COX-2、CCR7的表達與胃癌轉移機制研究.pdf

1、第一章、COX-2、CCR7在胃癌中的表達
　　目的：探討COX-2、CCR7在胃癌中的表達與淋巴轉移的組織病理分化、浸潤深度、淋巴轉移等臨床病理學參數(shù)的關系，并分析COX-2、CCR7表達的相關性。
　　方法：采用免疫組織化學方法對胃癌組織100例、胃癌癌旁組織40例石蠟包埋切片進行染色，檢測COX-2、CCR7的表達，分析其在胃癌組織的表達與臨床病理學參數(shù)的關系，對COX-2、CCR7的表達進行相關性分析。
　　結

2、果：在胃癌組織，COX-2、CCR7均高表達，表達率分別為72.5％和67.5％，二者表達有相關性(P＜0.05)。COX-2、CCR7的表達均與腫瘤的浸潤深度、TNM分期、淋巴轉移、腫瘤大小相關(P＜0.05)，與胃癌患者的診斷年齡、性別等因素無關(P＞0.05)。CCR7的表達與腫瘤的病理分化、腫瘤部位相關，但COX-2的表達與此無關。
　　結論：COX-2、CCR7在胃癌組織高表達，二者表達有相關性。COX-2、CCR7的表

3、達與胃癌的浸潤深度、TNM分期、淋巴轉移、腫瘤大小等臨床病理學參數(shù)有關。提示臨床上聯(lián)合檢測COX-2和CCR7對胃癌轉移的預測可能會有所幫助。
　　第二章、COX-2對胃癌細胞CCR7表達的調節(jié)
　　目的：探討COX-2對胃癌細胞CCR7表達的調節(jié)及其機制。
　　方法：用NS-398、PGE2、Con A、EP受體激動/抑制劑作用于胃癌細胞SCG-7901、MGC80-3，RT-PCR、Westem blot在mRNA

4、和蛋白水平檢測其對胃癌細胞CCR7表達的影響，F(xiàn)ura-2/AM、趨化小室研究NS-398、PGE2、Con A等化合物作用于胃癌細胞SCG-7901、MGC80-3后，其對CCL21刺激引起的胞內(nèi)鈣離子內(nèi)流、趨化細胞和侵襲細胞的影響。
　　結果：在SCG-7901和MGC80-3細胞，均可檢測到COX-2高表達，CCR7在兩者有不同程度的表達，EP1、EP2、EP4受體表達于SCG-7901和MGC80-3細胞，EP3受體僅表達

5、于前者。NS-398(10μmol/L)、AH-23848（10μmol/L）能抑制二者CCR7表達，抑制CCL21刺激的鈣離子內(nèi)流和趨化、侵襲能力，而PGE2、Con A的作用則與其相反，SC-19220、17-phenyl trinor PGE2、AH-6809阻斷或激動其他EP受體后，沒有觀察到此變化。說明NS-398(10μmol/L)、AH-23848(10μmol/L)能降低SCG-7901、MGC80-3細胞CCR7的功能

6、性表達，抑制胃癌的轉移;PGE2、Con A則能促進其功能性表達，促進腫瘤的轉移。
　　結論：在SCG-7901、MGC80-3細胞，抑制COX-2和EP4受體能下調CCR7的功能性表達，為進一步研究COX-2、CCR7促進腫瘤轉移的機制提供了理論基礎，也提示COX-2與CCR7表達在腫瘤轉移中有協(xié)同作用，及他們在腫瘤干預治療中的潛在應用價值。
　　第三章、siRNA-CCR7對胃癌細胞轉移的影響
　　目的：體外實驗探

7、討siRNA-CCR7對胃癌轉移的影響及其與VEGF-C、VEGF-D、VEGF-A的關系。
　　方法：運用siRNA實驗技術，構建抑制CCR7表達的siRNA載體，穩(wěn)定轉染表達CCR7的胃癌細胞株SCG-7901、MGC80-3，在mRNA和蛋白水平檢測其對胃癌細胞CCR7的抑制作用和VEGF-C、VEGF-D、VEGF-A表達的變化;再用鈣離子內(nèi)流、趨化及侵襲實驗檢測其對胃癌細胞趨化、侵襲能力的影響。
　　結果：穩(wěn)定轉染

8、siRNA1、siRNA2的SCG-7901、MGC80-3細胞，在mRNA、蛋白水平均能有效抑制胃癌細胞CCR7的表達，并能抑制CCL21刺激的趨化和侵襲能力。在SCG-7901細胞，siRNA1、siRNA2能抑制胃癌細胞CCR7、VEGF-C的表達，不影響SCG-7901、MGC80-3細胞VEGF-D、VEGF-A的表達。MGC80-3細胞沒有檢測到VEGF-C的表達。
　　結論：siRNA-CCR7能有效的抑制胃癌細胞的