2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、研究背景:在宿主對結(jié)核分枝桿菌(Mtb)感染的免疫機制中,γδT細胞的作用越來越受到關(guān)注和重視。近年研究報道Mtb和卡介苗感染的小鼠模型中分泌IL-17的細胞主要來源于γδT細胞。本研究室近期的研究也發(fā)現(xiàn)活動性肺結(jié)核(TB)患者外周血中產(chǎn)生IL-17的γδT細胞(Tγδ17細胞)的比例明顯高于正常健康人。但Tγδ17細胞是屬于γδT細胞的何種亞群,以及肺TB患者的Tγδ17細胞的亞群類別與健康人有何不同,均尚未見報道。另外,雖然對于誘導(dǎo)

2、Th17細胞分化的關(guān)鍵性細胞因子和轉(zhuǎn)錄因子已經(jīng)明確,但是對于誘導(dǎo)Tγδ17細胞分化的細胞因子,轉(zhuǎn)錄因子和抗原的調(diào)節(jié)作用等影響因素的研究很少,尚有待探討闡明。
  目的:檢測TB患者和健康人(HD)外周血中Tγδ17細胞屬于γδT細胞何種亞群(Vδ1、Vδ2及Vδ3-8亞群)探討肺TB患者的Tγδ17細胞的亞群類別與健康人有何不同,以及結(jié)核桿菌(M.tb)耐熱抗原(Mtb-HAg)、磷酸化抗原(HDMAPP)加入細胞因子誘導(dǎo)Tγδ1

3、7細胞分化有何不同,以探討不同淋巴細胞亞群在抗M.tb感染免疫應(yīng)答和TB發(fā)病機制中的作用。
  方法:1.采集70例活動性肺結(jié)核病人、100例HD和33例矽肺患者外周血,加入熒光標記單抗進行表面分子染色,流式細胞儀檢測γδT細胞亞群(Vδ1、Vδ2及Vδ3-8亞群)的比例變化。2.采集24例活動性肺結(jié)核病人和17例HD外周血,加入佛波醇酯(PMA)和鈣離子霉素(Ionomycin)刺激培養(yǎng)2小時后,再加入莫能霉素(Monensin

4、)繼續(xù)培養(yǎng)4小時,收集細胞,加入熒光標記單抗進行表面分子和胞內(nèi)染色,流式細胞儀檢測產(chǎn)生Tγδ17細胞亞群(Vδ1、Vδ2及Vδ3-8亞群)比例及。3.采用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞(PBMC),加入Mtb-Hag、HDMAPP和細胞因子(IL-1β、IL-23和TGF-β)培養(yǎng)3天后,加入rIL-2刺激培養(yǎng)9天后,使其成為富含效應(yīng)性γδT細胞的細胞群,收集細胞用PMA/Ionomycin和Monensin刺激培養(yǎng)6小時,用流式細

5、胞儀檢測Tγδ17細胞亞群的比例。
  結(jié)果:
  1、TB患者>60歲初治組(n=16)γδT細胞在T細胞中的比例(5.26%)低于正常人>60歲組(n=23)的比例(6.3%),TB患者<60歲復(fù)治組(n=16)γδT細胞在T細胞中的絕對值(74.52%)低于TB患者<60歲初治組<60歲組(n=34)的絕對值(144.69)(絕對值單位為101/μl)。
  2、TB患者<60歲初治組(n=32)復(fù)治組(n=16

6、)的Vδ2+亞群在總γδ T細胞中比例(60.06%和48.82%)明顯低于正常人<60歲組(n=75)的比例(73.68%)(p均<0.01)。TB患者<60歲初治組(n=32)復(fù)治組(n=11)的Vδ1+亞群在總γδT細胞中比例(25.01%和22.61%)明顯高于正常人<60歲組(n=75)的比例(11.82%)(p均<0.05)。TB患者>60歲復(fù)治組(n=14)的Vδ3-8+亞群在總γδ T細胞中比例(33.17%)明顯高于正

