腹部火器傷后腦組織COX-2的表達(dá)及其與腦損傷相關(guān)機(jī)制的研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立豬腹部腸管火器傷模型，觀察傷后大腦結(jié)構(gòu)和功能的變化，傷后血漿內(nèi)毒素、TNF-α、IL-6水平、腦組織COX-2、PGE2的表達(dá)及腦細(xì)胞凋亡的動(dòng)態(tài)變化，探討COX-2等因子在腹部腸管火器傷后繼發(fā)性腦損傷中的作用，旨在為腹部火器傷后繼發(fā)性腦損傷的預(yù)防和治療提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：采用健康長(zhǎng)白仔豬42頭，隨機(jī)等分為7組：對(duì)照組和腹部腸管火器傷后1h、2h、4h、8h、12h和24h實(shí)驗(yàn)組。實(shí)驗(yàn)組在常溫常濕環(huán)境下

2、（溫度22℃-24℃，相對(duì)濕度50％-60％）麻醉后軍用54式手槍槍擊致傷（射擊點(diǎn)為臍水平后方2cm處右側(cè)腹壁皺襞下緣無(wú)毛區(qū)），建立腹部腸管火器傷模型。對(duì)照組除不致傷外，其余步驟與實(shí)驗(yàn)組相同。各實(shí)驗(yàn)組于傷后相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)取材，對(duì)照組回實(shí)驗(yàn)室立即取材。在光鏡及電鏡下觀察各組腦組織學(xué)變化，采用顯色基質(zhì)鱟試劑法檢測(cè)各組血漿內(nèi)毒素水平；雙抗體夾心ELISA法測(cè)各組血漿TNF-α、IL-6水平及腦組織中的PGE2表達(dá)；采用Tunnel法測(cè)定腦細(xì)胞凋亡

3、指數(shù)；免疫組織化學(xué)圖像分析法測(cè)定各組腦組織COX-2的表達(dá)。 結(jié)果：（1）對(duì)照組及1h、2h、4h、8h組腦組織未見(jiàn)明顯的損傷性變化。12h、24h組腦組織于光鏡下可見(jiàn)神經(jīng)細(xì)胞層次不清、排列紊亂，細(xì)胞出現(xiàn)不同程度水腫，毛細(xì)血管擴(kuò)張、腔內(nèi)紅細(xì)胞崩解，管腔周圍出現(xiàn)較大間隙，間質(zhì)疏松，呈網(wǎng)狀改變。（2）電鏡下對(duì)照組及1h、2h、4h組的神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，神經(jīng)細(xì)胞核核膜規(guī)則、完整，膠質(zhì)細(xì)胞無(wú)腫脹，毛細(xì)血管周圍無(wú)空泡變性，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核糖體分

4、布密集，線粒體內(nèi)峙規(guī)則；8h、12h、24h細(xì)胞輪廓模糊，間隙增大，細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)部分缺失，細(xì)胞質(zhì)呈空洞狀態(tài)，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張；高爾基體腫脹，器池及囊泡消失。線粒體腫脹、擴(kuò)張及空泡樣變，突觸結(jié)構(gòu)腫脹變性；細(xì)胞核染色質(zhì)凝集于核邊緣，核膜部分溶解，膠質(zhì)細(xì)胞腫脹加重，毛細(xì)血管管壁擴(kuò)張，管腔狹窄，血管周圍呈空腔狀態(tài)溶酶體明顯增多，微管扭曲，可見(jiàn)微絲溶解。（3）實(shí)驗(yàn)各組血漿內(nèi)毒素水平均明顯高于對(duì)照組（P<0.05），于傷后8h出現(xiàn)高峰，傷后12h仍維持

5、在高峰值水平。（4）實(shí)驗(yàn)各組血漿TNF-α、IL-6水平均明顯高于對(duì)照組（P<0.05），均于傷后12h出現(xiàn)高峰。（5）傷后各組腦細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯高于對(duì)照組（P<0.05），且隨時(shí)間延長(zhǎng)而增加。（6）實(shí)驗(yàn)組各組腦組織COX-2的表達(dá)均明顯高于對(duì)照組（P<0.05），且與損傷時(shí)間的長(zhǎng)短成正相關(guān)。（7）實(shí)驗(yàn)組各組腦組織PGE2的表達(dá)均明顯高于對(duì)照組（P<0.05），且與損傷時(shí)間的長(zhǎng)短成正相關(guān)。（8）相關(guān)分析表明，傷后血漿內(nèi)毒素水平與血漿TN

6、F-α、IL-6水平、腦組織COX-2、PGE2的表達(dá)及腦細(xì)胞的凋亡均呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.908、0.911、0.548、0.716、0.892（P<0.05）。 結(jié)論：（1）腹部腸管火器傷導(dǎo)致大腦出現(xiàn)結(jié)構(gòu)和功能的損傷性變化，隨著傷后時(shí)間的延長(zhǎng)而加重。（2）腹部腸管火器傷后內(nèi)毒素血癥可刺激刺機(jī)體TNF-α、IL-6的產(chǎn)生、刺激腦組織COX-2、PGE2的表達(dá)以及腦細(xì)胞的凋亡，并通過(guò)這些炎癥因子介導(dǎo)腦損傷。復(fù)雜的內(nèi)毒素-細(xì)