HLA-DQA1基因多態(tài)性與兒童支氣管哮喘的相關(guān)性及血清IL-4、IFN-γ水平關(guān)系的研究.pdf

1、 目的：探討人類白細胞抗原HLA-DQA1基因多態(tài)性與兒童支氣管哮喘的關(guān)聯(lián)性,尋找與哮喘發(fā)作有關(guān)的易感基因和(或)抑制基因；觀察哮喘組的血清 IL-4、IFN-γ 水平；比較含有及不含有哮喘相關(guān)基因的哮喘患者血清中IL-4、IFN-γ 的濃度,分析是否有差異,為進一步研究哮喘發(fā)病機制、預(yù)防哮喘發(fā)作及尋找基因水平上治療哮喘的方法提供相應(yīng)的理論依據(jù)。方法：1.標本采集：哮喘組：選取急性發(fā)作期哮喘患兒共45例為哮喘組。對照組：收集與哮喘組年

2、齡相仿的正常健康兒童60例為對照組。2.檢測方法及指標：采用聚合酶鏈反應(yīng)—序列特異性引物(PCR-SSP)方法測定哮喘組、對照組的HLA-DQAl等位基因,并計算兩組中各等位基因的基因頻率(直接計算法：基因頻率=陽性基因數(shù)/樣本數(shù)×2),兩組間進行比較；采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定哮喘組、對照組中血清IL-4、IFN-γ水平濃度,并對結(jié)果進行統(tǒng)計學處理。3.統(tǒng)計學處理：運用SPPS-17.0軟件系統(tǒng)分析,哮喘組與對照組

3、各等位基因的基因頻率比較采用 χ2檢驗,P<0.05 認為有統(tǒng)計學意義,并計算優(yōu)勢比(OR)及95%置信區(qū)間。測定的血清IL-4、IFN-γ水平濃度,經(jīng)SPPS-17.0軟件系統(tǒng)分析后結(jié)果用均數(shù)±標準差( ±s)表示,兩兩比較采用LSD-t檢驗,相關(guān)分析采用Pearson相關(guān)性分析,P<0.05認為有統(tǒng)計學意義。結(jié)果：(1)哮喘組與對照組之間HLA-DQA1等位基因頻率比較：HLA-DQA1*0301 在哮喘組的基因頻率(20.00%)

4、明顯高于對照組(8.33%),χ2=7.159,P=0.007,有統(tǒng)計學意義,OR為3.333(95%置信區(qū)間為1.35-8.229)。HLA-DQA1*0104在哮喘組的基因頻率(27.77%)明顯低于對照組(38.33%),χ2值為5.234,P=0.022,差異有統(tǒng)計學意義,OR為0.380, 95%置信區(qū)間為(0.164-0.880)。(2)哮喘組和對照組外周血IL-4、INF-γ水平比較：哮喘組中血清 IL-4 水平(116.

5、45 ±20.45)明顯高于對照組(90.34 ±13.43),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；哮喘組血清IFN-γ水平(65.34±12.34)明顯低于對照組(84.23 ±13.42),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；(3)哮喘組IFN-γ與IL-4的相關(guān)性分析：哮喘急性發(fā)作期血清IFN-γ與IL-4水平呈負相關(guān)(r=-0.356,P<0.05)。(4)HLA-DQA1*0301陽性哮喘患者(18例)與HLA-DQA1*0301

6、陰性哮喘患者(27例)IFN-γ(水平分別為67.12 ±13.24、69.13 ±12.16)、IL-4(水平分別為114.23 ±23.45、113.21 ±20.34)比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。結(jié)論：1.HLA-DQA1*0301基因可能為兒童支氣管哮喘的易感基因；HLA-DQA1*0104 基因可能為兒童哮喘的免疫抑制基因。2.哮喘組中IFN-γ較對照組明顯下降,IL-4則明顯升高,哮喘組中兩者呈負相關(guān),表明Th1