出血性休克對大鼠空腸動力的影響.pdf

1、研究目的:
　　 出血性休克(hemorrhagic shock，HS)可造成正常的腸道動力功能的損傷。腸道動力障礙后引發(fā)的腸道細菌增殖在腸道細菌移位中起著重要的作用，而腸道的細菌移位又是導致多器官功能衰竭(multiple organ failure，MOF)的原因之一。并且，腸道動力障礙迫使患者使用腸外營養(yǎng)并延長患者住院時間。在腸神經(jīng)系統(tǒng)(enteric nervoussystem，ENS)中膽堿能腸神經(jīng)釋放的乙酰膽堿(ac

2、etylcholine，ACh)是胃腸道最主要的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，可刺激胃腸平滑肌收縮。一氧化氮(NO，nitric oxide)是從表達神經(jīng)元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase，nNOS)的神經(jīng)元釋放的，是主要的非腎上腺能非膽堿能神經(jīng)遞質(zhì)之一。所以，本研究的主要目的：觀察出血性休克對大鼠小腸運動功能的損傷及其神經(jīng)源性損傷機制。
　　 研究方法：
　　 雄性SD大鼠隨機均分為對照組

3、，HS組。HS組在給予重度出血性休克(平均動脈壓維持在40mmHg左右，持續(xù)90min)后行復蘇，對照組大鼠給予相同麻醉及插管，但不行放血。復蘇6h后處死大鼠。兩組大鼠處死前30min伊文斯藍灌胃測定小腸推進率；通過離體恒溫平滑肌浴槽技術(shù)，來觀察離體空腸平滑肌的自發(fā)收縮活動和對乙酰膽堿(acetylcholine，ACh)、KCl、TTX、NOS的非選擇性抑制劑Nω-Nitro-L-arginine(L-NNA)及誘生性一氧化氮合酶(i

4、nducible nitric oxide synthase，iNOS)抑制劑氨基胍(aminoguanidine,AG)的收縮反應變化。記錄空腸收縮的振幅、頻率及曲線下面積(area under curve，AUC)用于結(jié)果的分析。通過免疫熒光和Western-blot技術(shù)檢測兩組腸肌間神經(jīng)叢(myenteric plexus，MP)中PGP9.5、膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(cholineacetyltransferase，ChaT)和nNOS

5、表達的變化。
　　 結(jié)果:
　　 HS組小腸推進率明顯低于對照組(p＜0.05)。與對照組相比，空腸平滑肌自發(fā)收縮的振幅在HS組顯著降低(p＜0.05)，自發(fā)收縮的頻率在兩組之間卻沒有顯著地差異(p＞0.05)。離體空腸對ACh、KCl、TTX、L-NNA的收縮反應，與對照組相比，HS組均顯著降低(p＜0.05)。然而，加入AG后，在兩組之間均未觀察到自發(fā)收縮振幅有顯著變化(p＞0.05)。與對照組相比，HS組MP中PG

6、P9.5的免疫陽性面積和累積光密度(Integrated optical density，IOD)均顯著降低(p＜0.05)。與對照組相比，HS組MP中CHaT的免疫陽性面積、IOD、CHaT的免疫陽性神經(jīng)元數(shù)/神經(jīng)節(jié)和CHaT蛋白的表達在HS組大鼠中均顯著降低(p＜0.05)。與對照組相比，HS組MP中nNOS的免疫陽性面積、IOD、nNOS的免疫陽性神經(jīng)元數(shù)/神經(jīng)節(jié)和nNOS蛋白的表達在HS組大鼠中均顯著降低(p＜0.05)。