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1、目的:以番木瓜和正安野木瓜為原料,篩選分離一種植物源性溶栓活性物質(zhì),對(duì)其進(jìn)行初步研究。 方法:提取兩種木瓜的蛋白粗提物,考馬斯亮藍(lán)G-250染色法測(cè)定樣品蛋白濃度;對(duì)其進(jìn)行鹽析、透析,進(jìn)一步經(jīng)SP-sephadex G-75柱層析純化收集蛋白峰;纖維蛋白平板法篩選溶栓活性成份;SDS-PAGE電泳法檢測(cè)溶栓活性成份純度及測(cè)定其分子量。 結(jié)果:番木瓜蛋白粗提物、鹽析后樣品及進(jìn)一步經(jīng)SP-sephadex G-75柱層析分離
2、得到的4、5、6號(hào)樣品對(duì)纖維蛋白平板都有溶解作用,且溶解作用隨純化程度提高逐漸加強(qiáng);而野木瓜的蛋白粗提物、鹽析后樣品對(duì)纖維蛋白平板都沒(méi)有溶解作用。番木瓜蛋白粗提物經(jīng)SP-sephadex G-75柱層析分離得到的5號(hào)樣品,以尿激酶為標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)定活力單位,其溶栓活性為17.85IU/mg;溶栓成份是通過(guò)直接降解纖維蛋白和激活纖溶酶原兩種方式起作用的;經(jīng)SDS-PAGE電泳得單-蛋白條帶,分子量在26KD左右。 結(jié)論:番木瓜中含有溶栓活
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