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1、目的:探討鐵牛七及其復(fù)方酊劑對(duì)兔膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎細(xì)胞因子TNF-α含量的影響。
方法:隨機(jī)將60只成年家兔(雌雄各半)分為五組,即空白對(duì)照組、生理鹽水組、復(fù)方鐵牛七酊劑組、鐵牛七酊劑組、消腫止痛酊劑組。除空白組外,其余各組均復(fù)制KOA模型。參照日本鬼頭康彥的造模方法,將含5%木瓜蛋白酶化合物的生理鹽水0.5ml注入兔膝關(guān)節(jié)腔內(nèi),每隔3天注射1次(即第1d、4d、7d),連續(xù)3次。兩周后檢驗(yàn)造模是否成功。造模成功后開(kāi)始涂藥,1日
2、2次,連續(xù)用藥14天。實(shí)驗(yàn)完成后,在兔膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注入0.5ml生理鹽水,活動(dòng)兔膝關(guān)節(jié)10秒鐘后,抽取關(guān)節(jié)液0.5ml并離心,于-20℃冰箱中保存,待測(cè)。TNF-α的含量用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)。關(guān)節(jié)液抽取完畢后用空氣栓塞法將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物全部處死,打開(kāi)膝關(guān)節(jié),觀察關(guān)節(jié)形態(tài)改變;切取滑膜組織,置于10%的甲醛溶液中固定,脫水后石蠟包埋、切片,HE染色,光學(xué)顯微鏡觀察。
結(jié)果:造模后,觀察可見(jiàn)造模動(dòng)物的活動(dòng)明顯減少,
3、膝關(guān)節(jié)腫大,屈伸受限,肢體跛行,說(shuō)明造模成功。連續(xù)擦藥14天后檢測(cè)關(guān)節(jié)液,鐵牛七及復(fù)方酊劑組中兔膝關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)液中TNF-α的含量低于其它對(duì)照組,各組間比較,P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)完畢后用空氣栓塞法將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死,打開(kāi)膝關(guān)節(jié),見(jiàn)B、C、D、E組關(guān)節(jié)增粗,關(guān)節(jié)滑膜增生,關(guān)節(jié)軟骨變薄,關(guān)節(jié)面粗糙,脛骨平臺(tái)內(nèi)外側(cè)偶見(jiàn)骨贅形成,以 B組增生明顯,而C、D組與B組比較骨質(zhì)增生個(gè)體少;光學(xué)顯微鏡下,C組及D組的滑膜細(xì)胞增生及炎癥反應(yīng)均較B組有
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