糖皮質(zhì)激素受體功能對ADHD大鼠多巴胺能神經(jīng)遞質(zhì)的影響.pdf

1、目的：
　　以SHR幼鼠構(gòu)建注意缺陷多動障礙（ADHD）大鼠模型。通過研究糖皮質(zhì)激素受體激動劑地塞米松（dexamethasone，DEX）和抑制劑RU486對注意缺陷多動障礙大鼠模型行為學(xué)改變、不同腦區(qū)多巴胺能神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺（dopamine,DA）、去甲腎上腺素（noradrenaline，NE）水平變化和多巴胺受體轉(zhuǎn)運體（dopamine transporter，DAT）表達(dá)的影響，探討糖皮質(zhì)激素受體（glucocortic

2、oid receptor，GR)功能對ADHD影響的可能機(jī)制。
　　方法：
　?。?）動物分組及藥物干預(yù)：選取3周齡（P21）雄性SHR及WKY大鼠各30只，各自隨機(jī)分成3組，即GR激動劑（DEX組）、GR抑制劑（RU486組）、對照組(CON組），每組各10只。GR激動劑組、GR抑制劑及對照組大鼠分別給予DEX0.5mg/kg.d、RU68654mg/kg.d、生理鹽水0.5ml/kg.d，腹腔內(nèi)注射，每日一次，于晨間8:

3、00給藥，連續(xù)用藥14d。
　?。?）行為測評：在藥物干預(yù)前后采用開場實驗、Y迷宮評價大鼠自主活動性和注意力。
　?。?）腦內(nèi)多巴胺、去甲腎上腺素濃度測定：藥物干預(yù)前后用微透析儀采集不同腦區(qū)（前額葉區(qū)、紋狀體區(qū)）細(xì)胞外液，用高效液相色譜儀檢測多巴胺、去甲腎上腺素濃度。
　?。?）腦內(nèi)多巴胺轉(zhuǎn)運體（DAT）表達(dá)：應(yīng)用免疫組織化學(xué)測量大鼠不同腦區(qū)（前額葉區(qū)、紋狀體區(qū)）多巴胺轉(zhuǎn)運體（DAT）表達(dá)情況。
　　結(jié)果：

4、>　?。?）開場實驗：
　?、?SHR藥物干預(yù)后，DEX組穿越格子數(shù)（47.40±14.40個）和直立次數(shù)（12.70±8.32次）較干預(yù)前（74.00±21.63個，41.00±11.80次）均明顯減少（t=2.74，P=0.02；t=6.35，P<0.001）。RU486組、CON組藥物干預(yù)前后差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　②WKY大鼠藥物干預(yù)后，穿越格子數(shù)DEX組（22.10±2.20個）、RU486組（21

5、.70±2.87個）、CON組（23.10±2.13個）較干預(yù)前（DEX組（13.30±1.34個）；RU486組（12.30±2.16個）；CON組（12.40±2.40個）顯著增高（DEX組t=14.40，P<0.001；RU486組t=6.75，P<0.001；CON組t=9.26，P<0.001），藥物干預(yù)后DEX組、RU486組、CON組3組之間穿越格子數(shù)差別無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。直立次數(shù)干預(yù)后與干預(yù)前比較差異無統(tǒng)計學(xué)

6、差異（P>0.05）。
　　③藥物干預(yù)前，SHR穿越格子數(shù)和直立次數(shù)較 WKY大鼠均有顯著增高（SHR和WKY大鼠比較結(jié)果，穿越格子數(shù)DEX組t=8.97，P<0.001；RU486組t=13.49，P<0.001；CON組t=22.30，P<0.001；直立次數(shù)DEX組t=10.189，P<0.001；RU486組 t=9.98，P<0.001；CON組 t=7.710，P<0.001）。
　　④藥物干預(yù)后SHR穿越格子數(shù)

