米諾環(huán)素對(duì)腦缺血再灌注大鼠腦保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究米諾環(huán)素(Minocycline，MC)對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷后谷氨酸水平及代謝型谷氨酸受體1(mGluRl)表達(dá)的影響，探討米諾環(huán)素的腦缺血保護(hù)作用及可能機(jī)制。
　　方法：1.建立大鼠右側(cè)大腦中動(dòng)脈阻斷(middle cerebral arteryocculusion，MCAO)局灶性腦缺血再灌注模型。2.健康雄性SD大鼠(250g±30g)隨機(jī)分成假手術(shù)組、缺血再灌注組、MC低劑量干預(yù)組、MC高劑量干預(yù)組，每組

2、42只。每組內(nèi)隨機(jī)將6只用于HE染色，6只用于腦梗死面積測(cè)定。每組剩余30只大鼠按再灌注不同時(shí)點(diǎn)(2h、6h、12h、24h和48h)隨機(jī)分為5個(gè)亞組(每組n=6)，用于神經(jīng)功能缺損評(píng)分及指標(biāo)檢測(cè)。3.造模后采用NSS評(píng)分法行神經(jīng)功能評(píng)分；采用TTC法測(cè)腦梗死面積；HE染色觀察腦組織形態(tài)病理學(xué)變化；高效液相色譜法測(cè)缺血半暗帶谷氨酸濃度；反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)半定量檢測(cè)mGluRl-mRNA的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：1.

3、神經(jīng)功能評(píng)分：造模術(shù)后，缺血再灌注組及MC干預(yù)組均出現(xiàn)一定程度神經(jīng)功能障礙，與缺血再灌注組相比，MC干預(yù)組神經(jīng)功能評(píng)分降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2.腦梗死面積測(cè)定：與缺血再灌注組相比，MC治療組腦梗死面積減少；差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。3.HE染色假手術(shù)組神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)正常，胞膜胞核清晰，核仁明顯；各時(shí)間段均無(wú)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，也無(wú)梗死灶出現(xiàn)。缺血再灌注組腦組織梗塞灶位于右側(cè)額頂葉皮質(zhì)和紋狀體區(qū)，呈片狀分布。缺血再灌注組

4、缺血半暗帶腦組織結(jié)構(gòu)疏松淡染，水腫有空腔形成，神經(jīng)元胞核碎裂溶解或消失，神經(jīng)元正常結(jié)構(gòu)消失，排列紊亂，數(shù)目減少。與缺血再灌注組比較，MC干預(yù)組在再灌注各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的梗塞灶均減小，神經(jīng)組織較致密，結(jié)構(gòu)完整的神經(jīng)元明顯增多，與凋亡細(xì)胞交錯(cuò)存在。4.谷氨酸水平測(cè)定：缺血2小時(shí)再灌注2小時(shí)后腦組織谷氨酸水平開(kāi)始進(jìn)行性升高，于再灌注后24小時(shí)達(dá)到最高點(diǎn)，MC干預(yù)組谷氨酸水平在不同時(shí)間點(diǎn)均較同一時(shí)間點(diǎn)缺血再灌注組降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)

5、。5.RT-PCR：假手術(shù)組mGluRl-mRNA呈低水平表達(dá)；缺血再灌注組表達(dá)增加(P<0.05)；與缺血再灌注組比較，MC干預(yù)組mGluRl-mRNA的表達(dá)降低，但高于假手術(shù)組(P<0.05)。
　　結(jié)論：1.米諾環(huán)素可降低缺血再灌注大鼠的神經(jīng)功能評(píng)分，縮小缺血再灌注大鼠的腦梗死面積，有神經(jīng)保護(hù)作用。2.谷氨酸最高峰為再灌注24h，在腦缺血早期即參與神經(jīng)元損傷作用；米諾環(huán)素可以降低谷氨酸水平，減少mGluRl-mRNA表達(dá)。這