3例中國漢族人von Hippel-Lindau病家系調(diào)查并基因檢測.pdf

1、目的： 研究3例以家族性血管網(wǎng)狀細胞瘤為主要表現(xiàn)的中國漢族人vonHippe-lindau(VHL)病大家系的臨床特征，繪制家系圖譜。 通過檢測3個家系共43位志愿者和1例疑似VHL病女患者的VHL基因突變情況，探討中國漢族人VHL病種系突變的特點和VHL基因突變研究在VHL病診斷治療、遺傳生殖學方面的臨床意義。 方法： 調(diào)查3例以家族性血管網(wǎng)狀細胞瘤為主要表現(xiàn)的中國漢族人VHL病大家系，繪制家系圖譜，與

2、同期散發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)血管網(wǎng)狀細胞瘤病例比較，總結(jié)家族性血管網(wǎng)狀細胞瘤臨床特征。 抽取3個家系共43位志愿者和1例因異時性雙側(cè)小腦半球血管網(wǎng)狀細胞瘤行兩次手術(shù)治療的疑似VHL病女患者的外周靜脈血，提取基因組DNA。采用聚合酶鏈反應擴增VHL基因3個外顯子片段，所得片段經(jīng)T-A克隆后直接測序，測序序列與VHL基因3個外顯子正常序列比對，將所發(fā)現(xiàn)的突變位點與人類基因突變數(shù)據(jù)庫(HGMD)核對。對致病基因攜帶者進行全面體檢。

3、結(jié)果： 3個家系共VHL病病人20人，以家族性血管網(wǎng)狀細胞瘤為主要表現(xiàn)(18/20)。18例家族性血管網(wǎng)狀細胞瘤患者平均發(fā)病年齡31歲(16歲-47歲)，出現(xiàn)癥狀到就診的平均時間17.3個月(2個月-30個月)，男性發(fā)病較女性多見(16/4)。共發(fā)現(xiàn)血管網(wǎng)狀細胞瘤31枚，以小腦半球發(fā)病多見(23/31)，囊結(jié)節(jié)型占絕大多數(shù)(30/31)。9例術(shù)后平均6.7年復發(fā)(2年-17年)，死亡率27.8％(5/18)。 家系1共2

4、9人，VHL病患者9位，包括4位患者在內(nèi)的16位家族成員接受基因檢測。結(jié)果4位患者及3位家族成員的VHL基因第716位核苷酸G突變?yōu)镃，導致第168位密碼子由AGC變?yōu)锳CC，編碼氨基酸由絲氨酸變?yōu)樘K氨酸(Ser168Thr)。 家系2共22人，VHL病病人5位，包括4位患者在內(nèi)的13位家族成員接受基因檢測，結(jié)果未發(fā)現(xiàn)VHL基因突變。 家系3共20人，VHL病病人6位，包括1位患者在內(nèi)的14位家族成員接受基因檢測。結(jié)果1

5、位患者及2位家族成員的VHL基因第559位核苷酸C突變?yōu)镚，導致第116位密碼子由CTT變?yōu)镚TT，編碼氨基酸由亮氨酸變?yōu)槔i氨酸(Leu116Val)。 疑似VHL病女患者，VHL基因第697位核苷酸T突變?yōu)镃，導致第162位密碼子由TGC變?yōu)镃GC，編碼氨基酸由半胱氨酸變?yōu)榫彼?Cys162Arg)，第741位核苷酸G突變?yōu)锳，第176位密碼子由AGG變?yōu)锳GA，編碼氨基酸仍為精氨酸(Arg176Arg)。結(jié)論VHL病是一種

6、常染色體顯性遺傳疾病，家族性血管網(wǎng)狀細胞瘤是VHL病最常見的早期病變和死亡原因。家族性病例與散發(fā)性病例比較存在發(fā)病早、多灶發(fā)病、復發(fā)率高、死亡率高，易并發(fā)全身多系統(tǒng)損害、愈后差等特點，故我們建議所有中樞神經(jīng)系統(tǒng)血管網(wǎng)狀細胞瘤患者均應該接受VHL基因檢測，這是早期診斷VHL病、發(fā)現(xiàn)其他系統(tǒng)病變的關(guān)鍵。 本實驗共發(fā)現(xiàn)4個突變位點，1個位于外顯子2，3個位于外顯子3。結(jié)合國內(nèi)相關(guān)報道，我們認為中國漢族人VHL病存在種系突變，但是否存在