7、和直立次數(shù)較 WKY大鼠顯著增高（SHR和WKY大鼠比較結(jié)果，穿越格子數(shù)DEX組t=5.52，P<0.001、RU486組t=6.81，P<0.001、CON組t=20.59，P<0.001；直立次數(shù) DEX組 t=3.97，P=0.001、RU486組t=9.80，P<0.001、CON組t=8.17，P<0.001）。
　?。?）Y迷宮檢測：藥物干預(yù)后，SHR及WKY大鼠DEX組正確反應(yīng)率（34.09±2.25％；27.70±

8、1.34%）與干預(yù)前（29.60±1.15%；20.00±0.67%）比較顯著升高（SHR t=4.37，P=0.002；WKY t=16.29，P<0.001），而RU486組、CON組藥物干預(yù)前后差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　（3）腦內(nèi)DA、NE水平：
　　①SHR前額葉區(qū)DA、NE水平與干預(yù)前比較，DEX干預(yù)后額葉區(qū)DA含量（7.45±1.43mg/L）較干預(yù)前（3.08±0.84mg/L）顯著增高（t=1

9、0.68，P<0.001）；RU486干預(yù)后（1.17±0.07mg/L）較干預(yù)前（2.20±0.31mg/L）則明顯降低（t=2.48，P=0.035）；而CON組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。NE含量各組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　?、赟HR紋狀體區(qū)DA、NE水平與干預(yù)前比較，DA含量DEX干預(yù)后（7.56±0.95mg/L）較干預(yù)前（6.40±0.83mg/L）顯著升高（t=4.81，P=0.002），RU48

10、6組干預(yù)后（2.66+0.18mg/L）較干預(yù)前（7.52±1.52mg/L）顯著降低（t=14.06，P<0.001），CON組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；NE含量DEX組干預(yù)后（5.92±0.51mg/L）較干預(yù)前（4.53±0.04mg/L）顯著升高（t=4.01，P=0.003），RU486組干預(yù)后（4.71±0.12mg/L）較干預(yù)前（4.80±0.17mg/L）顯著降低（t=8.70，P<0.001），CON組差異無統(tǒng)

11、計學(xué)意義（P>0.05）。
　?、踂KY大鼠前額葉區(qū)，各組藥物干預(yù)前后DA含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），NE含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　?、躓KY紋狀體區(qū)藥物干預(yù)后，DA含量DEX組干預(yù)后（16.34±0.32mg/L）較干預(yù)前（11.71±1.453mg/L）顯著升高(t=15.14，P<0.001)，RU486組干預(yù)后（7.28±0.24mg/L）較干預(yù)前（10.40±0.34mg/L）顯著降低（t

12、=10.58，P<0.001)，CON差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。NE含量DEX組、RU486組、CON組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　（3）免疫組織化學(xué)染色。
　　結(jié)果：
　?、賁HR前額葉區(qū)DEX組DAT表達(dá)（分光光密度值10.56±4.08）較RU486（18.51±2.56）及CON組（17.61±2.19）顯著減少（F=25.95，P<0.001；DEX組與RU486及CON組比較，P<0.0

13、01）。SHR紋狀體區(qū) DEX組DAT表達(dá)（27.38±1.15）較 RU486組（38.51±2.57）和CON組（35.84±3.79)明顯減少(F=35.37，P<0.001，DEX與RU486及CON組比較，P<0.001）。
　?、赪KY組前額葉區(qū)各組 DAT表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義（F=0.35，P=0.708）。WKY紋狀體區(qū)DEX組、RU486組、CON組DAT表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05)。
　?、矍邦~葉

14、區(qū)SHR各組DAT表達(dá)水平明顯高于WKY組（DEX組t=2.79，P=0.012；RU486組t=8.70，P<0.001，CON組t=10.19，P<0.001）。紋狀體區(qū)SHR DAT表達(dá)高于WKY組（DEX組t=9.60，P<0.001，RU486組t=13.76，P<0.001,CON組t=19.36，P<0.001）。
　　結(jié)論：
　　GR激動劑可通過調(diào)節(jié)糖皮質(zhì)激素受體功能，調(diào)節(jié)前額葉及紋狀體區(qū)DAT表達(dá)水平，提高