草酸鈣結(jié)石的成因與碎石脆性研究.pdf

1、目的：1.應(yīng)用紅外光譜技術(shù)對尿石成分行定性定量分析，建立定量分析校準曲線回歸方程，獲取尿石成分資料，為泌尿道結(jié)石的成因研究積累資料； 2.應(yīng)用高效液相色譜技術(shù)分析24小時尿液中的微量有機酸，建立草酸、枸椽酸的工作曲線，獲取24小時尿液成分資料，為泌尿道結(jié)石的成因研究積累資料； 3.分析草酸鈣結(jié)石患者24小時尿液成分變化，為探討草酸鈣結(jié)石的成因提供依據(jù)； 4.探討CT在預(yù)測一水草酸鈣結(jié)石碎石脆性中的價值，為草酸鈣結(jié)

2、石的治療提供幫助。 方法：對尿石癥患者，術(shù)前常規(guī)行24小時尿液成分分析和CT掃描，獲取尿石癥患者24小時尿液成分資料和尿結(jié)石的CT影像學(xué)資料，術(shù)后采用傅立葉變換紅外光譜法(Fourier trarlsform infrared spectrophotometer，F(xiàn)TIR)行尿石成分分析。選擇草酸鈣結(jié)石(calcium oxalate，CO)(＞94％)患者72例和健康志愿者40例，分為一水草酸鈣(calcium oxalate

3、 morlohydrate，COM)組、二水草酸鈣(calcium oxalate dihydrate，COD)組和正常對照組，對其24小時尿液成分行統(tǒng)計學(xué)分析。選擇COM(＞94％)結(jié)石50例為實驗對象，行體外沖擊波碎石(extracorporeal shockwave lithotripsy，ESWL)，記錄碎石次數(shù)，將COM結(jié)石分為CT結(jié)構(gòu)同質(zhì)組、CT結(jié)構(gòu)異質(zhì)組、介于二者之間組，對其碎石次數(shù)行統(tǒng)計學(xué)分析；將COM結(jié)石分為高CT值組

4、、低CT值組，對其碎石次數(shù)行統(tǒng)計學(xué)分析。 1. 24小時尿液成分分析方法：尿草酸、尿枸椽酸的測定采用高效液相色譜法(high performance liquidchromatography，HPLC)，以不同濃度草酸(99.8％)和枸椽酸(99.8％)為標準液制備標準曲線，尿液樣品經(jīng)酸化、過濾、除蛋白、冷卻、離心后進樣，測定曲線下面積，計算草酸及枸櫞酸的含量；尿量以量筒準確量??；尿PH值以精密PH計測定；尿鈣、尿鎂的測定采用乙二胺四乙

5、酸二鈉絡(luò)合滴定法；尿磷的測定采用鉬蘭比色法；尿酸的測定采用磷鎢酸比色法。 2. 尿石成分分析方法：FTIR分析采用透射法測其吸收光譜，定性分析時將所得樣品紅外光譜圖與尿結(jié)石成分譜庫中標準譜圖對照，根據(jù)特征峰頻率、強度及峰寬等判斷結(jié)石成分，定量分析采用校準曲線法，先建立校準曲線回歸方程，再根據(jù)定性分析結(jié)果選擇適當(dāng)?shù)那€行定量分析。 3.CT值的測量及CT結(jié)構(gòu)異質(zhì)性評估方法：測定CT值時，分測三個層面，每個層面取三等分點，分

6、別記錄各點CT值，計算總體CT平均值為該結(jié)石CT值；行結(jié)構(gòu)異質(zhì)性評估時，分別由2個不同觀察者來判斷結(jié)石的結(jié)構(gòu)異質(zhì)性，了解結(jié)石的影像學(xué)特征，有明顯小葉、中空、分層及異常密度影為結(jié)構(gòu)異質(zhì)，否則為結(jié)構(gòu)同質(zhì)。 4. 體外沖擊波碎石方法：對該50例COM結(jié)石行體外沖擊波碎石，取市售帶皮豬肉一塊、鴨腸一段，將結(jié)石固定于鴨腸腸腔內(nèi)，再將鴨腸固定于豬肉，然后將豬肉固定于一自制梯形木板架上，定位后行ESWL，記錄碎石次數(shù)。 5.統(tǒng)計學(xué)分析

