模型組和穴位注射組大鼠每天早上游泳訓(xùn)練2次，每次自由游泳15min，中間擦干休息10min，連續(xù)訓(xùn)練21天。為保證游泳訓(xùn)練的運動負(fù)荷，以木棍及時驅(qū)趕扒在桶池壁邊緣或其他大鼠身上休息的大鼠。為確保大鼠安全，當(dāng)其出

3、現(xiàn)力竭狀態(tài)時，則停止其游泳訓(xùn)練。于末次運動后，在運動訓(xùn)練大鼠完成運動訓(xùn)練后的2h內(nèi)，處死各組大鼠:①取血，分離血清，-80℃保存，備用，便于谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)含量的檢測;②剖腹:取肝臟左葉組織適量（每只大鼠均為同一部位取材），-80℃下凍存，備用，便于肝總抗氧化能力(T-AOC)，肝丙二醛(MDA)、乳酸(LA)、一氧化氮(NO)和葡萄糖(Glu)含量，肝乳酸脫氫酶(LDH)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)、Ca

4、spase-3和Caspase-8活性的檢測。③取肝臟右葉組織適量（每只大鼠均為同一部位），浸泡于10％福爾馬林中固定24 h，進(jìn)行HE染色，光鏡下觀察肝組織病理改變。
　　結(jié)果:
　　1.空白組大鼠肝小葉形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，匯管區(qū)形態(tài)完整，未見變性和壞死，單個肝細(xì)胞核膜完整，核清晰、呈圓形或橢圓形，胞內(nèi)可見小脂滴，細(xì)胞線粒體形態(tài)正常，內(nèi)嵴結(jié)構(gòu)完整，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)排列均勻整齊;而模型組大鼠肝組織內(nèi)出現(xiàn)點狀、碎片狀細(xì)胞，單個肝細(xì)胞出現(xiàn)胞

5、漿疏松不均、氣球樣性變，提示存在壞死及炎性細(xì)胞浸潤的病理狀態(tài);穴位注射人參總皂甙組大鼠肝組織病變程度相對較輕，介于空白組和模型組之間。
　　2.與空白組比較，模型組和穴位注射人參總皂甙組大鼠血清ALT、AST含量均有顯著性增加（均有p＜0.01）;與模型組比較，穴位注射人參總皂甙組大鼠血清ALT、AST含量均有顯著性減少（均有p＜0.01）。
　　3.與空白組比較，模型組和穴位注射人參總皂甙組大鼠肝MDA含量和T-AOC活性

6、均有顯著性增加（均有p＜0.01）;與模型比較，穴位注射人參總皂甙組大鼠肝MDA含量和T-AOC活性均有顯著性降低（均有p＜0.01）。
　　4.與空白組比較，模型組大鼠肝乳酸含量和乳酸脫氫酶活性均顯著性增加、肝糖原含量顯著性減少（均有p＜0.01），穴位注射人參總皂甙組大鼠肝乳酸含量顯著增加(p＜0.01)，但肝乳酸脫氫酶活性和肝糖原含量均無著性差異（均有p＞0.05）;與模型組比較，穴位注射人參總皂甙組大鼠肝乳酸含量和乳酸脫氫

7、酶活性均有顯著降低（均有p＜0.01），肝糖原含量顯著性增加(p＜0.01)。
　　5.與空白組比較，模型組和穴位注射人參總皂甙組大鼠肝NO含量，iNOS、caspase-3和caspase-8活性均有顯著性增加（均有p＜0.01）;與模型比較，穴位注射人參總皂甙組大鼠肝NO含量，iNOS、 caspase-3和caspase-8活性均有顯著性降低（均有p＜0.01）。
　　結(jié)論:
　　1.以“高60cm、直徑55cm

8、，水深50cm，水溫33±2℃的塑料圓桶作為大鼠游泳槽，使SD成年雄性大鼠每天進(jìn)行游泳訓(xùn)練2次，每次自由游泳15min，中間擦干休息10min，連續(xù)訓(xùn)練21天，在大鼠游泳訓(xùn)練中，用木棍及時驅(qū)趕扒在桶池壁邊緣或其他大鼠身上休息的大鼠，當(dāng)其出現(xiàn)力竭狀態(tài)時，則停止其游泳訓(xùn)練”為造模方法，可以復(fù)制成功運動性疲勞動物（大鼠）模型。
　　2.足三里和內(nèi)關(guān)隔天交替，單側(cè)，穴位注射人參總皂甙，能達(dá)到抗疲勞療效，能使運動性疲勞大鼠血清ALT、AST