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1、目的:肝X受體(Liver X receptor, LXR)激動(dòng)劑GW3965預(yù)處理供體,成功建立大鼠原位肝移植(Orthotopic Liver Transplantation,OLT)模型,觀察激活肝X受體對(duì)大鼠移植肝臟缺血再灌注損傷(Ischemia-Reperfusion injury, IRI)的影響。
方法:48只雄性SD大鼠,體重約200-250 g,被隨機(jī)分為2組,每組12對(duì):(1) GW3965預(yù)處理組,
2、肝移植前30 min由尾靜脈注射肝X受體激動(dòng)劑GW3965(0.3 mg/kg)預(yù)處理供體;(2)對(duì)照組,肝移植前30 min給予相同量的生理鹽水預(yù)處理供體。參照改良的Kamada兩袖套法建立大鼠原位肝移植模型。兩組均于肝移植術(shù)后3小時(shí)、6小時(shí)、24小時(shí)取血清標(biāo)本及肝臟組織標(biāo)本,采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase,ALT)含量,酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme linked imm
3、unosorbent assay,ELISA)檢測(cè)血清中腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量,Western blot測(cè)定肝臟組織中白細(xì)胞介素-I受體相關(guān)激酶4(Interleukin-1 receptor-associatedkinase-4,IRAK-4)、干擾素調(diào)節(jié)因子-3(interferon-regulator3,IRF3)蛋白的表達(dá)情況,凝膠遷移電泳率(Electrophoret
4、ic mobility shift assay,EMSA)測(cè)定NF-κB的相對(duì)活性度,HE染色電子顯微鏡下觀察肝臟組織的形態(tài)學(xué)變化。
結(jié)果:HE染色光鏡下觀察肝組織提示GW3965預(yù)處理組各時(shí)間點(diǎn)肝組織的損傷程度均較對(duì)照組明顯減輕。與對(duì)照組比較,GW3965預(yù)處理組各時(shí)間點(diǎn)受體血清的ALT、TNF-α含量均顯著降低(P<0.05),肝臟組織中IRAK-4、IRF3蛋白的表達(dá)量以及NF-κB相對(duì)活性度也明顯低于對(duì)照組(P<0
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