絞股藍(lán)總皂苷對(duì)腦缺血再灌注大鼠腦保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的：觀察絞股藍(lán)總皂苷(Gypenoside，GP)對(duì)血管性癡呆大鼠海馬神經(jīng)元型一氧化氮合酶(neuronalnitricoxidesynthase，nNOS)及核酸的保護(hù)作用。 觀察GP對(duì)全腦缺血再灌注大鼠海馬結(jié)構(gòu)、大腦皮層和紋狀體韻保護(hù)以及海馬結(jié)構(gòu)、大腦皮質(zhì)的即早基因c-jun、c-fos表達(dá)的抑制作用。 方法：采用改良的Pulsinelli4-血管阻斷(4-VO)方法建立大鼠血管性癡呆模型，用免疫組化法研究GP對(duì)大

2、鼠海馬nNOS的表達(dá)的影響，并用吖啶橙染色法進(jìn)行GP對(duì)血管性癡呆大鼠海馬的DNA和RNA保護(hù)作用的研究。 采用4-血管阻斷(4-VO)方法建立大鼠急性全腦缺血再灌注模型，用吖啶橙染色法觀察GP對(duì)不同腦區(qū)DNA和RNA含量變化的影響；用ABC免疫組化方法觀察兩種劑量的GP對(duì)不同時(shí)點(diǎn)、不同腦區(qū)JUN、FOS蛋白表達(dá)的影響。 結(jié)果：與對(duì)照組比較，血管性癡呆大鼠海馬CA1區(qū)和CA3區(qū)NOS陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)目明顯減少；而DNA和RNA

3、吖啶橙染色后的熒光強(qiáng)度(反映DNA和RNA含量)明顯減弱，GP給藥組海馬各亞區(qū)的NOS陽(yáng)性神經(jīng)元神經(jīng)細(xì)胞數(shù)比VD模型組的明顯增多。DNA和RNA吖啶橙染色后的熒光強(qiáng)度強(qiáng)于血管性癡呆模型組，與對(duì)照組相似。 與對(duì)照組比較，全腦缺血再灌注大鼠各腦區(qū)DNA和RNA吖啶橙染色后的熒光強(qiáng)度(反映DNA和RNA含量)明顯減弱；GP給藥組各腦區(qū)DNA和RNA吖啶橙染色后的熒光強(qiáng)度強(qiáng)于全腦缺血再灌注模型組，與對(duì)照組相似。 與對(duì)照組比較，模

4、型組JUN、FOS蛋白表達(dá)最高。各組相同腦區(qū)的JUN、FOS蛋白表達(dá)隨著缺血再灌注時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸減少(再灌注6h＞再灌注24h＞再灌注72h)。再灌注6h各實(shí)驗(yàn)組的JUN、FOS蛋白表達(dá)結(jié)果是：模型組＞GP低劑量給藥組＞GP高劑量給藥組。 結(jié)論：GP可明顯增強(qiáng)血管性癡呆大鼠海馬NOS陽(yáng)性神經(jīng)元的表達(dá)，使得NOS神經(jīng)元形態(tài)接近正常、數(shù)目增多；DNA、RNA熒光反應(yīng)強(qiáng)度恢復(fù)，接近正常，對(duì)DNA和RNA有保護(hù)作用。 GP可明顯

5、減輕缺血再灌注對(duì)大鼠海馬、大腦皮層、紋狀體及齒狀回DNA和RNA損傷。 GP可明顯減少缺血再灌注大鼠海馬結(jié)構(gòu)、大腦皮層的JUN蛋白和FOS蛋白表達(dá)。 缺血再灌注6h、24h、72h的各實(shí)驗(yàn)組的大鼠各腦區(qū)的JUN、FOS蛋白表達(dá)，呈現(xiàn)逐漸減低趨勢(shì)(再灌注6h＞再灌注24h＞再灌注72h)。 GP對(duì)急性全腦缺血模型大鼠的腦損傷的預(yù)防保護(hù)有一定的劑量相關(guān)趨勢(shì)，GP高劑量給藥組保護(hù)效果好于GP低劑量給藥組，尤其是對(duì)再灌注