不同周齡自發(fā)性高血壓大鼠對降壓藥反應性研究.pdf

1、隨著人們壽命的延長，老年人在人口中的比例逐漸增加，高血壓患病率隨年齡而增長，它已成為危害人民健康最為常見的心血管疾病之一。目前對非血流動力學機制內皮—一氧化氮(NO)-氧化應力鏈(oxidation stress)在高血壓發(fā)生及病程發(fā)展中的重要參與受到越來越多重視。本實驗通過遙控測壓法動態(tài)監(jiān)測不同周齡清醒無拘束自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)血壓情況及變異度；觀察不同周齡SHR的內皮功能及氧化應力變化；研究降壓藥物干預前后的血壓和氧化應力的變

2、化，及其之間的關系；探討不同周齡SHR對藥物反應性差異；選用westen-blot技術檢測不同周齡SHR的Gstml(glutathione S-transferase mu type 1)谷胱甘肽-S-轉移酶表達情況，及其與周齡增加、血管內皮功能及氧化應力之間的關系；藥物是否通過調控影響Gstml的表達，而改善內皮-NO-氧化應力鏈狀態(tài)。為臨床應用抗高血壓藥物治療提供新的靶點和手段。 方法和結果： 1、不同周齡清醒無拘

3、束SHR動態(tài)血壓變化及阻力血管形態(tài)學研究分別選用16周及40周齡的自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)模型，每組5只，使用遙感監(jiān)測技術觀察清醒無拘束SHR的動態(tài)血壓變化，并對不同周齡SHR的血壓晝夜變化及變異度進行分析。比較不同周齡SHR阻力血管的形態(tài)學變化。 結果表明，40周SHR較16周SHR的24h血壓均值有增高趨勢，但沒有統(tǒng)計學意義；16周SHR的SBP夜間下降率顯著大于40周SHR(0.0498％vs 0.0211％，P<0.0

4、5)；40周SHR血壓變異系數(shù)較16周SHR明顯增加。腸系膜動脈(阻力血管)中膜面積/管腔面積比值隨著周齡的增加而增加，5周、16周與40周相比有統(tǒng)計學意義(0.8955+0.10，1.0653±0.15 vs 1.3373±0.19，P<0.05)。 2、不同周齡SHR內皮功能及氧化應力變化研究通過觀察離體主動脈對乙酰膽堿(ACh)及硝普鈉(SNP)反應性，比較5周、16周及40周齡SHR的內皮功能的差異；分別使用放免法、硝酸

5、還原酶法、硫代巴比妥酸比色法(TBA)、雙硫代硝基苯(DTNB)檢測血中ET、NO、MDA含量以及GSH-Px活性；利用westem-blot技術檢測40周SHR主動脈GSTM1蛋白表達。 結果表明，內皮依賴性血管舒張功能隨著周齡的增加而減弱。隨著周齡的增加，血管活性物質NO/ET及氧化應激標志GSH-Px、MDA發(fā)生變化。16及40周SHR血清NO顯著低于5周齡SHR(12.84±1.58 μ mol/L，12.17±1.17

6、 μmol/L VS 22.64±1.69 μ mol/L，P<0.01)。5周、16及40周SHR的血清ET水平無顯著性差異；40周SHR血清MDA含量顯著高于5周和16周SHR血清MDA含量(13.71±1.47pg/ml vs 7.54±1.19 pg/ml，7.94±0.83pg/ml，P<0.01)。40周SHR血清GSH-Px活性較5周和16周SHR的GSH-Px顯著性降低(2368.00±60.39U/ml vs 2925

7、.00±75.11 U/ml，2976.00±329.94U/ml，P<0.01)；40周齡SHR較同齡的WKY大鼠主動脈Gstml表達顯著性降低，灰度值分別是(716.93±133.72 vs1215.52±270.35，P<0.05)。 3、聯(lián)合降壓治療對不同周齡SHR血壓反應性及阻力血管形態(tài)學研究分別單獨使用美托洛爾(metoprolol，Met)、牛磺酸(taurine，Tau)及二者聯(lián)合對16周及40周SHR治療14天，采用遙

8、感監(jiān)測技術動態(tài)觀察并比較不同周齡清醒無拘束SHR經(jīng)過藥物治療后血壓變化、血壓變異度及藥物干預后阻力血管的形態(tài)學比較。 結果表明，16周SHR在不同的處理后，24h動態(tài)血壓結果提示Met組可以降低SHR的夜間血壓，Tau組給藥14天，僅能阻止SHR血壓的升高。Met+Tau組可以有效、平穩(wěn)的降低血壓，且第14天脈壓較第1天明顯降低(43.65±7.54mmHg vs 34.08±5.42mmHg，P<0.01)。40周SHR在不同

9、的處理后，Met組降壓效果不明顯，血壓變異系數(shù)增加，Tau組及Met+Tau組給藥14天后血壓較給藥前降低，且變異系數(shù)有減少的趨勢。在觀察藥物干預對阻力血管形態(tài)學變化方面，16周齡SHR經(jīng)過藥物干預2周后，Met組、Tau組和Met+Tau組的中膜面積與管腔面積比值分別為0.7627±0.12，0.8110±0.15，0.7138±10.12顯著低于對照組1.0653±0.15(P<0.01)；而各治療組之間無顯著差異。其它周齡組SHR

10、的該項指標治療前后無顯著性差異。 4、聯(lián)合降壓治療對不同周齡SHR內皮功能及氧化應力變化研究分別使用metoprolol、taurine及二者聯(lián)合對5周、16周及40周SHR治療14天，觀察不同周齡的SHR經(jīng)過藥物治療后，離體主動脈對ACh及SNP的反應性，通過對比探討內皮功能隨周齡的變化；測定血中ET、NO、MDA含量及GSH-Px活性變化，并檢測主動脈使用Tau干預2周后GSTMl蛋白表達的變化，方法同前。 主動脈內

11、皮依賴性舒張功能及血中NO/ET、GSH-Px/MDA的測定結果提示，5周齡SHR使用Tau干預后不僅不能改善內皮功能及氧化應力，反而有加重的趨勢。測定內皮依賴性舒張功能發(fā)現(xiàn)Tau組最大舒張率較對照組顯著降低(62.14±14.68％vs 78.88±11.04％，P<0.01)；16周藥物治療組較對照組內皮依賴性舒張功能有改善，且能增加NO含量、增加GSH-Px活性及降低ET、MDA含量，Met+Tau組作用顯著；而40周SHR治療1

12、4天后主動脈內皮依賴性舒張功能改善不明顯，無統(tǒng)計學意義。Tau組較對照組血清GSH-Px活力顯著性增高(3052.80±283.66U/mlvs 2368.00±60.39U/ml，P<0.01)，血清MDA含量降低(9.45±0.66pg/ml vs13.71±1.47pg/ml，P<0.01)；40周SHR與同周齡WKY比較，主動脈中GSTM1表達顯著減少，Tau對40周SHR干預2周后，GSTM1表達增加，但無統(tǒng)計學意義。

13、 結論： 1、40周SHR24h動態(tài)血壓變異度較16周SHR增大，且隨著周齡的增加，阻力血管(腸系膜動脈)的中膜面積/管腔面積比值增加。 2、SHR存在內皮功能損傷及氧化應力的增加，隨著周齡的增加損傷加重。 3、Met、Tau及Met+Tau干預2周不能改善5周齡SHR主動脈內皮依賴性舒張功能及氧化應力，2周干預未能對腸系膜動脈的形態(tài)學變化發(fā)生影響。 4、單用Met及Tau僅能有效阻止16周SHR血壓升高