胰高血糖素樣肽-1及其類似物Exendin4對肝內(nèi)膽管癌發(fā)生發(fā)展的作用.pdf

1、肝內(nèi)膽管癌(Intrahepatic cholangiocarcinoma)是起源于膽管內(nèi)皮細(xì)胞的惡性腫瘤。在肝膽外科腫瘤中發(fā)病率僅次于肝細(xì)胞癌。隨著生活習(xí)慣的改變，膽管癌的發(fā)病率逐年升高。在1974年至1994年的20年間，膽管癌成為上海地區(qū)發(fā)病率增長最快的腫瘤，男、女發(fā)病率分別升高了119％和124％。[1]再加上膽管癌的惡性程度高，治療難度大，成為危害人群健康的重要因素。目前，對于膽管癌的發(fā)病機(jī)理尚不清楚。大量研究表明一些肝膽系統(tǒng)

2、疾病與膽管癌的發(fā)生關(guān)系密切，如原發(fā)性硬化性膽管炎(PCS)、肝內(nèi)外膽管結(jié)石、膽管腺瘤、肝臟吸蟲病、先天性膽管畸形如卡洛里病(Calori's disease)等，ICC的其他幾個(gè)重要的危險(xiǎn)因素，如丙肝及非酒精性脂肪肝有了明顯的升高。國際學(xué)術(shù)界公認(rèn)長期的膽管病變，導(dǎo)致各種因子刺激膽管上皮引發(fā)膽管上皮細(xì)胞的過度增生繼而癌變是膽管癌形成的主要原因。[2]
　　 已有的研究表明膽管細(xì)胞增生調(diào)節(jié)與內(nèi)分泌系統(tǒng)有著密切的聯(lián)系。內(nèi)分泌系統(tǒng)通過多

3、種不同種類的激素對膽管細(xì)胞的增生起到很重要的調(diào)節(jié)作用，而膽管細(xì)胞增生和凋亡的失衡、惡性轉(zhuǎn)變及膽管癌的產(chǎn)生也與內(nèi)分泌系統(tǒng)的調(diào)節(jié)障礙有重要關(guān)系。與此相關(guān)，一些臨床研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病特別是糖尿病亦參與膽管腫瘤的發(fā)生發(fā)展，并逐漸受到重視，近來，胡先貴等關(guān)于糖尿病是否增加膽管癌罹患的風(fēng)險(xiǎn)的Meta分析指出，肥胖、糖尿病可能是膽管癌（包括肝內(nèi)膽管癌和肝外膽管癌）發(fā)病的危險(xiǎn)因素。這些研究都表明，內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病與膽管系統(tǒng)疾病和膽管腫瘤有著重要的聯(lián)系

4、。而糖尿病作為我國的常見病和多發(fā)病，也勢必對膽管腫瘤的發(fā)病率和臨床治療產(chǎn)生影響。然而，糖尿病和膽管癌之間關(guān)系的機(jī)理還不清楚。
　　 胰高血糖素樣肽-1（Glucagon-like peptide-1，GLP-1）是機(jī)體神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)中重要的一員，而且在糖尿病的治療領(lǐng)域也備受關(guān)注。GLP-1是由腸道上皮L型內(nèi)分泌細(xì)胞所分泌的肽類激素。由于胰腺與膽管系統(tǒng)的胚胎起源相近，[18]近年來，GLP-1對膽管系統(tǒng)的作用也逐漸受到重視。然而，

5、目前尚沒有GLP-1對于肝內(nèi)膽管癌的發(fā)生、發(fā)展的研究見于報(bào)道。膽管細(xì)胞的過度增生與神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)有著緊密的聯(lián)系，而臨床上肝內(nèi)膽管癌的發(fā)生、發(fā)展也與糖尿病等內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病密不可分。而GLP-1作為在兩個(gè)領(lǐng)域的交點(diǎn)，對解答肝內(nèi)膽管癌發(fā)生發(fā)展的問題意義重大。目前，對于GLP-1及其類似物Exendin-4的研究主要集中在糖尿病的治療領(lǐng)域，而關(guān)于其對膽管系統(tǒng)疾病的作用尚未引起重視，在國內(nèi)外諸多文獻(xiàn)證實(shí)神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)和內(nèi)分泌疾病對于膽管癌發(fā)生發(fā)展

