大豆異黃酮及其代謝產物體外抗氧化活性研究.pdf

1、大豆異黃酮主要由黃豆苷原和染料木素組成,是多酚類化合物,在豆科植物如黃豆中含量較高。攝入動物體內的大豆異黃酮,在胃腸道微生物作用下被降解為二氫黃豆苷原(Dihydrodaidzein,簡稱DHD)、雌馬酚(Equol)、去氧甲基安哥拉紫檀素(O-desmethylangolensin,簡稱O-Dma)和二氫染料木素(Dihydrogenistein,簡稱DHG)等不同代謝產物。大豆異黃酮具有抗氧化、抗癌、降低心血管病發(fā)生率等多種生物學活

2、性,這些生物學活性均被認為與氧化應激有關。氧化應激在慢性炎癥疾病的發(fā)病機理中有重要作用。活性氧過多如超氧陰離子、過氧化氫,會對DNA造成損傷而使細胞凋亡。因此,精確測定異黃酮及其代謝產物的抗氧化活性可為構效關系研究和藥物研發(fā)提供理論指導。雖然黃豆苷原、染料木素和一些化學合成的大豆異黃酮代謝產物的抗氧化活性已有報道,但不同研究者報道結果相差較大。
　　 本研究的目的是明確影響羥基自由基、超氧陰離子和二苯代苦味?；杂苫?DPPH)

3、準確測定的主要因素。在羥基自由基試驗中,首次發(fā)現(xiàn)極低濃度(0.4％,v／v)的有機溶劑具有較強的羥基自由基清除能力,其中甲醇與乙醇的清除能力相似,均高于丙酮,而相同濃度的乙腈則未檢測到清除羥基自由基活性。羥基自由基反應體系不穩(wěn)定,加之大豆異黃酮及其代謝產物水溶性差,因此,羥基自由基清除能力不適合作為該類化合物抗氧化活性測定指標。首次發(fā)現(xiàn)甲醇、乙醇和丙酮在0.1％(v／v)濃度下仍具有較強的超氧陰離子自由基清除作用,而乙腈在濃度高達2.0

4、％(v／v)時仍未檢測到清除作用。超氧陰離子自由基雖反應靈敏度高,但因其體系本身過于堿性(pH10.2),不適于酸性化合物自由基清除測定,方法具有一定局限性。DPPH自由基穩(wěn)定,反應體系穩(wěn)定,本研究首次將傳統(tǒng)的檢測時間30min延長至72h,大大提高了檢測靈敏度,可準確測定大豆異黃酮及其代謝產物的體外清除DPPH能力,為異黃酮及其代謝產物抗氧化活性測定的首選方法。在DPPH清除試驗中,全部4種供試濃度中雌馬酚抗氧化活性均最高,染料木素均