黃芪對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬結(jié)核桿菌作用的研究.pdf

1、 目的：探討黃芪對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬結(jié)核桿菌作用的影響。 方法：用羅文斯坦-琴遜培養(yǎng)基和蘇通氏培養(yǎng)基兩種方法培養(yǎng)結(jié)核桿菌；采用RPMI1640、無菌液體石蠟和淀粉肉湯三類物質(zhì)刺激小鼠腹腔，使其發(fā)生炎癥反應(yīng)從而提取巨噬細(xì)胞，并采用臺(tái)盼藍(lán)染色，瑞氏染色法、非特異性酯酶染色法及氟化鈉抑制試驗(yàn)三種方法，以鑒定巨噬細(xì)胞并計(jì)算純度、數(shù)量及其活性，最后選用RPMI1640灌洗腹腔的方法提取巨噬細(xì)胞，在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中選擇黃芪多糖進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，將濃度為0

2、μg/μl(對(duì)照組)及不同濃度的黃芪多糖1.0 ml每天注射小鼠1次，連續(xù)7天。在第7天給小鼠腹腔注射密度為1×1010/L的結(jié)核桿菌500μL，1h后處死小鼠，取腹腔液離心涂片，經(jīng)抗酸染色，油鏡下計(jì)算吞噬率并計(jì)算吞噬指數(shù)；在體外實(shí)驗(yàn)中以濃度為0μg/μl(對(duì)照組)及不同濃度的的黃芪多糖及黃芪甲苷100μl與RPMI-1640灌洗小鼠腹腔獲得的巨噬細(xì)胞及結(jié)核桿菌共同孵育，采用熒光定量PCR法檢測(cè)巨噬細(xì)胞對(duì)結(jié)核桿菌的吞噬能力，并檢測(cè)上清液