腸組織一氧化氮、一氧化氮合酶及腸細(xì)胞凋亡在新生大鼠壞死性小腸結(jié)腸炎腸損傷中動(dòng)態(tài)變化.pdf

1、目的:建立新生SD大鼠壞死性小腸結(jié)腸炎(NEC)模型，動(dòng)態(tài)觀察新生大鼠NEC發(fā)病過(guò)程中腸細(xì)胞凋亡率和腸組織一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)活性變化及其與腸損傷關(guān)系，為闡明NEC發(fā)病機(jī)制、尋找有效治療藥物提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 :SD新生大鼠出生48小時(shí)開(kāi)始給予鼠配方奶人工喂養(yǎng)，100％氮?dú)馊毖?0秒，4℃冷刺激10分鐘，每天2次，連續(xù)3天，建立新生SD大鼠NEC模型。40只新生SD大鼠隨機(jī)分成模型組(M)32只，對(duì)照組

2、(C)8只。模型組開(kāi)始缺氧冷刺激后24小時(shí)(M24)、48小時(shí)(M48)、72小時(shí)(造模結(jié)束，M72)及最后一次缺氧+冷刺激后24小時(shí)(M96)空腹分別斷頭處死8只，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)處死對(duì)照組大鼠，留取腸管進(jìn)行電鏡觀察及腸細(xì)胞凋亡率檢測(cè)(流式細(xì)胞儀)。40只新生SD大鼠，按上述分組和實(shí)驗(yàn)方法，采用化學(xué)比色法檢測(cè)腸組織NO含量和NOS活性。所有新生鼠均取回盲部近端腸管進(jìn)行病理學(xué)檢查及腸損傷評(píng)分。采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，α=0

3、.05為顯著性檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)果:[1]開(kāi)始造模后，模型組相繼出現(xiàn)腹瀉、腹脹、萎靡、活動(dòng)減少，生長(zhǎng)減慢；透射電鏡示腸黏膜出現(xiàn)大量凋亡細(xì)胞，有些形成凋亡小體。[2]對(duì)照組腸組織損傷評(píng)分和腸細(xì)胞凋亡率(％)分別為0.08±0.15、4.8±2.9；M24、M48、M72和M96腸組織損傷評(píng)分分別為1.38±0.42、1.46±0.69、1.58±0.30和3.33±0.59，腸組織細(xì)胞凋亡率分別為12.8±6.3、14.9±5.5、1

4、7.7±5.5和27.6±9.9。腸損傷程度與腸組織細(xì)胞凋亡率含量呈顯著正相關(guān)(r凋亡率=0.853，p<0.01)。[3]M24、M48、M72、M96及對(duì)照組腸組織NO含量(mol／gprot)分別為0.94±0.44、2.07±0.38、2.88±0.32、3.09±0.40和3.98±1.15，腸組織tNOS活性(U/mgprot)為1.49±0.25、2.21±0.42、2.77±0.58、2.95±0.32和3.80±1.0

5、8，iNOS活性(U/mgprot)為0.55±0.23、1.25±0.27、1.94±0.46、2.06±0.18和2.86±1.07。腸組織NO、tNOS、iNOS含量與相應(yīng)平均腸組織損傷程度均呈顯著正相關(guān)關(guān)系(r分別為0.865、0.743、0.807，P均<0.05)。 結(jié)論:在鼠配方奶喂養(yǎng)+反復(fù)缺氧冷刺激后，腸細(xì)胞凋亡率明顯增加，腸組織NO含量和tNOS活性，特別iNOS活性明顯升高；隨時(shí)間延長(zhǎng)，腸細(xì)胞凋亡增加、腸組織