版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、目的:探討S100A13在人骨肉瘤細胞生長侵襲中的作用及機制。
方法:1.隨機選取骨肉瘤患者18例和正常骨組織18例,應(yīng)用實時熒光定量PCR(qPCR)方法檢測骨肉瘤組織和正常骨組織中S100A13 mRNA的表達情況;Western blot檢測骨肉瘤組織和正常骨組織中S100A13蛋白的表達情況;分析S100A13表達量和骨肉瘤患者臨床分期、預(yù)后的關(guān)系。
2.Western blot檢測多種骨肉瘤細胞系和人正常成
2、骨細胞系中S100A13蛋白的表達情況,選取表達最高細胞系進行后續(xù)的實驗;構(gòu)建siRNA慢病毒干擾S100A13基因的表達,檢測慢病毒轉(zhuǎn)染效率及干擾效果;生長曲線實驗及MTT實驗檢測干擾S100A13對骨肉瘤細胞系生長及增殖的影響;劃痕實驗、基質(zhì)膠侵襲實驗檢測干擾S100A13對骨肉瘤細胞系細胞遷移、侵襲能力的影響;活體成像系統(tǒng)連續(xù)觀察干擾S100A13對骨肉瘤細胞系裸鼠成瘤情況的影響。
3.Western-blot及ELIS
3、A檢測干擾S100A13后骨肉瘤細胞系合成分泌FGF-1的情況;Western-blot檢測干擾S100A13后對MAPK信號通路激活的影響。
結(jié)果:1.骨肉瘤組織中S100A13 mRNA和蛋白的表達較正常骨組織中的表達明顯增高;EnnekingⅡ期患者中S100A13 mRNA的表達量較EnnekingⅠ期患者明顯增高;低表達S100A13的骨肉瘤患者比高表達S100A13的患者具有更長的無病存活期和總存活期。
4、2.S100A13蛋白在骨肉瘤細胞系MG-63、U2-OS、HOS、Saos-2中表達均很強,尤其是在U2-OS細胞系表達最強;而在人正常成骨細胞系中S100A13表達很弱;使用慢病毒感染U2-OS細胞效率高,2條序列的干擾效果都很好;生長曲線、實驗MTT實驗均表明干擾S100A13的表達后,可以抑制U2-OS細胞的生長增殖;劃痕實驗、基質(zhì)膠侵襲實驗表明,干擾S100A13表達組較對照組U2-OS細胞的遷移侵襲能力明顯減弱;裸鼠成瘤結(jié)果
5、顯示比較對照組,干擾組腫瘤生長受到明顯抑制。
3.Western-blot及ELISA檢測結(jié)果顯示干擾S100A13蛋白后,U2-OS合成分泌的FGF-1減少;干擾S100A13蛋白表達可以明顯抑制FGF受體的激活,使得磷酸化的成纖維細胞生長因子受體的表達大幅降低,F(xiàn)RS2-raf-MEK-ERK通路中FRS2/P-FRS2、P-c-raf、MEK1/2/P-MEK1/2、Erk1/2/P-Erk1/2蛋白的總蛋白量未發(fā)生顯著
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 腫瘤相關(guān)巨噬細胞在骨肉瘤生長及侵襲中的作用.pdf
- TIM-3在骨肉瘤侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及機制研究.pdf
- ERK5在骨肉瘤細胞侵襲及遷移中的作用研究.pdf
- Hippo信號通路作用分子TAZ在人骨肉瘤及骨肉瘤干細胞中的表達.pdf
- UHRF1在骨肉瘤細胞侵襲過程中的作用及其機制研究.pdf
- KLF8在調(diào)控人骨肉瘤細胞增殖和細胞侵襲中的作用.pdf
- miR-143在骨肉瘤細胞中的作用及機制研究.pdf
- CD147在人骨肉瘤細胞中的表達及其反義RNA對骨肉瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的影響.pdf
- MicroRNAs在骨肉瘤耐藥中的作用及分子機制.pdf
- microRNA-194在骨肉瘤中作用及機制的研究.pdf
- 人骨肉瘤細胞中S100A6蛋白的表達及其意義.pdf
- 蛋白激酶c在人骨肉瘤細胞多藥耐藥中的作用及機制
- Survivin在骨肉瘤細胞中的表達及Survivin反義寡核苷酸(ASODN)對骨肉瘤MG 63細胞增殖、凋亡和侵襲的作用.pdf
- 胰島素樣生長因子在骨肉瘤中的作用機制研究.pdf
- lncRNA ANRIL在骨肉瘤組織中的表達及其對骨肉瘤細胞增殖凋亡和侵襲遷移的影響.pdf
- WNT6在骨肉瘤組織中的表達及臨床意義及其對骨肉瘤細胞增殖侵襲的影響.pdf
- DATS和辛伐他汀對骨肉瘤細胞的作用及機制研究.pdf
- 沉默ZFX對人骨肉瘤細胞侵襲及遷移能力的影響.pdf
- microRNA-21在骨肉瘤細胞MG63中作用機制的研究.pdf
- Sirt1在骨肉瘤轉(zhuǎn)移中的作用及可能機制研究.pdf
評論
0/150
提交評論