熊果酸抑制胃癌細(xì)胞COx-2表達(dá)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究.pdf

1、前期研究發(fā)現(xiàn)，熊果酸(ursolic acid，UA)可促成胃癌細(xì)胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species，ROS)生成，誘導(dǎo)單磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase，AMPK)磷酸化，抑制信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄活化因子3（signal transducer and activator of transcription3，STAT3）磷酸化，降低環(huán)氧化酶-2（Cyclooxygenas

2、e，COX-2）表達(dá)。但是，UA抑制COX-2表達(dá)的分子機(jī)制尚未完全闡明。
　　目的:進(jìn)一步明確UA抑制胃癌細(xì)胞COX-2表達(dá)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。
　　方法:人胃腺癌細(xì)胞株SGC-7901和MKN-45常規(guī)培養(yǎng)于含10％FBS的RPMI-1640(Roswell Park Memorial Institute-1640)培養(yǎng)基中，于對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞長至亞單層后分別以5 mmol/L抗氧化劑NAC(N-Acetyl-L-Cystei

3、ne，N-乙酰-L-半胱氨酸)預(yù)處理30 min，0.5 mmol/L AMPK激活劑AICAR（（5-aminomidazole-4-carboxamide ribotide，5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸）預(yù)處理2h，2.5μmol/L AMPK抑制劑compound C預(yù)處理1h，5μmol/L STAT3抑制劑WP1066預(yù)處理1h后再加30μmol/L UA再干預(yù)培養(yǎng)24 h，以未經(jīng)任何處理的無血清條件下的細(xì)胞、單獨(dú)UA干預(yù)或

4、單獨(dú)NAC、AICAR、compoundC、WP1066干預(yù)的細(xì)胞作為對(duì)照，提取細(xì)胞蛋白，BCA法蛋白濃度定量后Westernblotting檢測(cè)AMPK磷酸化水平、STAT3磷酸化水平和COX-2蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:抗氧化劑NAC和AMPK抑制劑compound C有效抑制了UA誘導(dǎo)的人胃腺癌SGC-7901和MKN-45細(xì)胞AMPK和ACC磷酸化，逆轉(zhuǎn)UA對(duì)STAT3磷酸化和COX-2表達(dá)的抑制作用。AMPK激活劑AICAR