7、方法：所有統(tǒng)計學(xué)分析都應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件。將COM(＞94％)患者40例、COD(＞94％)患者32例和健康志愿者40例分為COM組、COD組、正常對照組，對其24小時尿量、尿PH值、尿鈣、尿磷、尿鎂、尿酸、尿草酸、尿枸櫞酸分別行統(tǒng)計學(xué)分析，分別采用單因素方差分析，計量資料用(X±s)，組間比較用S-N-K法和LSD法；將COM(＞94％)結(jié)石50例，根據(jù)CT結(jié)構(gòu)異質(zhì)性分類分為CT結(jié)構(gòu)同質(zhì)組、CT結(jié)構(gòu)異質(zhì)組、介于二者之間組，對

8、其碎石次數(shù)行統(tǒng)計學(xué)分析，采用單因素方差分析，計量資料用X±s，組間比較用S-N-K法和LSD法：將COM(＞94％)結(jié)石50例，根據(jù)CT值大小分為高CT值組、低CT值組，對其碎石次數(shù)行統(tǒng)計學(xué)分析，采用獨立樣本t檢驗，計量資料用X±s。 結(jié)果：1.對2006年6月至2007年12月在我科住院的尿石癥患者516例行尿石成分紅外光譜分析，定性分析時，CO的檢出率為70.31％，略低于文獻報道的80％以上，COM的檢出率為66.67％，

9、略低于文獻報道的67-71％；定量分析時，分別建立了校準曲線回歸方程，COM在1324cm-1處的校準曲線回歸方程：I＝-3.06×10-4x-3.03×10-3，r=0.993，COD在1316cm-1處的校準曲線回歸方：I=5.50×10-5x+9.20×10-5，r=0.997。 2.采用HPLC法測定24小時尿液中草酸和枸櫞酸的含量，分別得到草酸的工作曲線：Aoxa=12528.4Coxa-641.9，r=0.999，枸

10、椽酸的工作曲線：Acit＝1607.5Ccit-13.8，r＝0.999。 3.對72例COM(＞94％)結(jié)石患者及40例健康志愿者行24小時尿液成分分析顯示：COD組、COM組的尿量明顯低于正常對照組(P＜0.05)，COD組的尿鈣、尿磷、尿草酸明顯高于COM組和正常對照組(P＜0.05)，COM組的尿枸櫞酸明顯低于COD組和正常對照組(P＜0.05)。 4.對50例COM(＞94％)結(jié)石行碎石脆性研究顯示：根據(jù)CT結(jié)構(gòu)異質(zhì)性

11、分組，分為A組(CT結(jié)構(gòu)同質(zhì))、B組(CT結(jié)構(gòu)異質(zhì))和C組(介于二者之間)，兩兩比較，A組碎石次數(shù)多于B組和C組(P＜0.05)，C組的碎石次數(shù)多于B組(P＜0.05)；根據(jù)CT值大小分組，分為1組(CT值1001～1722 Hu)、2組(CT值251～1000 Hu)，1組和2組碎石次數(shù)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.568)。 結(jié)論：1.FTIR技術(shù)可用于對尿石成分的定性定量分析，方法簡便，靈敏度高，重復(fù)性好，可為泌尿道結(jié)石的

12、成因研究提供詳細的資料； 2.HPLC技術(shù)可用于測定24小時尿液中微量草酸和枸櫞酸的含量，靈敏度高，特異性強，可為24小時尿液中微量有機物的檢測提供更簡便可靠的方法，可為泌尿道結(jié)石的成因研究提供依據(jù)； 3.結(jié)石抑制物枸櫞酸的缺乏是形成COM結(jié)石的主要原因之一，高尿鈣、高尿磷、高尿草酸易于形成COD結(jié)石，尿量減少可促進兩種C0結(jié)石的形成。 4.COM結(jié)石的碎石脆性與其CT結(jié)構(gòu)異質(zhì)性相關(guān)，CT結(jié)構(gòu)同質(zhì)的COM結(jié)石碎石