6、的影響下，我們希望探討神經(jīng)內(nèi)分泌激素GLP-1及其受體在人膽管癌組織中的表達(dá)，GLP-1及其類似物Exendin-4對膽管癌細(xì)胞的作用及細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)路線，同時(shí)利用動(dòng)物模型來評價(jià)GLP-1極其類似物Exendin-4在膽管癌的治療領(lǐng)域中的意義。研究結(jié)果將有助于回答:糖尿病與膽管癌之間究竟通過怎樣的機(jī)理相互聯(lián)系？GLP-1在膽管系統(tǒng)疾病中起到了什么樣的作用，是否和對胰島β細(xì)胞的作用相似？GLP-1類似物Exendin-4在治療糖尿病的同時(shí)

7、對膽管系統(tǒng)有什么影響？能否為膽管癌的治療提供新的思路？隨著糖尿病和膽管癌發(fā)病率持續(xù)升高，該課題的開展具有重要的實(shí)際意義。
　　 因此，本研究從臨床資料入手，收集63例肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞的臨床病例資料，分析其病歷資料特點(diǎn)，63例患者全部接受手術(shù)切除肝內(nèi)膽管癌，其平均存活時(shí)間為21.6月，中位生存時(shí)間為18個(gè)月，63例患者中糖尿病的發(fā)生率為20.6％(13/63)，是膽管癌發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，單因素分析結(jié)果提示，影響預(yù)后的整體因素包括腫

8、瘤的TNM分期，腫瘤的數(shù)目，腫瘤大小，是否有門靜脈癌栓，是否有血管侵犯。多因素分析提示影響預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素為TNM分期，以及門靜脈癌栓。同時(shí)選取肝細(xì)胞癌組織、正常肝組織作為對照，分析GLP-1R在各種組織中的表達(dá)，在63例膽管癌組織中，陽性表達(dá)率為55.6％肝細(xì)胞癌中的陽性表達(dá)率為19.2％，說明，GLP-1R在膽管細(xì)胞癌中的表達(dá)明顯高于肝細(xì)胞癌和正常肝組織，我們也可能得出這樣的結(jié)論:GLP-1可能為肝內(nèi)膽管癌的一個(gè)潛在的Mark，或

9、者一個(gè)治療的新靶點(diǎn)。
　　 基于上述情況，我們選取人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞系HuCCT1進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn)，GLP-1及其類似物Exendin-4對于腫瘤細(xì)胞具有一定的抑制增殖、促進(jìn)凋亡的作用，進(jìn)一步聯(lián)合化療藥物奧沙利鉑共同處理腫瘤細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)Exendin-4具有對化療藥物的增敏作用，其腫瘤形成減少，凋亡增多。腫瘤侵襲遷移能力下降。裸鼠種植肝內(nèi)膽管癌皮下瘤，荷瘤成功后，予以Exendin-4及奧沙利鉑共同處理，發(fā)現(xiàn)，共同處

10、理的荷瘤小鼠腫瘤體積有明顯的縮小，且其組織表達(dá)腫瘤增殖的指標(biāo)也有所下降。在裸鼠肝臟種植肝內(nèi)膽肝癌移植瘤，分組進(jìn)行藥物調(diào)控，發(fā)現(xiàn)經(jīng)過Exendin4處理過的肝內(nèi)移植瘤，其增殖能力下降，而腫瘤凋亡能力上升。
　　 隨著肥胖以及2型糖尿病患者的增多，GLP-1在這一領(lǐng)域的應(yīng)用也逐漸增多。然而，這類藥物對惡性腫瘤的影響還沒有被研究透徹，受限于樣本量和研究時(shí)間，我們還需要更長的時(shí)間來拿出更令人信服的證據(jù)?？傊?，我們的研究表明，腸促胰島素G