脫脂麥胚發(fā)酵工藝及其提取物生物活性研究.pdf

1、小麥?zhǔn)鞘澜缟戏N植最廣泛的糧食作物之一，全世界約有35％～40％的人口將小麥作為主要糧食作物?，F(xiàn)代食品科學(xué)和營(yíng)養(yǎng)學(xué)研究表明，小麥胚芽中不僅含有豐富優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)、脂肪、維生素、礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，還含有一些生物活性物質(zhì)。已有研究表明在對(duì)小麥胚芽進(jìn)行發(fā)酵后，發(fā)酵提取物中的生物活性物質(zhì)含量明顯增多，但目前國(guó)內(nèi)對(duì)小麥胚芽的發(fā)酵研究較少，且主要集中在小麥胚芽發(fā)酵食品上，對(duì)小麥胚芽發(fā)酵提取物中的生物活性物質(zhì)則基本沒(méi)有研究。小麥胚芽的α—淀粉酶活力很高，

2、與大麥胚芽相當(dāng)，這為用小麥胚芽做為發(fā)酵原料進(jìn)行發(fā)酵提供了充分的條件。 論文以脫脂小麥胚芽(以下簡(jiǎn)稱(chēng)脫脂麥胚)為發(fā)酵原料，篩選適合脫脂麥胚發(fā)酵的菌種，確定了最優(yōu)的發(fā)酵條件，同時(shí)研究了脫脂麥胚發(fā)酵提取物的抗氧化活性、抑菌活性和抗腫瘤活性。論文的主要研究結(jié)果如下： 1．建立一種檢測(cè)脫脂麥胚發(fā)酵提取物中2，6—二甲氧基對(duì)苯醌的高效液相色譜檢測(cè)方法。色譜條件：色譜柱：shim—packVP—ODS(250mm×4.6mm，5μm)

3、，流動(dòng)相采用V(甲醇)：V(水)=75：25，流速1.0mL/min，進(jìn)樣量10μL，柱溫30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)288nm。 2．以脫脂麥胚發(fā)酵提取物中2，6—二甲氧基對(duì)苯醌含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，繪制單菌株產(chǎn)2，6—二甲氧基對(duì)苯醌曲線，從中篩選出最適合小麥胚芽發(fā)酵的菌株，最終確定最優(yōu)的發(fā)酵菌株是安琪耐高溫釀酒高活性干酵母，通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)評(píng)價(jià)五株安琪系列釀酒酵母的發(fā)酵性能，最佳的發(fā)酵條件為：麥胚(W)：水(V)=1：14；麥胚(W)

4、：菌種(W)=3：1；發(fā)酵時(shí)間為36h：發(fā)酵溫度為30℃。 3．測(cè)定了脫脂麥胚發(fā)酵提取物對(duì)DPPH自由基、羥基自由基、超氧陰離子自由基的清除作用并采用同步熒光法測(cè)定了發(fā)酵提取物對(duì)脂質(zhì)氧化的抑制作用。結(jié)果表明，發(fā)酵提取物對(duì)DPPH自由基、羥基自由基有顯著的清除作用，隨著樣品濃度增加，清除作用增強(qiáng)。當(dāng)樣品濃度為1.0mg/ml時(shí)，對(duì)DPPH自由基、羥基自由基的清除率最大，分別為82.9％和86％；提取物對(duì)超氧陰離子自由基的清除作用與

5、抑制脂質(zhì)氧化的作用不明顯，當(dāng)樣品濃度為1.0mg/mL時(shí)的抑制率最大，分別為38％和19％。未發(fā)酵的脫脂麥胚提取物除了高濃度時(shí)對(duì)DPPH自由基有一定的清除作用，在其余抗氧化試驗(yàn)中均未表現(xiàn)出抗氧化活性。 4．采用牛津杯法與濾紙片擴(kuò)散法測(cè)定脫脂麥胚發(fā)酵提取物對(duì)八種主要致病菌的抑制作用，用二倍稀釋法確定發(fā)酵提取物的最小抑菌濃度(MIC)，并且研究了發(fā)酵提取物對(duì)高溫和紫外線的穩(wěn)定性以及不同作用時(shí)間對(duì)抑菌效果的影響。結(jié)果表明，脫脂麥胚發(fā)酵

6、提取物對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌都有明顯的抑制作用，最小抑菌濃度分別為12.5mg/mL，12.5mg/mL，50mg/mL；發(fā)酵提取物對(duì)供試的酵母菌和霉菌無(wú)抑制作用；經(jīng)過(guò)高溫處理和紫外處理的發(fā)酵提取物抑菌活性明顯下降，在12h內(nèi)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)抑制率上升；未經(jīng)發(fā)酵的脫脂麥胚提取物對(duì)八種供試菌都沒(méi)有抑制作用。 5．采用四氮唑藍(lán)(methylthiazolyltetrazolium，MTT)比色分析法，初步研究了脫脂麥

7、胚發(fā)酵提取物的體外抗腫瘤活性。通過(guò)脫脂麥胚發(fā)酵提取物對(duì)人類(lèi)子宮頸癌細(xì)胞Hela細(xì)胞，鼠惡性黑素瘤B16細(xì)胞，人胃痛細(xì)胞SGC細(xì)胞，肺腺癌A549細(xì)胞四種腫瘤細(xì)胞的抑制增殖分析表明，脫脂麥胚發(fā)酵提取物對(duì)四種供試腫瘤細(xì)胞有不同程度的抑制增殖作用，最大抑制率為40.5％，最小抑制率為零。其中，甲醇提取物的抗腫瘤活性?xún)?yōu)于乙醇提取物，隨著作用時(shí)間和濃度的增加，抑制率也增大；發(fā)酵提取物對(duì)B16細(xì)胞株的抑制作用最好。發(fā)酵液的兩種干燥方式對(duì)試驗(yàn)?zāi)[瘤細(xì)胞