青蒿琥酯對(duì)大鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞增殖和凋亡的影響.pdf

1、目的：研究青蒿琥酯對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞(ratvascularsmoothmusclecells，rVSMCs)增殖和凋亡的影響，并初步探討其作用機(jī)制。方法：體外培養(yǎng)rVSMCs，隨機(jī)分為4組：溶劑對(duì)照組和低、中、高濃度藥物作用組，觀察藥物的不同濃度和作用時(shí)間對(duì)rVSMCs增殖和凋亡的影響。光學(xué)顯微鏡觀察rVSMCs的形態(tài)學(xué)變化；細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況；四氮唑溴鹽(MTT)檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)的活性；WesternBlot方

2、法檢測(cè)Ras信號(hào)通路中胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2(ERK1/2)的蛋白表達(dá)以及磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(p-Akt)和天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)的活性。 結(jié)果：(1)光學(xué)顯微鏡觀察藥物對(duì)rVSMCs生長(zhǎng)的影響： 隨著藥物濃度的增高和作用時(shí)間的延長(zhǎng)，低、中濃度組主要表現(xiàn)為對(duì)rVSMCs生長(zhǎng)的抑制作用，高濃度組除顯示出很強(qiáng)的生長(zhǎng)抑制作用外，尚有促細(xì)胞死亡的作用。 (2)細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)藥物對(duì)rVSMCs

3、增殖的影響： 與溶劑對(duì)照組相比，青蒿琥酯在10μmol/L-50μmol/L范圍內(nèi)，均可成劑量和時(shí)間依賴性抑制rVSMCs的增殖，以50μmol/L作用72h最為顯著，幾乎完全抑制了rVSMCs的增殖(P＜0.01)。 (3)MTT檢測(cè)藥物對(duì)rVSMCs活性的影響： 與溶劑對(duì)照組相比，青蒿琥酯在10-50μmol/L范圍內(nèi)，均可成劑量和時(shí)間依賴性的抑制rVSMCs的活力，以50μmol/L作用72h最為顯著，幾乎

4、完全抑制了rVSMCs的活力(P＜0.01)。 (4)WesternBlot方法檢測(cè)ERK1/2，p-Akt和caspase-9的蛋白表達(dá)：青蒿琥酯可成濃度依賴性下調(diào)ERK1/2和p-Akt的表達(dá)，并促進(jìn)caspase-9的活化。 結(jié)論：(1)青蒿琥酯能有效抑制rVSMCs的增殖，并呈現(xiàn)出明顯的時(shí)間和劑量依賴性。 (2)青蒿琥酯抑制rVSMCs增殖的主要機(jī)制可能是通過(guò)對(duì)Ras-ERK1/2路徑的抑制。 (