細(xì)胞外基質(zhì)蛋白-1在肝癌中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、目的：(1)分析ECM1mRNA和蛋白在不同轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細(xì)胞株、肝癌組織、癌旁組織中的表達(dá)水平,探討ECM1與侵襲轉(zhuǎn)移間的關(guān)系。(2)檢測(cè)肝癌組織中ECM1的表達(dá)及肝癌患者術(shù)前血清中ECM1的濃度,分析ECM1表達(dá)水平與肝癌臨床病理特征及生存預(yù)后間的相關(guān)性,探討ECM1在肝癌轉(zhuǎn)移和術(shù)后復(fù)發(fā)過(guò)程中的作用,及其促進(jìn)肝癌侵襲轉(zhuǎn)移可能的分子機(jī)制,對(duì)肝癌的預(yù)后判斷進(jìn)行評(píng)估。
　　方法：(1)通過(guò)運(yùn)用RT-PCR、Western Blot方

2、法,檢測(cè)肝癌和癌旁組織及具有相似遺傳背景、不同轉(zhuǎn)移潛能的人肝癌細(xì)胞株中ECM1的表達(dá)水平,分別從mRNA及蛋白水平比較其表達(dá)水平與肝癌侵襲轉(zhuǎn)移間的關(guān)系。(2)采用ELISA方法檢測(cè)肝癌患者術(shù)前血清中ECM1的濃度,分析ECM1的表達(dá)與肝癌臨床病理特征及術(shù)后生存預(yù)后的關(guān)系。(3)通過(guò)免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)肝癌患者組織中ECM1和MMP-9的表達(dá),探討兩者間的關(guān)系,及與肝癌臨床病理特征及生存預(yù)后間的關(guān)系。
　　結(jié)果：(1)不同轉(zhuǎn)移潛能的

3、人肝癌細(xì)胞株中ECM1表達(dá)量存在明顯差異,隨著細(xì)胞株轉(zhuǎn)移潛能的逐步增加ECM1表達(dá)量呈升高趨勢(shì):MHCC97-L

4、QR137.83pg/ml-267.27pg/ml),明顯高于正常對(duì)照組的108.06pg/ml(IQR88.26pg/ml-126.74pg/ml),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001),并且發(fā)現(xiàn)血清ECM1濃度與腫瘤大小(P=0.001)、結(jié)節(jié)數(shù)(P=0.028)、血管侵犯(P<0.001)和TNM分級(jí)有關(guān)(P<0.001),而與其他因素?zé)o明顯相關(guān)性。采用Cox多因素風(fēng)險(xiǎn)分析表明,肝癌患者術(shù)前血清中ECM1高濃度(>180pg/ml

5、)是肝癌患者總生存率和無(wú)瘤生存率的獨(dú)立影響因子。(3)免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示:ECM1和MMP-9均主要表達(dá)于細(xì)胞胞漿中,在所檢測(cè)的標(biāo)本中,ECM1和MMP-9在肝癌組織中的表達(dá)陽(yáng)性率分別為73.3％(88/120)和65.0%(78/120),明顯高于正常肝組織中的23.5%和11.8%。ECM1和MMP-9在肝癌組織中的表達(dá)與腫瘤血管侵犯及TNM分級(jí)相關(guān),而且MMP-9還與腫瘤的大小、結(jié)節(jié)數(shù)、分化程度和肝硬化程度有關(guān)(P<0.05

6、),而兩者均與患者性別、年齡、血清AFP水平、HBsAg狀態(tài)、child-pugh分級(jí)、包膜情況、分化程度等無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)。ECM1和MMP-9均陽(yáng)性表達(dá)患者的總生存率和無(wú)瘤生存率明顯低于有一項(xiàng)陽(yáng)性或全陰性表達(dá)患者。Cox多因素風(fēng)險(xiǎn)分析表明ECM1和MMP-9的表達(dá)是肝癌患者總生存率及無(wú)瘤生存率的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子。ECM1與MMP-9在肝癌中的表達(dá)具有顯著正相關(guān)(r=0.585,P<0.001)。
　　結(jié)論：ECM1的表