SCCA在肝癌中的表達(dá)特點及其臨床意義的研究.pdf

1、研究目的:鱗狀細(xì)胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen，SCCA)是絲氨酸蛋白酶抑制劑家族成員，生理性表達(dá)于皮膚的鱗狀上皮組織，多數(shù)研究顯示，SCCA與鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)展、復(fù)發(fā)和預(yù)后有關(guān)，是反映鱗狀細(xì)胞癌生物學(xué)特性的重要標(biāo)志物。近年來國外研究發(fā)現(xiàn)，SCCA在肝癌組織中呈明顯的高表達(dá)，而正常肝臟組織未見表達(dá)，提示SCCA可能為一種新的肝癌診斷標(biāo)志物。本研究旨在從mRNA和蛋白水平檢測SCCA兩亞型SCCA1

2、和SCCA2在各類肝病患者組織中的表達(dá)情況，探討其與臨床病理因素的關(guān)系及其在肝癌預(yù)后評估中的價值。
　　研究方法:采用RT-PCR和基因測序的方法檢測A組211例組織標(biāo)本SCCA1、2 mRNA表達(dá)情況，包括肝癌(n=93)、癌旁(n=93)、肝硬化(n=16)、正常肝組織(n=9)，采用IHC方法檢測B組129例組織標(biāo)本SCCA1蛋白的表達(dá)情況，包括肝癌(n=62)、癌旁(n=43)、肝硬化(n=10)、胰腺癌(n=6)、膽管細(xì)

3、胞癌(n=3)、正常肝組織(n=5)，Western blot方法檢測B組中6例HCC及相鄰的癌旁組織、3例肝硬化、3例正常肝臟組織中蛋白的表達(dá)。探尋SCCA1、2 mRNA表達(dá)與肝癌病理分級、TNM分期等臨床病理特征的關(guān)系，并通過生存分析探討其與肝癌預(yù)后的關(guān)系。
　　研究結(jié)果:RT-PCR結(jié)果顯示:SCCA mRNA在肝癌、癌旁、正常肝臟中的陽性率分別為33.3％(31/93)、9.68％(9/93)、22.2％(2/9)，其在

4、肝硬化組織中未發(fā)現(xiàn)表達(dá)(0/16)。肝癌中的表達(dá)率高于癌旁及肝硬化組織，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000，0.006)。通過基因測序后比對發(fā)現(xiàn)31例SCCA陽性的肝癌中SCCA1和SCCA2陽性各27例，其中23例SCCA1、2mRNA共表達(dá)。27例SCCA1陽性標(biāo)本中的16例存在突變T357A，該突變在肝癌中表達(dá)之前尚未見報道。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示:62例肝癌、43例癌旁肝組織、10例肝硬化、5例正常肝臟中均未發(fā)現(xiàn)SCCA1的表達(dá);W

5、estern blot顯示所檢測的6例肝細(xì)胞癌均有SCCA1表達(dá)，其中5例高表達(dá)于癌旁，1例表達(dá)與癌旁相當(dāng)，3例肝硬化中1例陽性，3例正常肝臟中均不表達(dá)。
　　相關(guān)分析顯示肝癌患者SCCA1 mRNA表達(dá)率在低分化組中的表達(dá)率高于高、中分化組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.021)。SCCA1野生型較突變型的肝癌更易形成腫瘤包膜(P=0.034)。生存分析顯示SCCA1、2 mRNA陽性組較陰性組中位生存期及1、2年的累計生存率雖有下