大豆異黃酮提取及其組分分離工藝研究.pdf

1、大豆異黃酮是從大豆的成熟種子或其加工副產(chǎn)品中提取的一組異黃酮類(lèi)化合物，是大豆生長(zhǎng)過(guò)程中形成的一類(lèi)次生代謝產(chǎn)物，有很強(qiáng)的生物活性，具有抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)，誘發(fā)癌細(xì)胞凋亡，降低心血管疾病，預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松、動(dòng)脈粥樣硬化以及改善和治療婦女更年期綜合癥等多種生理保健功能。大豆異黃酮因其獨(dú)特的藥用價(jià)值和生物學(xué)活性為大豆的開(kāi)發(fā)應(yīng)用展示了廣闊的前景。本文對(duì)大豆異黃酮的提取、純化和分離工藝進(jìn)行了研究，目的在于尋求一條成本或耗能較低、收益較高、工藝較為簡(jiǎn)單

2、的工藝路線(xiàn)，為大豆異黃酮的工業(yè)化生產(chǎn)提供參考。
　　 通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn)，確定了大豆異黃酮的乙醇提取工藝參數(shù)：大豆粉過(guò)60目篩，在80℃的條件下，用70％（體積分?jǐn)?shù)）的乙醇水溶液，以1：22（w/v）的料液比，提取2次，每次時(shí)間均為2.5 h。
　　 采用乙醇提取脫脂大豆粉中的異黃酮，并對(duì)大豆異黃酮粗提品進(jìn)行了石油醚法脫脂、等電點(diǎn)法脫蛋白的初步處理，結(jié)合大孔樹(shù)脂吸附、乙酸乙酯萃取進(jìn)行了精制，對(duì)于利用大孔樹(shù)脂吸附的靜

3、態(tài)吸附與動(dòng)態(tài)吸附的可能影響因素分別進(jìn)行了研究。通過(guò)對(duì)3種大孔吸附樹(shù)脂靜態(tài)吸附特性的研究，確定了HPD-600樹(shù)脂是一種理想的大豆異黃酮的吸附劑，該樹(shù)脂對(duì)大豆異黃酮不僅吸附量大，而且解吸率高，適合大豆異黃酮的分離富集。通過(guò)對(duì)HPD-600樹(shù)脂的動(dòng)態(tài)吸附特性研究，確定了大豆異黃酮提取液合適的上樣液濃度為0.15 mg/mL、pH值為4.5～5.5、上樣量為4.5 BV、吸附流速為1.5 mL/min，用3.0 BV80％乙醇以1.5 mL/

4、min解吸。大孔樹(shù)脂處理后的大豆異黃酮再經(jīng)乙酸乙酯萃取，甲醇重結(jié)晶，可得90％的產(chǎn)品。
　　 通過(guò)硅膠柱、聚酰胺柱和Sephadex LH-20柱色譜的反復(fù)分離純化，從大豆的乙醇提取物中分離出4種異黃酮單體。通過(guò)HPLC、UV、1H-NMR、13C-NMR等技術(shù)，對(duì)分離得到的4種異黃酮單體A、B、C、D進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定，它們分別為：大豆黃素（daidzein）、大豆苷元糖苷（daidzin）、染料木素（genistein）、染料木