黃連解毒湯對自發(fā)性高血壓大鼠降壓作用的研究.pdf

1、目的：本課題以黃連解毒湯（HLJD）為研究對象和自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)為動物模型，分別從實驗動物血壓、組織結(jié)構(gòu)和基因表達及血液等相關(guān)指標來探討HLJD對SHR血壓、血管結(jié)構(gòu)的改善作用和胸主動脈內(nèi)Rhoa、eNOS基因表達的影響，以探討黃連解毒湯在治療高血壓方面的研究。
　　方法：1．血壓檢測：BP-6無創(chuàng)尾動脈壓分析系統(tǒng)于用藥前檢測各組大鼠血壓一次及用藥后每周檢測各組大鼠血壓變化一次。2．血清NO的檢測：腹主動脈取血后，室溫放

2、臵待血液凝固，血清析出，于低溫離心機離心，立即用硝酸還原法檢測NO含量。3．ELISA法檢測：對SHR血清中血管內(nèi)皮素ET-1、血管性假血友病因子vWF和一氧化氮合酶NOS、鈣調(diào)素CAM含量的檢測。4．電鏡對內(nèi)皮超微結(jié)構(gòu)的觀察：通過透射電鏡主要觀察胸主動脈細胞間連接，細胞形態(tài)、核內(nèi)細胞器等超微結(jié)構(gòu)的變化。5．胸主動脈Rhoa及eNOS mRNA的檢測：超低溫冰箱保存的標本,提取mRNA，逆轉(zhuǎn)錄得cDNA，擴增內(nèi)參以檢測逆轉(zhuǎn)錄效果，熒光定

3、量PCR檢測Rhoa及eNOSmRNA表達狀況。
　　結(jié)果：1．SHR血壓的變化：SHR隨著周齡增加血壓逐漸升高，6周后模型組血壓顯著高于治療前(P<0.01)。與模型組相比，黃連解毒湯各劑量組和陽性組均能顯著地降低大鼠的血壓，至給藥結(jié)束后，黃連解毒湯高劑量組與陽性組降壓效果相當(P>0.05)。在整個實驗過程中，黃連解毒湯組起效較慢，而陽性組則在用藥的初期血壓就下降。2.血清NO的檢測、ELISA法檢測NOS、ET-1、VWF、

4、CAM：與空白組比較，模型組動物血清NO水平顯著降低(P<0.01)，血清中ET-l與VWF水平顯著升高(P<0.01)，NOS與CAM水平顯著降低(P<0.01)。與模型組比較，陽性組和HLJD各組NO水平均明顯提高(P<0.01)，ET-1與vWF水平降低(P<0.05或P<0.01)，NOS與CAM水平提高(P<0.01或P<0.05)。3.電子顯微鏡:透射電鏡下 HLJD能使自發(fā)性高血壓模型大鼠胸主動脈超微結(jié)構(gòu)的改變得到明顯逆轉(zhuǎn)

5、，明顯減輕SHR大鼠內(nèi)皮細胞超微結(jié)構(gòu)的損傷，減輕細胞腫脹、細胞器的外漏，保持線粒體排列整齊、血管內(nèi)皮細胞間隙正常;使主動脈內(nèi)皮細胞基本保持完整形態(tài)，無核壞死，內(nèi)彈力板較完整，均勻。這種保護作用較陽性組作用差異不顯著。4.熒光定量PCR檢測:自發(fā)性高血壓組大鼠胸主動脈eNOS活性較空白組明顯降低（P<0.01）,HLJD高劑量能夠降低高血壓大鼠胸主動脈 Rhoa的表達（P<0.05），并能提高高血壓大鼠胸主動脈eNOS的表達（P<0.01

6、），于陽性組相比（P>0.05）。
　　結(jié)論：1. HLJD及陽性對照藥卡托普利對自發(fā)性高血壓大鼠的血壓均有明顯的改善作用，從降壓效果看，HLJD高劑量組有良好的降壓作用，起效較陽性組慢。2. HLJD升高血清中NO、NOS、CAM含量，降低ET-1和vWF的含量，故可認為HLJD具有一定血管保護作用。3. HLJD能改善SHR血管內(nèi)皮結(jié)構(gòu)。4. HLJD對SHR胸主動脈內(nèi)Rhoa和eNOS的表達均有作用，能夠降低高血壓大鼠胸主動