Glypican-3在肝癌的表達(dá)和意義及其在肝癌發(fā)生中的作用.pdf

1、背景和目的 原發(fā)性肝細(xì)胞癌(HCC)是一種常見(jiàn)惡性腫瘤，其發(fā)病隱匿，早期無(wú)明顯的癥狀，而且惡性程度高、進(jìn)展快，臨床就診時(shí)約2/3的患者已屬中晚期，五年生存率很低，因此，早期診斷是提高肝癌療效的關(guān)鍵因素之一。AFP是目前最常用的檢測(cè)肝癌的比較敏感和可靠的血清學(xué)指標(biāo)，大約60-70％的肝癌患者血清AFP陽(yáng)性。尋找出一個(gè)新的、在AFP陰性血清也能檢測(cè)到的特異的標(biāo)志物將可提高肝癌的早期診斷水平，進(jìn)而達(dá)到早期治療提高療效目的。近來(lái)一些研究

2、表明GPC-3很可能是一個(gè)敏感的肝癌標(biāo)志物和基因治療的靶基因，本研究對(duì)大量血清標(biāo)本和組織進(jìn)行檢測(cè)，明確HCC患者中GPC-3表達(dá)情況、及其表達(dá)水平和臨床參數(shù)之間的關(guān)系。同時(shí)通過(guò)檢測(cè)人肝癌及相應(yīng)癌旁肝組織中GPC-3與IGF-Ⅱ基因在mRNA水平和蛋白質(zhì)水平的表達(dá)情況，進(jìn)一步揭示HCC的發(fā)生發(fā)展機(jī)理。 方法 對(duì)大量血清標(biāo)本進(jìn)行ELISA檢測(cè)(肝癌患者血清60份、正常人14份、肝炎或肝硬化患者血清各13份)。用RT-PCR檢

3、測(cè)GPC-3與IGF-Ⅱ基因的mRNA和在70例人肝癌組織、癌旁肝組織和18例正常肝組織中的表達(dá)情況，以及與肝癌患者的血清AFP水平、腫瘤個(gè)數(shù)、腫瘤直徑、臨床分期、有無(wú)術(shù)后復(fù)發(fā)、有無(wú)肝外轉(zhuǎn)移、有無(wú)門(mén)靜脈癌栓、病理分級(jí)等指標(biāo)的關(guān)系。同時(shí)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)GPC-3與IGF-II基因的蛋白在80例人肝癌組織、癌旁肝組織和8例正常肝組織中的表達(dá)情況，以及與肝癌患者的血清AFP水平、腫瘤個(gè)數(shù)、腫瘤直徑、臨床分期、有無(wú)術(shù)后復(fù)發(fā)、有無(wú)肝外轉(zhuǎn)移、

4、有無(wú)門(mén)靜脈癌栓、病理分級(jí)等指標(biāo)的關(guān)系。 結(jié)果 GPC-3血清中陽(yáng)性臨界濃度定為60pg/ml時(shí)，GPC-3肝癌患者血清中的陽(yáng)性率為：66.67％(40/60)；GPC-3在肝炎、肝硬化組血清中的陽(yáng)性率為：15.38％(2/13)；在14例正常人血清中不表達(dá)。GPC-3在肝癌血清<'*>1．廣西留學(xué)歸國(guó)人員科學(xué)基金(桂科回0448020)資助項(xiàng)目2．廣西醫(yī)科大學(xué)研究生科研創(chuàng)新項(xiàng)目(309109)資助中的陽(yáng)性率明顯高于在肝

5、炎、肝硬化組血清中的陽(yáng)性率，兩者比較有顯著性差異性(P<0.05)。GPC-3在肝癌患者血清中的表達(dá)與臨床分期、肝外轉(zhuǎn)移、術(shù)后復(fù)發(fā)及血清AFP水平相關(guān)(P<0.05)，而與門(mén)靜脈癌栓、腫瘤個(gè)數(shù)、腫瘤大小、HBsAg及腫瘤分化程度無(wú)明顯關(guān)系(P>0.05)。在人肝癌血清中，GPC-3的陽(yáng)性率(66.67％)與AFP的陽(yáng)性率(66.67％)未見(jiàn)差異(P>0.05)。用RT-PCR檢測(cè)到70例HCC組織中GPC-3mRNA的陽(yáng)性率為82.85

6、％(58/70)明顯高于癌旁組織的陽(yáng)性率34.28％(24/70)(P<0.01)；58例HCC組織中GPC-3mRNA表達(dá)水平(0.596±0.205)明顯高于24例癌旁組織中表達(dá)水平(0.428±0.137)(P<0.05)；18例正常肝組織中未檢測(cè)到GPC-3的表達(dá)。70例HCC組織IGF-ⅡmRNA陽(yáng)性率為92.86％(65/70)明顯高于癌旁組織的陽(yáng)性率81.43％(60/70)(P<0.05)；65例陽(yáng)性表達(dá)IGF-ⅡmRN

7、A的HCC組織中表達(dá)水平為(0.750±0.309)明顯高于在60例癌旁肝組織中的表達(dá)水平(0.648±0.237)(P<0.05)；18例正常肝組織IGF-Ⅱ基因的表達(dá)水平(0.495±0.192)。GPC-3 mRNA和IGF-Ⅱ mRNA在肝癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)r=0.281，P=0.038)，而兩者在癌旁肝組織的表達(dá)無(wú)相關(guān)性(相關(guān)系數(shù)r=-0.165，P=0.500)。用免疫組化方法檢測(cè)GPC-3、IGF-Ⅱ在肝癌組

8、織中的陽(yáng)性率分別為73.75％和76.25％，而在癌旁肝組織中的陽(yáng)性率分別為53.75％和48.75％，差異有顯著性(P<0.05)；在癌組織中g(shù)lypican-3與IGF-Ⅱ的表達(dá)呈正相關(guān)。兩種方法檢測(cè)同時(shí)發(fā)現(xiàn)glypican-3基因和IGF-Ⅱ基因在人肝癌組織中的表達(dá)與臨床分期、腫瘤分化程度、肝外轉(zhuǎn)移及腫瘤大小相關(guān)(P<0.05)，而與門(mén)靜脈癌栓、腫瘤個(gè)數(shù)、血清AFP水平及術(shù)后復(fù)發(fā)無(wú)明顯關(guān)系(P>0.05)。 結(jié)論