干眼患者結(jié)膜IL-1β的表達(dá)和意義.pdf

1、研究背景：干眼作為最常見的眼表疾病之一，病因復(fù)雜而多樣，其臨床表現(xiàn)主要有眼紅、眼疲勞、眼困、異物感、眼干澀、畏光、流淚等。隨著社會進(jìn)步和經(jīng)濟的發(fā)展，環(huán)境污染的加重，干眼的發(fā)病率明顯增高，在我國尤其如此。目前認(rèn)為年齡、自身免疫性疾病、環(huán)境污染、空氣干燥和蒸發(fā)、空調(diào)和電腦的普及、眼部手術(shù)、激素缺乏、酒糟鼻、病毒損害、接觸鏡的佩戴、瞼板腺功能障礙等共同構(gòu)成了干眼的復(fù)雜原因。盡管干眼發(fā)病率很高，其發(fā)病機制卻不很明確。近年來免疫學(xué)和分子生物學(xué)的研

2、究進(jìn)展使我們對干眼的發(fā)病機制有了新的認(rèn)識，細(xì)胞因子作為一類由免疫細(xì)胞產(chǎn)生的高活性蛋白質(zhì)多肽分子，參與了免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)，在干眼的發(fā)病機制中起到了十分重要的作用。研究發(fā)現(xiàn)，眼表面的免疫反應(yīng)和炎癥是影響干眼病情的一個非常重要的因素，SS和KCS患者的結(jié)膜、淚腺活檢標(biāo)本內(nèi)和淚液中均發(fā)現(xiàn)炎癥細(xì)胞浸潤及炎癥反應(yīng)標(biāo)記物表達(dá)，尤其是發(fā)現(xiàn)白介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、細(xì)胞間粘附因子(ICAM-1)等含量和表達(dá)增加，并和干眼的損害

3、程度成正相關(guān)。也有報道細(xì)胞因子IL-1β作為一種重要的炎性因子在動物干眼癥模型、干眼病人淚液中的表達(dá)增加，但在干眼癥患者結(jié)膜的表達(dá)研究則鮮見。因而本實驗采用Real-timePCR的方法定量檢測干眼癥患者結(jié)膜IL-1β的基因含量以觀察IL-1β在干眼中的表達(dá)情況，從而進(jìn)一步明確IL-1β在于眼發(fā)病中的作用。
　　 目的：通過測定干眼患者結(jié)膜細(xì)胞中的IL-1β含量，來探討IL-1β在于眼發(fā)病中的作用。
　　 方法：

4、　　 1.選取病例組30例，對照組15例。所有病例組及對照組均做如下臨床癥狀及體征監(jiān)測：OSDI癥狀評分，BUT，淚液分泌試驗(Schirmer1)，角膜熒光素鈉染色，結(jié)膜麗絲胺綠染色。
　　 2.印記細(xì)胞法收集兩組結(jié)膜細(xì)胞，將纖維素膜浸入RNA裂解液中裂解后，提取RNA，反轉(zhuǎn)錄為cDNA，real-timePCR定量檢測結(jié)膜中IL-1β基因水平表達(dá)。
　　 3.IL-1β在結(jié)膜的含量與臨床癥狀評分等五項指標(biāo)的相關(guān)性分

5、析。
　　 4.采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，計量資料比較用t檢驗，計數(shù)資料用秩和檢驗，指標(biāo)間相關(guān)性分析采用直線相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.病例組的IL-1β相對基因含量為0.645±0.373(2-△△t)，對照組的IL-1β相對基因含量為0.218±0.061(2-△△t)，二者比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，(t=5.479，P=0.000)也就是說病例組的IL-1β相對基因

6、含量高于對照組。
　　 2.病例組IL-1β的基因表達(dá)含量與OSDI評分呈正相關(guān)(r=0.809，P=0.000，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義)；IL-1β基因含量表達(dá)與SchirmerI試驗呈負(fù)相關(guān)（r=-0.434，P=0.034，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義）；IL-1β基因含量表達(dá)與BUT呈負(fù)相關(guān)（r=-0.449，P-0.028，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義）；IL-1β含量表達(dá)與角膜熒光素染色(FLS)呈正相關(guān)（r=0.582，P=0.003，差

7、異具有明顯統(tǒng)計學(xué)意義）：IL-1β基因含量表達(dá)與結(jié)膜麗絲胺綠染色(LGs)呈正相關(guān)（r=0.482，P=0.017，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義）。
　　 結(jié)論：
　　 1.IL-1β在干眼患者結(jié)膜的基因表達(dá)高于對照組，說明IL-1β作為炎性介質(zhì)參與了干眼的發(fā)病。
　　 2.IL-1β與OSDI評分呈正相關(guān)，與SchirmerI試驗和BUT呈負(fù)相關(guān)，說明IL-1β表達(dá)高低與干眼病情嚴(yán)重程度相關(guān)。
　　 3.IL-1