大青葉血清抗內(nèi)毒素活性成分研究及質(zhì)量評(píng)價(jià).pdf

1、大青葉系十字花科植物菘藍(lán)(Isatis indigotica Fort.)的干燥葉，為常用的清熱解毒類中藥之一，臨床應(yīng)用多年，療效顯著?，F(xiàn)代研究證明大青葉藥效涵蓋了多種化學(xué)成分，多環(huán)節(jié)、多靶點(diǎn)作用于機(jī)體而發(fā)揮出的綜合效應(yīng)。但是至今為止，對(duì)于大青葉的研究無論是化學(xué)還是藥效學(xué)都過于分散而缺乏系統(tǒng)性，仍然不能明確其藥效物質(zhì)，闡明其作用機(jī)理，導(dǎo)致無論是藥材還是復(fù)方制劑的質(zhì)量控制均沒有科學(xué)客觀的方法和指標(biāo)。因此，有必要尋找與清熱解毒功效相關(guān)的活性

2、指標(biāo)成分，用于評(píng)價(jià)控制大青葉及其制劑的質(zhì)量。 目的：以大青葉清熱解毒功效實(shí)質(zhì)為指導(dǎo)，探尋科學(xué)合理的能反映大青葉藥材及制劑內(nèi)在質(zhì)量的有效控制指標(biāo)，建立大青葉質(zhì)量的化學(xué)評(píng)價(jià)新方法。 方法：本實(shí)驗(yàn)首次以血清藥物化學(xué)的研究手段和方法為基礎(chǔ)，運(yùn)用HPLC-DAD技術(shù)，比較空白血清與含藥血清的差別，建立大青葉口服后血清中移行成分色譜圖。并且在已建立的經(jīng)典的內(nèi)毒素所致家兔發(fā)熱模型的基礎(chǔ)上研究色譜圖與藥效的相關(guān)性。運(yùn)用大孔吸附樹脂、硅膠

3、及HPLC/MS、NMR從大青葉中分離和鑒定活性成分。本文對(duì)6個(gè)產(chǎn)地的大青葉藥材樣品的性狀、鑒別、檢查以及其中的鄰氨基苯甲酸、丁香酸和靛藍(lán)、靛玉紅等兩大類計(jì)4種指標(biāo)成分的含量測(cè)定做了綜合評(píng)價(jià)。 結(jié)果：通過研究發(fā)現(xiàn)血中有一主導(dǎo)成分與抑制內(nèi)毒素所致家兔發(fā)熱活性具有很大的譜效相關(guān)性。并通過比較色譜和光譜圖，在相同的保留時(shí)間下，色譜圖中的特征峰代表的物質(zhì)在含藥血清與灌胃藥液中均有較高含量，其紫外光譜相同，最大吸收在250 nm左右，很可

4、能以上兩種物質(zhì)為同一物質(zhì)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)合其理化性質(zhì)從大青葉中分離得到該成分，命名為“DQY251”，并鑒定其為色胺酮。通過對(duì)6個(gè)不同產(chǎn)地大青葉的質(zhì)量綜合評(píng)價(jià)研究，建立了以鄰氨基苯甲酸、丁香酸和靛藍(lán)、靛玉紅等兩大類為指標(biāo)成分評(píng)價(jià)大青葉質(zhì)量的新方法。 結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用血清藥物化學(xué)方法探討大青葉血清抗內(nèi)毒素活性成分，得到一主導(dǎo)成分——色胺酮，方法科學(xué)、合理，設(shè)計(jì)嚴(yán)謹(jǐn)并具有創(chuàng)新性。同時(shí)建立了大青葉質(zhì)量的化學(xué)評(píng)價(jià)新方法，發(fā)現(xiàn)6個(gè)不同產(chǎn)地的大青