14例結(jié)直腸癌患者腸道粘膜微生態(tài)多樣性研究.pdf

1、目的：觀察結(jié)直腸癌患者腫瘤組織和癌旁組織之間腸道微生態(tài)構(gòu)成及多樣性。
　　 方法：選取14名接受手術(shù)治療的結(jié)直腸腫瘤患者，取腫瘤組織（粘膜面14份，漿膜面14份）、14份相對(duì)應(yīng)粘膜癌旁組織（距腫瘤4～7cm），應(yīng)用QIAamp DNA Mini Kit從腫瘤組織（漿膜、粘膜）及癌旁組織內(nèi)提取細(xì)菌DNA，PCR法擴(kuò)增細(xì)菌16 s DNA V3～V5區(qū)序列，行瓊脂凝膠電泳檢測(cè)目的基因。然后采用454測(cè)序方法，對(duì)結(jié)直腸腫瘤組織及癌旁組

2、織進(jìn)行測(cè)序，觀察兩者腸道細(xì)菌的組成。
　　 結(jié)果：
　　 1.腸道粘膜面腫瘤組織與癌旁組織可見(jiàn)細(xì)菌基因擴(kuò)增，而漿膜面腫瘤組織未見(jiàn)細(xì)菌基因擴(kuò)增。
　　 2.454測(cè)序結(jié)果:Shanonn指數(shù)在兩組樣品中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)，腫瘤組織與癌旁組織OTU數(shù)目分別為4156±471和4612±931，Chao(1)指數(shù)分別為846±231和906±286，兩者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05);在門(mén)水平，兩組

3、樣本菌落組成是相似的;在屬水平，大部分菌屬是沒(méi)有差異性的，腫瘤組織中，蒼白桿菌屬、梭菌屬、芽孢桿菌屬內(nèi)所占比例分別為0.0465±0.011，0.0712±0.012，0.308±0.076，高于癌旁組織中所占比例0.0367±0.006，0.0605±0.009，0.230±0.065，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.806，p=0.015; t=2.775，p=0.016; t=2.536，p=0.024);腫瘤組織中考拉桿菌屬、甲基桿菌

4、屬及脫硫桿菌屬所占比例為分別為0.078±0.007，0.0168±0.009，0.0985±0.041，低于癌旁組織中所占比例0.917±0.022，0.0262±0.007，0.134±0.039，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=2.178,p=0.048; t=3.517,p=0.004; t=2.314,p=0.038)。
　　 結(jié)論:
　　 1.對(duì)于結(jié)直腸腫瘤T分期為T(mén)4a或T4b的患者，漿膜面腫瘤組織未見(jiàn)細(xì)菌存在。