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1、目的:①制作腦性癱瘓小鼠模型,并以動(dòng)物行為及腦病理形態(tài)學(xué)改變予以評(píng)定;②檢測(cè)此模型不同時(shí)間點(diǎn)海馬組織中泛素連接酶Huwel的表達(dá)變化,并探討其意義。
方法:①新生7d昆明小鼠,隨機(jī)分為模型組、對(duì)照組、假手術(shù)組,手術(shù)結(jié)扎模型組小鼠右側(cè)頸總動(dòng)脈并予以缺氧,制作腦性癱瘓模型,各組小鼠于術(shù)后3d、7d、14d、21d稱重、量身長(zhǎng),于術(shù)后4周進(jìn)行行為和腦病理形態(tài)檢測(cè);②各組小鼠分別在術(shù)后6h、12h、24h、3d、7d、14d、21d、
2、3M灌注取腦,免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)各時(shí)間點(diǎn)小鼠海馬各區(qū)Huwel的表達(dá)。
結(jié)果:①體重、身長(zhǎng)分析:模型組小鼠體重和身長(zhǎng)較對(duì)照組和假手術(shù)組均降低(P<0.05);②行為檢測(cè):模型組小鼠趾距和步長(zhǎng)較對(duì)照組和假手術(shù)組均減小(P<0.05);③腦病理形態(tài)學(xué)檢測(cè):模型組小鼠腦HE染色顯示:損傷側(cè)皮層細(xì)胞排列紊亂,膠質(zhì)細(xì)胞增生,海馬神經(jīng)元核固縮、深染;④免疫組織化學(xué)染色:成年小鼠腦中Huwel廣泛表達(dá),存大腦皮層、韁核、海馬、杏仁核、小腦
3、浦肯野氏細(xì)胞層呈強(qiáng)陽性;正常小鼠在其發(fā)育過程中海馬各區(qū)Huwel的表達(dá)與其生長(zhǎng)成正比;模型組小鼠自術(shù)后12h起,損傷側(cè)海馬CA1、CA3、DG區(qū)Huwel表達(dá)均高于其對(duì)側(cè)(P<0.05);同時(shí),自術(shù)后12h時(shí)間點(diǎn)起,模型組損傷側(cè)海馬CA1、CA3、DG區(qū)均高于其對(duì)照組和假手術(shù)組損傷側(cè)(P<0.05);模型組各時(shí)間點(diǎn)損傷對(duì)側(cè)海馬與其對(duì)照組、假手術(shù)組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);各時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組和假手術(shù)組兩側(cè)海馬Huwel表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)
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