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1、對(duì)于癌癥而言,早發(fā)現(xiàn)早治療,才能有效的提高生存率。研究發(fā)現(xiàn)在癌癥中一些物質(zhì)如基因、蛋白等會(huì)出現(xiàn)明顯的變化,它們作為腫瘤標(biāo)記物在對(duì)腫瘤的篩選、診斷和判斷預(yù)后以及實(shí)現(xiàn)個(gè)體化治療中扮演著重要的角色。所以,發(fā)現(xiàn)新型的腫瘤標(biāo)記物并建立準(zhǔn)確的檢測(cè)方法對(duì)于癌癥的判斷來說都具有重要意義。
第一章,本章首先介紹了25-羥基維生素D與腺癌的關(guān)系,在整合了25-羥基維生素D與腺癌之間的流行病學(xué)以及分子機(jī)制研究后創(chuàng)新性提出了25-羥基維生素D作為
2、預(yù)測(cè)腺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的標(biāo)記物的可能性,并通過建立的25-羥基維生素D檢測(cè)方法對(duì)129名不同類型的腺癌病人以及81名非腺癌對(duì)照組進(jìn)行了臨床驗(yàn)證(36.5±10.7 nmol/L vs81.4±19.8 nmol/L),結(jié)果表明腺癌病人的25-羥基維生素D含量符合國(guó)際上維生素D缺失標(biāo)準(zhǔn)(50 nmol/L以下)。之后介紹了另一種腫瘤標(biāo)記物融合基因在白血病診斷中的重要性,其中以慢性粒細(xì)胞白血病中的費(fèi)城染色體為例,探析了其融合基因結(jié)構(gòu)以及所形成的融
3、合蛋白功能,總結(jié)了慢性粒細(xì)胞白血病的各種治療方式、分型診斷方法,匯總了目前融合基因的檢測(cè)方法,突顯融合基因檢測(cè)在臨床上的重要性。
第二章,基于目前融合基因檢測(cè)方法的優(yōu)缺點(diǎn),以慢性粒細(xì)胞白血病中BCR-ABL融合基因?yàn)榍腥朦c(diǎn),利用多重RT-PCR技術(shù),結(jié)合毛細(xì)管電泳檢測(cè)技術(shù),建立相應(yīng)的檢測(cè)方法。采用重疊延伸法構(gòu)建了BCR-ABL對(duì)應(yīng)的陽性質(zhì)粒e1a2,e13a2和e14a2用以驗(yàn)證引物的擴(kuò)增效果,并可作為臨床陽性標(biāo)準(zhǔn)品。為了
4、滿足在一個(gè)PCR反應(yīng)中就可以將三種融合形式都檢測(cè)出的要求,進(jìn)行了所有引物的混合,通過PCR反應(yīng)體系以及條件的優(yōu)化,建立了多重PCR檢測(cè)技術(shù)。并與毛細(xì)管電泳(CE)技術(shù)相結(jié)合,可快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)樣本。將構(gòu)建的方法在慢性粒細(xì)胞白血病樣本上進(jìn)行了臨床驗(yàn)證,結(jié)果均為陽性,與測(cè)序結(jié)果以及臨床分析結(jié)果一致。該方法方便快捷、價(jià)格低廉,并能清晰的判斷融合基因融合類型,可作為染色體核型分析的輔助手段,應(yīng)用于白血病臨床初期的分型診斷,并有助于預(yù)后以及療效評(píng)
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