7、常人>60歲組(n=21)的比例(14.49%)(p<0.05)。TB患者>60歲初治組(n=14)的Vδ1+亞群在總γδT細胞中的絕對值(3.71)明顯低于TB患者>60歲復(fù)治組(n=10)的絕對值(11.71)。TB患者>60歲初治組(n=14)的Vδ3-8+亞群在總γδT細胞中的絕對值(3.03)明顯低于TB患者<60歲初治組(n=32)的絕對值(14.89)(p均<0.05.單位為101/μl)。
  3、結(jié)核病組Tγδ1

8、7細胞中以Vδ3-8亞群最多,其次為Vδ2亞群,最少為Vδ1亞群。正常組Tγδ17細胞以Vδ3-8亞群最多,其次為Vδ1亞群,最少為Vδ2亞群。其中正常組γδT細胞亞群:Vδ1亞群(n=14)、Vδ2亞群(n=18)和Vδ3-8亞群(n=14)的百分比分別為27.31%、10.52%和63.46%,而結(jié)核病組γδT細胞亞群:Vδ1亞群(n=23)、Vδ2亞群(n=24)和Vδ3-8亞群(n=23)的百分比分別為5.03%、10.52%和

9、75.03%。
  4、從γδT細胞亞群的絕對值上進行比較,正常組中產(chǎn)生Tγδ17細胞的亞群類別中Vδ1亞群與Vδ3-8亞群絕對值相當,而結(jié)核病組產(chǎn)生Tγδ17細胞的亞群類別Vδ3-8亞群絕對值急劇升高。其中正常組γδT細胞亞群:Vδ1亞群(n=14)、Vδ2亞群(n=18)和Vδ3-8亞群(n=14)的絕對值分別為2.46、0.19和2.78,而結(jié)核病組γδ T細胞亞群:Vδ1亞群(n=23)、Vδ2亞群(n=24)和Vδ3-8

10、亞群(n=23)的絕對值分別為0.64、0.46和3.7。(單位為101/μl)
  5、Mtb-Ag+CK組與HDMAPP+CK組在Tγδ17的比例比較中有明顯差異,前一組明顯比后組升高。Mtb-Ag+CK組與HDMAPP+CK組中Vδ2在Tγδ17所占比例比較中,前者較后者明顯降低。
  結(jié)論:
  1、在正常人中γδT細胞主要以Vδ2+亞群為主,而在初治結(jié)核病、復(fù)治結(jié)核病以及矽肺患者中,Vδ2+亞群比例降低,而V

11、δ1+亞群比例增高或Vδ3-8+亞群比例增高。
  2、TB患者<60歲初治組復(fù)治組的Vδ2+亞群在總γδT細胞中比例明顯低于正常人<60歲組的比例。TB患者<60歲初治組復(fù)治組的Vδ1+亞群在總γδ T細胞中比例明顯高于正常人<60歲組的比例。TB患者>60歲復(fù)治組的Vδ3-8+亞群在總γδ T細胞中比例明顯高于正常人>60歲組的比例。
  3、在正常人及TB患者,Tγδ17細胞中均以Vδ3-8亞群最多(60%以上);正常

12、人Tγδ17細胞中Vδ2亞群最少(半數(shù)人群檢測不到),而TB患者中的Tγδ17細胞中Vδ2亞群明顯升高;TB患者的Tγδ17細胞中Vδ1亞群明顯低于正常人。
  4、正常人PBMC,用Mtb-HAg和磷酸抗原(HDMAPP)激活γδT細胞并同時加入含誘導(dǎo)性細胞因子(IL-1β、IL-23和TGF-β)培養(yǎng)(12天)后,均可誘導(dǎo)Tγδ17細胞的分化和增殖。前者誘導(dǎo)產(chǎn)生Tγδ17細胞的數(shù)量明顯多于后者。但在前者誘導(dǎo)的Tγδ17細胞中,

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