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1、目的測(cè)定CREB在不同類型兒童急性白血病中的表達(dá),探討其在兒童急性白血病中的作用。 方法(1)用實(shí)時(shí)定量RT-PCR法檢測(cè)了10例非白血病(包括感染性疾病和特發(fā)性血小板減少性紫癜)患兒,11例低危型(LR)、11例中危型(MR)、20例高危型(HR)急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)患兒以及11例低危型、10例高危型急性髓細(xì)胞白血病(AML)患兒骨髓單個(gè)核細(xì)胞內(nèi)CREB的mRNA的表達(dá)。(2)用ELISA法測(cè)定15例LR-ALL及MR
2、-ALL、15例HR-ALL、10例LR-AML、8例HR-AML患兒骨髓單個(gè)核細(xì)胞內(nèi)CREB總蛋白的表達(dá)量。(3)用ELISA法測(cè)定15例LR-ALL及MR-ALL、15例HR-ALL、10例LR-AML、8例HR-AML患兒骨髓單個(gè)核細(xì)胞內(nèi)CREB蛋白磷酸化的量。(4)白血病患兒中MICM分型與CREB的mRNA高表達(dá)的比較。(5)對(duì)12例白血病患兒用實(shí)時(shí)定量RT-PCR法CREBmRNA進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察。 結(jié)果(1)非白血病患
3、兒組骨髓單個(gè)核細(xì)胞內(nèi)CREB的mRNA的表達(dá)量為1.13±0.81,在ALL患兒中,LR-ALL組、MR-ALL組、HR-ALL組患兒骨髓單個(gè)核細(xì)胞內(nèi)CREB的mRNA的表達(dá)量分別為1.47±1.02,1.244±0.60,8.494±12.24,HR-ALL組患兒明顯高于非白血病患兒組,LR-ALL組及MR-ALL組,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P值分別為0.017,0.040,0.032。LR-ALL、MR-ALL組與HR-ALL組患兒骨髓單
4、個(gè)核細(xì)胞內(nèi)CREB總蛋白的量(n/106cell)分別為0.99±0.43、4.40±4.60,HR-ALL組患兒明顯高于LR-ALL、MR-ALL組,P=0.023。LR-ALL、MR-ALL組與HR-ALL組患兒骨髓單個(gè)核細(xì)胞內(nèi)CREB蛋白磷酸化的量(U/10%e11)分別為1.954±1.82、8.674±8.19,HR-ALL組明顯高于LR-ALL、MR-ALL組,P=0.018。(2)在AML病人中,HR-AML、LR-ALL
5、組患兒骨髓單個(gè)核細(xì)胞內(nèi)CREB的mRNA的表達(dá)量分別為11.884±19.64,1.23士1.14,HR-AML組明顯高于非白血病組和LR-ALL組,有顯著差別,P值分別為0.009和0.016,而LR-ALL組患兒與非白血病患兒組間無(wú)明顯差異。LR-AML組與HR-AML組患兒骨髓單個(gè)核細(xì)胞內(nèi)CREB總蛋白的量(n/106cell)分別為1.06±1.14、9.97±13.84,HR-AML組患兒明顯高于LR-AML組,P=0.008
6、。LR-AML組與HR-AML組患兒骨髓有核細(xì)胞內(nèi)CREB蛋白磷酸化的量(U/106cell)分別為1.36±1.85、19.764±29.11,HR-AML組明顯高于LR-AML組,P=0.004。(3)在兒童急性白血病中CREB的mRNA的表達(dá)量、總蛋白的量、蛋白磷酸化的量間兩兩存在正相關(guān)關(guān)系。(4)MICM分型在高危型白血病中診斷的符合率為56.67%,CREB高表達(dá)在高危白血病中占60.00%,而兩者相結(jié)合診斷符合率可達(dá)86.6
7、7%。(5)白血病中CREB表達(dá)量的升高提示疾病的未緩解或復(fù)發(fā)。 結(jié)論(DCREB在兒童高危型ALL和高危型AML中呈高表達(dá)。(2)在兒童急性白血病中CREB的mRNA的表達(dá)量、總蛋白的量、蛋白磷酸化的量間存在正相關(guān)關(guān)系。(3)CREB的表達(dá)與MICM分型從不同的水平判斷急性白血病患兒的預(yù)后,可作為MICM分型的補(bǔ)充,并進(jìn)一步完善MICM分型。(4)實(shí)時(shí)定量RT-PCR對(duì)CREB的mRNA表達(dá)量的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)可作為白血病療效判斷指標(biāo)
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