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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
通過用殼聚糖(chitosan,CS)修飾的羥基磷灰石(hydroxyapatite,HA)納米粒載體攜帶骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(Bone morphogenetic protein2,BMP2)基因轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞,研究CS-HA對(duì)成骨細(xì)胞的毒性反應(yīng)、轉(zhuǎn)染后成骨細(xì)胞內(nèi)BMP-2基因表達(dá)情況及對(duì)細(xì)胞增殖與分化的影響,為基因修飾的成骨細(xì)胞的臨床研究奠定基礎(chǔ)。
方法:
復(fù)蘇成骨細(xì)胞株并進(jìn)行傳代培養(yǎng);用殼聚糖對(duì)羥基
2、磷灰石納米粒進(jìn)行表面修飾;采用MTT法檢測(cè)HA-CS納米粒載體對(duì)成骨細(xì)胞的毒性反應(yīng);用HA-CS納米粒載體轉(zhuǎn)染技術(shù),將BMP-2目的基因?qū)氤晒羌?xì)胞,評(píng)估轉(zhuǎn)染效率并采用RT-PCR法鑒定BMP-2的表達(dá);同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞增殖情況及堿性磷酸酶(alkaline phoaphatase,ALP)活性。
結(jié)果:
MTT結(jié)果提示HA-CS納米粒混懸液濃度在500μg/ml以下對(duì)成骨細(xì)胞生長(zhǎng)的影響與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;其轉(zhuǎn)
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